杜仲叶中绿原酸的提取研究

1、杜仲叶中绿原酸的提取研究刘军海，任惠兰，裘爱泳【摘要】目的研究以丙酮为溶剂提取杜仲叶绿原酸的最正确工艺条件。要领通过单因素实行研究各因素对提取率的影响，应用正交实行优化工艺条件。结果丙酮提取杜仲叶绿原酸最正确工艺条件为：丙酮浓度40%，提取温度65，料液比113，提取时间2h，提取两次。结论在最正确条件下，绿原酸提取率和得率别离为2.25%，17.15%，纯度到达13.12%。【关键词】绿原酸；提取；杜仲叶；丙酮Keyrds：hlrgeniaid；Extratin；LeaffEulaUlides；Aetne绿原酸是植物体在有氧呼吸历程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物1。绿原酸是一种具有普

2、及生理活性和药理活性的物质，具有利胆、抗菌、落压、增长白血球及快乐中枢神经体系、抗肿瘤、落脂、扫除自由基等多种药理作用，对消化体系、血液体系和生殖体系疾病均有明显疗效16。因此，绿原酸在医药制剂上应用越来越普及，是如今国际公认的“植物黄金。绿原酸重要存在于杜仲、金银花、葵花籽粕、元宝枫等植物中7，8。近几年研究创造，杜仲叶Euiaulidesleaves中含有较高的绿原酸，其叶中含量为1%5.5%9，10。杜仲是我国的特别经济林，在我国种植面积相称普及，天下约有杜仲林28万ha，每年可产叶400万吨11，而杜仲叶的使用率仅占可网罗叶的10%20%。因此使用杜仲叶消费绿原酸具有宏大的社会效益和经

3、济意义。在中草药有用身分提取历程中，常用乙醇为溶剂。我们在提取杜仲叶绿原酸研究中创造，乙醇提取固然得率相对较高，但在提取历程中醇溶性卵白质、黏液、树脂、鞣质、色素、油脂等杂质析出量大，过滤较困难，尤其是当溶剂中含水量高时越发显着，同时赐与后的分散纯化工序造成很大困难。因此有需要探求更好的提取剂提龋绿原酸属酚酸类化合物12，也属植物多酚类物质13。有资料报道14，丙酮和丙酮-水体系对植物多酚具有很强的溶解性，并且用丙酮提取杜仲叶中重要活性身分的工艺未见文献报道。本实行接纳丙酮-水体系对杜仲叶中绿原酸提取工艺举行研究。1东西与要领1.1质料与仪器杜仲叶，购于北京某地域，为初秋网罗叶。绿原酸尺度品中

4、国药品和生物成品断定所；丙酮、正丁醇、冰乙酸均为阐发纯上海试剂公司；实行用水为去离子水。Uni-2100型紫外可见光分光光度计上海龙尼柯仪器；RE-52AA型旋转蒸发器上海亚荣生化仪器厂；365n紫外阐发仪上海科艺光学仪器厂；SHZ-III循环水多用真空泵上海亚荣生化仪器厂。1.2要领2结果2.1丙酮浓度对提取率的影响在提取温度35，料液比112，提取时间2h，丙酮浓度对绿原酸提取率的影响见图1。由图1可以看出，当浓度低于40%时，随着丙酮浓度的增长，绿原酸的提取率升高，用40%丙酮的提取，其提取率最高。随后，绿原酸的提取率随丙酮的浓度的升高而低落。2.2温度对提取率的影响差异提取温度对绿原酸

5、提取率的影响见图2。从图2可以看出，随着提取温度的升高，其提取率增长，当温度高于55时，不再增长。这是由于温度升高，分子活动加快，有利于分子的扩散，有利于活性物质的溶出；当温度过高时，丙酮气化，倒霉于活性身分的析出，并且温度过高，杂质溶出量也相应增大，活性身分易剖析粉碎。2.3料液比对提取率的影响差异料液比对绿原酸提取率的影响见图3。随着溶剂量的增长，浸提结果也随之增高，但进步幅度减校当料液比超112时，它们的提取率无显着变革。料液比过大给后续蒸发工序造成困难，且本钱增大，因此，料液比接纳112摆布为宜。2.4提取时间对提取率的影响在提取液中，当植物质料细胞表里活性身分含量未到达平衡时，提取率

