血液学检验基础培训课件

1、一、基本概念血液学（Hematology）是研究造血组织及血细胞的发生、演化的病理和生理过程的科学。2. 临床血液学检验（Clinic Hematology）：研究血液系统病的病理改变和血液病实验诊断的科学。一、基本概念血液学（Hematology）是研究造血组织及血血液的基本组成 红细胞 血细胞 白细胞 (45%) 血小板血液 固体成分 血 浆 (55%) 水 分血液的基本组成三系3三系3血细胞发育成熟形态变化规律胞体:大小:由大变小，只有巨核细胞相反，越成熟胞体越大，早幼粒细胞也可较原粒细胞大。外形：红细胞系始终呈圆形；粒细胞及淋巴经胞系始终保持圆形或椭圆形；单核细胞系由圆形或椭圆形变为不

2、规则形；巨核细胞系由圆形变为明显不规则形。4血细胞发育成熟形态变化规律胞体:4胞核大小：由大变小。巨核细胞则由小变大；成熟红细胞则无核。核形：一般由圆形变为不规则形。红系由圆形最后脱核消失；粒系由圆形到一侧出现凹陷，最后为杆状或分叶状；淋巴及浆细胞系核形保持不变；单核细胞则由圆形变为不规则形；巨核细胞核逐渐增大并分叶，呈不规则堆叠。血细胞发育成熟形态变化规律5胞核血细胞发育成熟形态变化规律5染色质：由细致疏松变为粗糙密集，其着色随DNA含量增加而蓝变为浅红色；淋巴洗胞及单核细胞系保持浅蓝或灰蓝色不变；浆细胞系则由灰蓝色变为深蓝色。颗粒：从无到有，由非特异性到特异性。粒系统原始阶段一般无颗粒，早

3、幼阶段出现非特异性嗜天青颗粒，中幼以后各阶段为大量特异性颗粒；淋巴细胞颗粒较少，部分细胞可含少量非特异性颗粒；红细胞系胞浆内无颗粒。胞核与胞浆体积之比: 一般由大到小。 血细胞发育成熟形态变化规律6染色质：由细致疏松变为粗糙密集，其着色随DNA含量增加而蓝变红细胞检查红细胞计数及血红蛋白测定红细胞形态检查红细胞比容测定红细胞平均指数计算网织红细胞计数红细胞检查红细胞计数及血红蛋白测定 红细胞的起源、发育及衰亡 原红 早幼红 中幼红 晚幼红 网织红 RBC 衰亡72h48h120d衰亡的RBC珠蛋白铁胆色素参与再造血参与胆红素代谢 红细胞的起源、发育及衰亡 原红 血红蛋白的结构 原卟啉 血红素

4、（亚铁） 铁离子血红蛋白 链（2条） 珠蛋白 非链（2条）血红蛋白的结构 参考值： 血红蛋白（Hb） 红细胞（RBC） 男: 120160 g/L （4.05.5)1012/L 女: 110150 g/L （3.55.0)1012/L新生儿: 170200 g/L (6.07.0)1012/L红细胞和血红蛋白的检测10参考值：红细胞和血红蛋白的检测10临床意义：（一）红细胞和血红蛋白增多（1）相对性RBC增多： 连续呕吐，反复腹泻，大面积烧伤。（2）绝对性RBC增多： 继发性：代偿性增生：生理因素、精神因素、高山居民和登山运动员、重体力劳动者及长期多次献血者、慢性肺心病、严重的肺气肿、紫绀型、

5、先天性心肺病发非代偿性增生：某些肿瘤、肾病患者 原发性：真性RBC增多症11临床意义：（一）红细胞和血红蛋白增多11 轻度：男：120g/LHb90g/L 女：110g/LHb90g/L； 中度：90g/LHb60g/L； 重度：60g/LHb30g/L； 极重度：Hb30g/L。（1）生理性： （2）病理性： 妊娠中后期的孕妇 生成减少 6个月至2岁的婴幼儿 破坏过多 老年人（造血功能减退） 失血（二）红细胞和血红蛋白减少 贫血12 （二）红细胞和血红蛋白减少 贫血12贫血发病机制和病因分类红细胞生成减少性贫血造血干祖细胞异常造血调节异常造血原料不足利用障碍 红细胞破坏过多贫血失血性贫血溶血

