兽医临床病理学第三节课件

1、兽医临床病理学第三节兽医临床病理学第三节兽医临床病理学第三节一、临床化学自动分析仪 世界上第一台用于临床生化检验的自动分仪，是美国泰克尼康公司TECHNICON， 于 1957年生产的，仪器名为Auto Analyzer。 是一台单通道、连续、流动式自动分析仪。最初只用于Glu. BUN 测定。 报告结果是光密度值。 第一页，共49页。兽医临床病理学第三节兽医临床病理学第三节兽医临床病理学第三节一、临床化学自动分析仪 世界上第一台用于临床生化检验的自动分仪，是美国泰克尼康公司TECHNICON， 于 1957年生产的，仪器名为Auto Analyzer。 是一台单通道、连续、流动式自动分析仪。

2、最初只用于Glu. BUN 测定。 报告结果是光密度值。 第二页，共49页。一、临床化学自动分析仪第二页，共49页。 1964年，泰克尼康公司又生产出连续、多道自动分析仪 SMA。 Sequential multiple Auto analyzer，该仪器由电子计算机控制，每小时测150个样本，每个样本同时测定20个工程，使连续流动分析到达了一个新的水平。 65年以后，各种自动分析仪器应运而生。第三页，共49页。 1964年，泰克尼康公司又生产出连续、多道自动分析 1目前临床常用的自动分析仪器有1生化分析仪 有半自动、全自动和进口、国产 2血气酸碱分析仪 3血细胞计数仪 4全自动电位滴定仪 5

3、全自动血液细胞分析仪 第四页，共49页。 1目前临床常用的自动分析仪器有第四页，共49页。 2评价自动分析仪器的原那么 1方法先进 2重复性好 3要有准确重复的分析系统 4能自动定时 5结果报告醒目、直观 6适应范围广，一机多用 7灵敏性好 8处理能力强 9实用 第五页，共49页。 2评价自动分析仪器的原那么第五页，共49页。 二、质量控制 1质量控制的目的 保证检测结果准确、可靠 通过质量控制，能够到达 了解试验结果的精细度 防止试验出现误差 了解和校正试验的准确度 进展实验室之间的比较 监测仪器的工作状态 了解操作者的操作水平 第六页，共49页。 二、质量控制第六页，共49页。 2与质量控

4、制有关的概念【误差】 指的是实验结果与真实数值之间的差异 系统误差恒定误差 原因：仪器使用不当 分析方法不完善 试剂不纯 环境改变 操作失误 第七页，共49页。 2与质量控制有关的概念第七页，共49页。 随机误差偶然误差 事先无法预料，出现误差的大小没有规律，完全符合概率论定律。这种误差通过严格操作规程，认真细致的工作是可以减少。当测定次数增多时，此时误差可相应抵消。 过失误差 由工作不慎或操作不当而引起。如配错试剂，搞错样本，操作不正确，读数、记录或计算有误等。第八页，共49页。 随机误差偶然误差第八页，共49页。 绝对误差 即测定值与真值之差 如：称量为1.655g，实重1.654g，绝对

5、误差为 0.001g。 相对误差 绝对误差在真实数值中所占的百分率 如上例： 相对误差 = 0.001/1.654100% = 0.06 %第九页，共49页。 绝对误差第九页，共49页。【准确度】 测定值与真值之间的符合程度 误差愈小，准确度越大【精细度】 每次测定值与算术平均值之间的符合程度 通常把测定值与算术平均值之间的差异称之为偏差。 偏差愈小，准确度愈高。 第十页，共49页。【准确度】第十页，共49页。3减少误差的措施 纠正系统误差 a校准仪器和量具 b作阴性、阳性对照 c用多种方法相互比较 d用参照标准样本检验第十一页，共49页。3减少误差的措施第十一页，共49页。 减少偶然误差 a

6、精心操作，严格执行操作规程 b固定使用已校正的仪器 c重复测定取均值等 消除过失误差 a作好原始记录 b建立核对检查制度 c制订统一的操作规程，人人遵守第十二页，共49页。 减少偶然误差第十二页，共49页。三、临床化学检验一 常用的检验工程 蛋白质 葡萄糖 脂类 无机离子 有机物：BUN，尿酸，肌肝、肌酸 微量元素：Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co、Mo 血气分析与酸碱平衡等第十三页，共49页。三、临床化学检验第十三页，共49页。二 各项检验 【蛋白质】 1.研究进展迅速 蛋白质的合成、降解、转换更新和代谢调节 蛋白质生理功能的进一步研究 蛋白质的遗传变异，通过它了解遗传特征 以新技术对血浆