6、随提取时间的延伸而增长。一旦细胞表里浓度到达平衡，活性身分不再溶出。提取时间对绿原酸提取率的影响见图4。从图4可以看出，随着提取时间的增长，绿原酸的提取率不竭进步，尤其是从1h延伸到2h时，绿原酸提取率进步幅度较大，提取时间在2h和3h之间绿原酸提取率根本保持稳定趋势。而提取时间在3h以后绿原酸提获得率出现出迟钝上升趋势。2.5提取次数对提取率的影响在别的条件稳定的环境下，提取次数对绿原酸提取率的影响见图5。从图5可以看出，提取次数多，绿原酸的提取率高。当提取次数凌驾两次时，提取率增长不显着。以是，提取次数以两次为好。2.6pH值对提取结果的影响在结实料液比112，提取温度35，提取时间2h的

7、环境下，用差异pH的40%丙酮提取，浸提剂pH对提取结果的影响见图6。从图6可以看出，对付绿原酸的提取，当pH值低于4时，随着pH值的增长提取率增长；当pH=4时，绿原酸的提取率到达最大；当pH值再增长时，提取率落落。绿原酸是极性有机酸，在酸性介质中比力稳定，因此，绿原酸的提取，宜在酸性溶剂中举行。但是，无论是碱性溶剂提取照旧酸性溶剂提取，都市影响废水的排放处置惩罚，从财产化和环境庇护思量，其均不宜在酸性或碱性溶剂中提取，宜在中性水溶液中举行，因此，pH值对提取率的影响在以后的工艺条件优化中不做思量。2.7丙酮-水溶液提取绿原酸工艺条件的优化从以上单因素可知，杜仲叶绿原酸在提取历程中，受到浸提

8、时间、温度、丙酮浓度和丙酮溶液用量等因素的影响。为探究最正确提取条件，在单因素的底子上，对上述4个因素别离取3个程度，接纳L934正交实行方案举行优化，各因素和程度如表1。正交实行方案和结果见表2。各因素与绿原酸提取率的干系直不雅图见图7。表1影响绿原酸提取率的因素及程度数略表2绿原酸提取正交实行表L934略对正交实行有关数据作极差阐发，结果见表2。由表2可知，各因素对绿原酸提取率的影响程度依次为AB。在4个影响因素中，料液比、温度对提取率影响较大，其次是丙酮浓度，影响最小的是浸提时间。由图7表白，以绿原酸提取率为观察指标，依次最正确工艺条件是A3B22D3，各因素的最正确程度别离是：浸提温度

9、65，浓度40%，料液比112，浸提时间3h。说明绿原酸提取率显着受到温度的影响，由于升高温度，增长分子的热活动，使溶剂和叶粉分子间的通报加快，有利于绿原酸的浸出。但绿原酸为热敏性物质，温度过高，会造成绿原酸的剖析，并引起丙酮汽化挥发丧失。因此温度操纵在65以下。丙酮的浓度对提取率的影响次之，随着浓度增长，溶剂极性低落，同绿原酸的极性差拉大，倒霉于绿原酸的浸出。料液比的增大，溶剂与叶粉固体溶质间的浓度差增大，有利于传质，因此，绿原酸提取率增大。料液比增大，固然有利于传质，但料液接纳量增长影响本钱。因此，料液比应操纵在112为最正确。浸提时间延伸，有利于提取率的增长，但时间过长，绿原酸剖析，反而低落绿原酸的含量，时间过短，也倒霉于绿原酸的浸提，应操纵在3h以内为宜。在提取历程中创造，丙酮-水体系作浸提剂，其提取液中卵白质、黏液含量淘汰，而糅质含量增长，卵白质在丙酮中的溶解度较小，而丙酮-水体系为糅质的最正确溶剂14；提取液始终呈褐色，叶绿素等色素析出较少。因此，接纳丙酮-水体系制止了醇溶性色素的大量析出，有利于绿原酸的分散和纯化。但缺点是丙酮溶液提取，其绿原酸提取率相对付水溶液提取和醇溶液提取低。2.8最正确条件下的放大验证明行取100g枯燥粉碎的杜仲叶装入2000l烧瓶中，在最正确提取条件下浸提，重复实行3次取均匀值。结果见表3。表3丙酮提取工艺验证明行结果略3结论接纳丙