6、性贫血出凝血性疾病非出凝血性疾病贫血发病机制和病因分类红细胞生成减少性贫血造血干祖细胞正常红细胞14正常红细胞14二红细胞的异常形态检查 （一）红细胞大小改变： 1小红细胞：缺铁性贫血、 遗传性球形红细胞增多症。2大红细胞：溶血性贫血及巨幼红细胞性贫血。3巨红细胞和超巨红细胞 ：巨幼细胞贫血。4红细胞大小不均： 严重的增生性贫血。15二红细胞的异常形态检查 （一）红细胞大小改变： 15红细胞大小异常16红细胞大小异常16红细胞大小不均17红细胞大小不均17（二）红细胞形态改变：1.球形红细胞：见于遗传性球形红细胞增多症。2.椭圆形红细胞：见于遗传性椭圆红细胞增多症。3.口形红细胞：遗传性口形R

7、BC增多症、DIC、酒精中毒。 4.靶形红细胞：缺铁性贫血、地中海贫血5.镰形红细胞：存在异常Hb(HbS)。6.红细胞形态不整：常见于巨幼细胞性贫血。7.棘细胞：见于脂蛋白缺乏的病人。8.裂片细胞：DIC、溶血性贫血、重型地中海贫血9.缗钱状形成：原发性骨髓瘤、巨球蛋白血症18（二）红细胞形态改变：1.球形红细胞：见于遗传性球形红细胞增球形、椭圆形、口形、棘形RBC19球形、椭圆形、口形、棘形RBC19裂片、泪滴、棘形、盔形、镰形RBC20裂片、泪滴、棘形、盔形、镰形RBC20靶形、半岛形、半月形、拖鞋形、环形 21靶形、半岛形、半月形、拖鞋形、环形 21 红细胞聚集 缗钱状聚集 22 红细

8、胞聚集 缗钱状聚集 22（三）红细胞内的异常结构：1、碱性点彩红细胞：见于铅中毒2、染色质小体：巨幼贫、溶贫及脾切除后3、卡波氏环：溶贫、巨幼贫、铅中毒等4、有核红细胞：溶贫及珠蛋白生成障碍性贫血23（三）红细胞内的异常结构：1、碱性点彩红细胞：见于铅中毒23染色质小体、卡波氏环、嗜碱点彩红细胞24染色质小体、卡波氏环、嗜碱点彩红细胞24有核红细胞(NRBC)：25有核红细胞(NRBC)：25EoBaMoNeLyNRBC修正的WBC修正后WBC#&NRBC扣除扣除修正WBC修正分类扣除26EoBaMoNeLyNRBC修正的WBCNRBC扣除扣除修正缺铁性贫血27缺铁性贫血27巨幼性贫血28巨幼

9、性贫血28溶血性贫血29溶血性贫血29再生障碍性贫血30再生障碍性贫血30网织红细胞（Ret）的检测： 成人：0.0050.015 ( 0.5%1.5% ) 绝对值：(2484)109 / L新生儿： 0.030.06 ( 3%6% )31网织红细胞（Ret）的检测： 成人：0.0050.015(一)网织红细胞测定:1反映骨髓红细胞系统造血情况： Ret增多:见于溶血性贫血、急性失血性贫血； Ret降低:见于再生障碍性贫血。 2贫血疗效观察： 治疗有效网织红细胞增多； 治疗无效网织红细胞无增长。 3结合红细胞数量、血红蛋白量以及红细胞形 态，可初步作出贫血的形态学诊断。32(一)网织红细胞测定

10、:1反映骨髓红细胞系统造血情况：32MFRHFRLFRPLT-ORBC-ORETWBCRET 散点图SFLFSCMFRHFRLFRPLT-ORBC-ORETWBCRET 散(二)网织红细胞的扩展参数34(二)网织红细胞的扩展参数34网织红细胞报告参数RET%: 网织红细胞百分比RET#: 网织红细胞计数IRF: 未成熟网织红细胞百分比LFR: 低荧光强度网织红细胞比率MFR: 中荧光强度网织红细胞比率HFR: 高荧光强度网织红细胞比率RET-He网织红细胞血红蛋白含量PLTO 光学血小板数 RBCO 光学红细胞数IPF 幼稚血小板比率网织红细胞报告参数RET%: 网织红细胞百分比红细胞比容和有