7、蛋白质进展微量和特异检测分析 在进化与个体发育的研究中，发现不少正常胎儿 期蛋白可以在恶性肿瘤患者重新出现 蛋白质实际用于组织与细胞培养 在肿瘤的发病学研究中广泛涉及血浆蛋白质第十四页，共49页。二 各项检验第十四页，共49页。2.蛋白质的功能 可概括为： 营养作用 维持血浆胶体渗透压 维持血浆正常pH值 运输作用 免疫与防御功能 催化作用 代谢调控 凝血、抗凝血及纤溶作用等第十五页，共49页。2.蛋白质的功能 第十五页，共49页。 盐析法：白蛋白和球蛋白 电泳法：白蛋白、1、2、球蛋白 第十六页，共49页。第十六页，共49页。 凯氏定氮法参考标准方法 消化用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵耗时 蒸

8、馏用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发； 吸收用酸性溶液硼酸吸收气态氨使H+ 滴定用已标定的无机酸滴定，计算总氮量 定蛋白总氮量-非蛋白氮6.25 = 蛋白含量第十七页，共49页。第十七页，共49页。 双缩脲比色法血浆总蛋白测定推荐方法 原理 蛋白质中的肽键-CONH-在碱性条件下与Cu2+络合成紫红色化合物，产生的颜色在一定范围内与蛋白质含量成正比。此反响和二分子尿素缩合后的产物双缩脲 H2N-CO-NH-CO-NH2与碱性铜溶液作用形成紫红色化合物的反响相似，故称为双缩脲反响。 此方法简便、准确、重复性好，但灵敏度较其它方法稍差，是目前临床上最常规的方法。第十八页，共49页。 双缩脲比色法血浆总

9、蛋白测定推荐方法第十八页，共49页 紫外分光光度法 原理 蛋白质分子中的酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋白质溶液在280nm处有一吸收峰。可用于测定蛋白质，但需防止核酸干扰。 优点 敏感而简便，可保存蛋白生物活性。需紫外分光光度计 及石英比色皿。缺点 各种蛋白质中芳香族氨基酸含量和比例不同；在280nm测 定易受游离色aa和酪aa以及尿酸和胆红素的干扰；导致 准确性和特异性受影响。第十九页，共49页。 紫外分光光度法 第十九页，共49页。 折光测定法原理 溶解在溶液中的固体可增加溶液的光折射率，在固定波长和温度下，光折射率和血清中蛋白质含量成正比。优点 简便、快速，易掌握，重复性较好，适合临

10、床缺点： 准确性较差。第二十页，共49页。 折光测定法第二十页，共49页。 自动生化分析仪测定 第二十一页，共49页。 自动生化分析仪测定 第二十一页，共49页。 TP：少见，属相对性 常见于脱水、休克、某些肿瘤等 TP：肝脏疾病、肾脏疾病、肠道吸收不良 A ：少见属相对性 常见于脱水、休克 A ：肝炎、肝硬化、慢性胃肠疾病 某些寄生虫感染、长期饥饿或营养不良第二十二页，共49页。第二十二页，共49页。 G：慢性肝炎、肝硬化 G：饲喂初乳缺乏、免疫缺陷病 A/G倒置 是肝功能损害的一个重要指标 第二十三页，共49页。 第二十三页，共49页。 【葡萄糖】 BGBlood Glucos 一、血糖的

11、来源、去路和调节 血 糖： 指血液中的葡萄糖 血糖水平： 即血糖浓度 牛：3 4mmol/L第二十四页，共49页。 【葡萄糖】 BGBlood Glucos第二十第二十五页，共49页。第二十五页，共49页。3.糖的生理功能 氧化供能：分解代谢提供机体 75% 能量 机体组成成分之一 糖占机体干重的2%；形成糖原储存；形成糖蛋白和蛋 白多糖激素、酶、受体等；神经组织和细胞膜的 重要组分 转变作用 其它糖及糖衍生物核糖、脱氧核糖、氨基多糖 等；非糖物质脂肪、氨基酸核酸 糖代谢紊乱 供能障碍 一系列代谢变化第二十六页，共49页。3.糖的生理功能 第二十六页，共49页。 保证重要组织器官的能量供给，特

12、别是某些依赖葡萄糖供能的组织器官 脑组织不能利用脂酸，主要依赖葡萄糖供能 红细胞没有线粒体，完全通过糖酵解获能 骨髓和神经组织代谢活泼，经常利用葡萄糖供能第二十七页，共49页。第二十七页，共49页。 肝脏调节 转运调控 肝细胞膜 G 载体可允许 G 快速转运，到达平衡时，肝内外 G 浓 度几乎相等 酶的双向调控 通过神经-激素的作用，使肝细胞内各种糖代谢的酶活性改变 葡萄糖-6-磷酸酶，可促进肝糖原水解， 补充和升高血糖 促进组织摄取葡萄糖，促进肝糖原合成、抑制肝糖原分解、抑制糖 异生而降糖第二十八页，共49页。第二十八页，共49页。 神经调节 主要通过下丘脑和自主神经交感和副交感直接作用 于

