医学微生物学实验医学知识培训课件

1、医学微生物学实验医学知识医学微生物学实验医学知识一、微生物的分布微生物分布非常广泛。通过对外界微生物的检查，了解微生物在自然界中的分布，从而树立“有菌观点”，认识“无菌操作” 对于微生物学及医学实践的重要性。2医学微生物学实验医学知识一、微生物的分布微生物分布非常广泛。2医学微生物学实验医学实验操作步骤：1取琼脂平板2个，一个启开皿盖，培养基面向上，放在实验桌上，30min后盖好皿盖。另1个平板，不启开盖作为对照。22个平板均置37培养1824h，观察结果。空气中微生物的检查3医学微生物学实验医学知识实验操作步骤：1取琼脂平板2个，一个启开皿盖，培养基面向上1、消毒（disinfection）

2、：杀灭物体上或环境中的病原微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。消毒剂（disinfectant）：用以消毒的药品2、灭菌（sterilization） ：杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。（一）消毒灭菌的常用术语:二、理化因素对微生物的影响4医学微生物学实验医学知识1、消毒（disinfection）：杀灭物体上或环境中的病3、防腐（antisepsis）防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。防腐剂（antiseptic）：用以防腐的药物。4、无菌（asepsis）：不存在活菌的意思，多是灭菌的结果。 5、无菌操作(ase

3、ptic technique)：防止细菌及其他微生物进入人体或其他物品的操作技术。5医学微生物学实验医学知识3、防腐（antisepsis）防止或抑制皮肤表面细菌生长医学微生物学实验医学知识培训课件1、高压蒸汽灭菌法 103.4kPa（1.05kg/cm2) （121.3 ，维持1520min ） 灭菌效果最好，可杀灭包括细菌芽胞在内的所用微生物。 常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌。高压蒸汽灭菌器7医学微生物学实验医学知识1、高压蒸汽灭菌法 103.4kPa（1.05kg/cm22、手指皮肤消毒前后微生物的检查 络合碘对细菌的作用（示教）（1）取琼脂平板1个，将底面

4、分成两等份，注明A/B。（2）用无菌棉签蘸生理盐水，在左手食指头上涂擦。用该指头在平板A处琼脂表面涂抹，作为消毒前的对照。（3）用棉签蘸络合碘消毒左手食指。待络合碘干后，依上法在平板B处琼脂表面涂抹。（4）置平板于37培养1824h。8医学微生物学实验医学知识2、手指皮肤消毒前后微生物的检查 平板A处琼脂表面有细菌生长，B处不长细菌或出现极少的菌落。说明一定浓度的络合碘能杀灭细菌。【结果】 9医学微生物学实验医学知识平板A处琼脂表面有细菌生长，B处不长细菌或出现极少的菌落。说3、抗生素敏感试验（示教）一种抗生素只对一定种类的生物细胞有拮抗作用，这种作用范围称抗菌谱。抗生素的抗菌机制 影响细胞壁

5、的合成； 损伤或破坏细胞膜的结构； 干扰细胞碳水化合物的代谢； 抑制核酸或蛋白质的合成，这些作用都有一定的选择性。10医学微生物学实验医学知识3、抗生素敏感试验（示教）一种抗生素只对一定种类的生物细胞观察纸片周围有无抑菌圈，并量出抑菌圈直径大小，得出待测菌对所试抗生素的敏感性。纸片琼脂扩散法试验程序（a）挑取菌落 （b）转种肉汤 （c）比浊 （d）涂布平板上 （e）放置药敏纸片 （f）量取抑菌圈大小11医学微生物学实验医学知识观察纸片周围有无抑菌圈，并量出抑菌圈直径大小，得出待测菌对所4、紫外线杀菌实验紫外线DNA T - T二聚体波长240300nm，265266nm最强干扰DNA复制与转录

6、变异或死亡（1）原理：12医学微生物学实验医学知识4、紫外线杀菌实验紫外线DNA T - T二聚体波长2（2）特 点 穿透力较弱； 仅能杀死细菌的繁殖体，不能杀死细菌的芽胞。（3）临床应用 仅用于实验室、传染病房、手术室的空气或不耐热物品的表面消毒。 注意事项： 紫外线可损伤皮肤、眼睛，使用时应注意防护。13医学微生物学实验医学知识（2）特 点 穿透力较弱；（3）临床应用13医学微生三、细菌的分解代谢产物和细菌的生化反应细菌的新陈代谢分解代谢合成代谢热原质毒素与侵袭性酶色素抗生素细菌素维生素合成代谢产物14医学微生物学实验医学知识三、细菌的分解代谢产物和细菌的生化反应细菌的新陈代谢分解代谢细菌

7、的分解代谢产物和生化反应（示教） 细菌对糖、蛋白质的分解能力的不同，因而代谢产物各异，利用生物化学方法鉴别不同细菌称为细菌的生化反应。15医学微生物学实验医学知识细菌的分解代谢产物和生化反应（示教） 细菌对糖、蛋白质的糖发酵试验：乳糖乳酸乳糖酶葡萄糖发酵试验：细 菌葡萄糖丙酮酸各种酸类甲 酸H2 + CO2脱氢酶16医学微生物学实验医学知识糖发酵试验：乳糖乳酸乳糖酶葡萄糖发酵试验：细 菌葡萄糖丙酮吲哚试验（Indole test):色氨酸色氨酸酶氨基苯甲醛玫瑰吲哚甲基红试验(Methy red test):葡萄糖细菌丙酮酸 脱羧乙酰甲基甲醇（中性）pH5.4 桔黄色:阴性pH4.5 红色:阳性

8、17医学微生物学实验医学知识吲哚试验（Indole test):色氨酸色氨酸酶氨基苯甲VP试验：葡萄糖细菌丙酮酸脱羧乙酰甲基甲醇氧化二乙酰含胍基化合物红色的化合物( VP试验阳性)枸橼酸盐利用试验（Citrate utilizatio)：枸橼酸盐碳酸盐铵 盐氨溴麝香草酚蓝(淡绿)深蓝碱性18医学微生物学实验医学知识VP试验：葡萄糖细菌丙酮酸脱羧乙酰甲基甲醇氧化二乙酰含胍基化IMViC试验大肠杆菌：+ - - 产气杆菌：- + +19医学微生物学实验医学知识IMViC试验19医学微生物学实验医学知识第1页：实验内容一、微生物的分布及理化因素对微生物的影响 1、空气中微生物的检查（示教） 2、手指皮肤消毒前后微生物的检查（示教） 3、紫外线杀菌试验（自