11、关参数的应用（一）HCT/PCV红细胞在血液中所占体积的百分比【参考值】 男：0.400.50 (40%50% ) 女：0.370.47 (37%47% )【临床意义】1红细胞比积增多：真红、血液浓缩。2红细胞比积下降：各种贫血。3临床上常以红细胞数、Hb量来计算几种红细胞的平均值，有助于贫血和鉴别诊断。36红细胞比容和有关参数的应用（一）HCT/PCV红细胞在血（二）三种红细胞平均值的计算：1红细胞平均体积（MCV） MCVPCVRBC2红细胞平均血红蛋白量（MCH） MCHHbRBC3红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC） MCHCHbPCV37（二）三种红细胞平均值的计算：1红细胞平均体积（

12、MCV）3【临床意义】贫血的形态学分类类型RBCHGBHCTMCVMCHMCHC病因正C正色素NNNAA、急性失血、溶血、白血病等大C正色素 NN巨幼细胞贫血小C正色素N/ N慢性炎症、尿毒症、肝病、肾病小C低色素N/ 缺铁贫、珠蛋白生成障碍性贫血等38【临床意义】贫血的形态学分类类型RBCHGBHCTMCVMC（三）红细胞体积分布宽度39（三）红细胞体积分布宽度394040（二）临床意义：用于贫血的鉴别诊断 1、小细胞贫血 2、大细胞贫血 3、正细胞性贫血 41（二）临床意义：用于贫血的鉴别诊断 1、小细胞贫血 2、大42424343RBC/PLT通道 双鞘流 浮动界标RDW-SD 假设峰值

13、高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为RDW-SD。单位用fL 表示。RDW-CV 点L1和L2在总分布区域中的出现频率为68.26%，使用下列方程计算RDW-CV=（L2 - L1）/（L2 +L1）HCT由脉冲信号累积计算得出MCV/MCH/MCHC为计算参数44RBC/PLT通道RDW-SDRDW-CVHCT由脉冲信号累血细胞直方图的临床应用45血细胞直方图的临床应用45（二）红细胞体积分布直方图显示范围：24360fL（MCV：80100fL）相关参数：MCV、RDW几种贫血的图形变化：1、缺铁性贫血：小C非均一性2、珠蛋白生成障碍性贫血：小C均一性3、铁粒幼细胞性贫血、缺铁

14、贫治疗后：双峰4、巨幼贫：大C非均一性5、混合性营养性贫血：RDW明显增高46（二）红细胞体积分布直方图显示范围：24360fL（MCV（三）血小板直方图分布范围：220fL反映参数：PLT、MPV、PDW、PCV高位干扰：小RBC、大血小板聚集低位干扰：电流、尘埃等47（三）血小板直方图分布范围：220fL47病例讨论：患者女性、31岁，在过去5年中反复发生贫血，曾间断输血。肌肉内铁剂注射治疗前后，见血象如下图。RBC 3.05; HGB 58; HCT 0.199; MCV 65.4; MCH 19.0; MCHC 291; PLT 757.0RBC 4.15; HGB 93; HCT 0

15、.289; MCV 69.6; MCH 22.4; MCHC 322; PLT 248.048病例讨论：患者女性、31岁，在过去5年中反复发生贫血，曾WBC的检测： （一）白细胞计数：成人： （410）109/ L 儿童： （512）109/ L 新生儿：（1520）109/ L 中性杆状核细胞： 1 5% (0.040.5)109/ L 中性分叶核细胞：50 70% （2.07.0）109/ L 淋巴细胞： 20 40% （0.84.0）109/ L 单核细胞： 3 8% （0.120.8）109/ L 嗜酸粒细胞： 0.5 5% （0.050.5）109/ L 嗜碱粒细胞： 0 1% （0