13、肝脏获调节激素的分泌而影响血糖 激素调节 降糖激素：胰岛素 胰岛素样生长因子 升糖激素：胰高血糖素 肾上腺素 生长激素 皮质醇 甲状腺激素第二十九页，共49页。 神经调节第二十九页，共49页。 高血糖症：空腹血浆血糖FPG7.3mmol/L130mg/dl 高糖饮食； 见于糖尿病；内分泌腺 生理性：情绪紧张； 病理性： 功能亢进；颅内压升高 肾上腺分泌 刺激血糖中枢； 脱水。 尿糖： 假设血糖浓度高于肾糖阈值9.0mmol/L，即超过了肾 小球滤过率，出现尿糖。第三十页，共49页。第三十页，共49页。 糖尿病diabetes mellitus,DM 定 义： 是一种慢性、复杂的代谢紊乱性疾病，

14、系胰岛素 相对或绝对缺乏，或利用缺陷引起临床特征：血糖持续升高，甚至出现糖尿。 “三多一少：多尿、多饮、多食、体重减轻发病机制 胰腺细胞的自身免疫性损伤 机体对胰岛素的作用产生抵抗第三十一页，共49页。 糖尿病diabetes mellitus,DM 第三十 低血糖症： 是指血糖浓度低于2.2 mmol/L 时临床出 现一系列因血糖浓度过低引起的症候群 原因： 来源 去路 激素效应：升血糖激素缺乏，降血糖激素过剩 肝脏疾病：肝功能严重损伤 长期饥饿或剧烈运动：代谢加强，血糖消耗过多第三十二页，共49页。 第三十二页，共49页。 酮体形成过多引起血中含量增高，称为酮血症 酮体：乙酰乙酸20、-羟

15、丁酸78、丙 酮2 原因： 糖尿病 糖摄入缺乏 糖原储存过多 碱中毒代偿性第三十三页，共49页。第三十三页，共49页。 酮体的生成 糖代谢障碍 脂肪酸分解 第三十四页，共49页。 酮体的生成第三十四页，共49页。三. 体液葡萄糖的测定方法 Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的复原性 Cu2+ Cu+；特异性差 邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等 邻甲苯胺 + Glu 葡萄糖基胺 希夫氏碱蓝绿色 影响因素多第三十五页，共49页。三. 体液葡萄糖的测定方法第三十五页，共49页。3.葡萄糖氧化酶法(GOD 操作简单，特异性较高 是血糖测定的首选方法 第三十六页，共49页。3.葡萄糖氧化酶法(GOD第

16、三十六页，共49页。 反响机体对Glu的利用情况：了解机体胰岛的功能，了解肝脏糖原分解和糖元异生情况。BS： 糖尿病 用胰岛素过量 牛生产瘫痪 反刍兽氨中毒 绵羊肠毒血症 BS： 肾皮质功能不全 胰岛素分泌过多 肝功能不全 牛的酮病 新生幼畜低血糖等 第三十七页，共49页。第三十七页，共49页。 【血浆脂类】 血 脂 胆固醇、胆固醇脂、甘油三脂、磷脂等 化学方法 酶法测定 自动生化分析仪 第三十八页，共49页。 【血浆脂类】第三十八页，共49页。2. 临床应用 动物原发性血脂症较少 主要是了解继发性疾病 如： 内分泌障碍 肝脏疾病 胰腺疾病 肾脏病等第三十九页，共49页。2. 临床应用第三十九

17、页，共49页。 【血中有机物】 包括尿素痰 BUN、尿酸、肌酸、肌肝等 1.测定方法： 半定量试纸法 色谱试纸法 定量比色法 自动生化分析仪测定第四十页，共49页。 【血中有机物】 第四十页，共49页。 2. 临床应用 诊断泌尿系统疾病 肾功能障碍时肌肝 肾炎时尿酸 鉴别肝脏疾病 肝病、肝硬化等，BUN 判断疾病的预后 肌肝50 mg/L， 严重肾损伤，预后不良 肌肝100mg/L， 动物即可死亡第四十一页，共49页。 2. 临床应用第四十一页，共49页。【血清无机离子测定】 包括K、Na、Ca、Pi、Cl、Mg等 火焰光度法、离子选择电极法、化学法、原 子吸收分光光度法 了解机体离子的代谢状

18、况第四十二页，共49页。【血清无机离子测定】第四十二页，共49页。【微量元素测定】 包括Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co、Mo等 原子吸收分光光度法、极谱仪法 微量元素与生长发育的关系 Cu、Fe、Mn、Zn、Co、I 能促进生长 缺乏其中一种，可引起发育停滞 给发育不良的动物补 Mn、Co，可加速生长，增加体重第四十三页，共49页。【微量元素测定】第四十三页，共49页。 微量元素能影响内分泌 铅、镉、汞过多会干扰内分泌的功能 缺Fe： 出现糖尿病 生殖器官发育不全 性功能紊化 缺Mn： 胰岛数目少 Glu利用减低 精子数目 缺Zn： 性功能减退 睾丸缩小 精子生成停顿第四十四页，共49页。 微量元素能影响内分泌第四十四页，共49页。 微量元素与疾病 缺Se： 人的克山病 动物白肌病 幼畜腹泻 缺Zn： 影响组织的愈合 Cu、Fe、