16、0.1）109/ L 49WBC的检测： （一）白细胞计数：成人： （410）1白细胞分类50白细胞分类50 骨髓(10-12d) 血液 组织10-12h1-3d组织衰亡中性粒细胞动力学原粒早 幼粒中幼粒晚 幼粒杆状核分 叶核循环池边缘池成熟池分裂池贮备池生长成熟池干细胞池 骨髓(10-12d) （二）中性粒细胞：1中性粒系统增多：反应性增多： 急性感染 中毒 严重的组织损伤 恶性肿瘤 急性大出血、溶血 器官移植等异常增生性增多：血液病生理性增多：分娩、运动后、温度刺激52（二）中性粒细胞：1中性粒系统增多：522 中性粒系统减少：某些感染：G-杆菌、病毒感染造血功能异常：AA化学药品及放射损

17、害：自身免疫性疾病：SLE单核-吞噬细胞系统功能亢进：脾亢532 中性粒系统减少：某些感染：G-杆菌、病毒感染533中性粒系统的核象变化：核左移-外周血中中性杆状核粒细胞增多（0.06），甚至出现晚幼粒，中幼粒、早幼粒、原粒等更幼稚的细胞。核右移-正常人血中中性粒细胞以三叶核者为主，若五叶核以上者超过3，或中性分叶过多，大部分以4-5叶或更多。543中性粒系统的核象变化：核左移-外周血中中性杆状核粒核左移55核左移55左移程度WBCNEU粒细胞形态诊断轻度轻度轻度杆状C 6%感染较轻抵抗力强中度杆状C10%伴中、晚幼粒C感染严重重度或不杆状C25%感染更严重如类白血病易见于婴幼儿56左移程度W

18、BCNEU粒细胞形态诊断轻度轻度轻度杆状C 核右移 常伴白细胞总数下降，为骨髓造血功能衰退或缺乏造血物质所致。 常见于巨幼红细胞贫血、恶性贫血、抗代谢药物应用后。 若在疾病进行期出现核右移，则提示预后不良。57核右移 常伴白细胞总数下降，为骨髓造血功能衰退或缺乏造血物质4中性粒细胞形态异常：1、中毒性改变： 1）细胞大小不均：慢性炎症 2）中毒颗粒 3）空泡形成 4）杜勒小体 5）核变性2、巨多分叶核中性粒细胞：巨幼贫、 应用抗代谢药物后3、棒状小体：急性白血病4、其他：与遗传相关的异常变化584中性粒细胞形态异常：1、中毒性改变：581、嗜酸粒细胞增多：过敏性疾病 寄生虫病 皮肤病 血液病某

19、些恶性肿瘤 某些传染病 其它：肾上腺皮质功能减低 2、嗜酸粒细胞减少： 见于伤寒、副伤寒、严重烧伤、休克及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后。（三）嗜酸粒细胞（EOS）591、嗜酸粒细胞增多：（三）嗜酸粒细胞（EOS）59EOS计数可应用于以下方面：1、观察急性传染病的预后： 急性感染：肾上腺皮质激素增加，EOS减少；感染恢复：肾上腺皮质激素减少，EOS增加。2、观察手术和烧伤病人的预后： 术后（或烧伤）4小时后嗜酸粒细胞 下降，甚至消失，48小时后上升。3、测定肾上腺皮质功能。60EOS计数可应用于以下方面：1、观察急性传染病的预后：60（四）嗜碱性粒细胞（BASO）1、嗜碱性粒细胞增多

20、：（1）过敏性疾病（2）血液病（3）恶性肿瘤（4）其他：DM、传染病等2、嗜碱性粒细胞减少：无临床意义61（四）嗜碱性粒细胞（BASO）1、嗜碱性粒细胞增多：61（五）淋巴细胞（LYM）：1、LYM增多：感染性疾病肿瘤性疾病急性传染病恢复期移植排斥反应2、LYM减少：62（五）淋巴细胞（LYM）：1、LYM增多：623、异形淋巴细胞：a.型 泡沫型 b.型 不规则型 c.型 幼稚型633、异形淋巴细胞：a.型 泡沫型 b.型 不规则型 （六）单核细胞（MONO）:1、MONO增多：生理性：婴幼儿某些感染：某些血液病：2、MONO减少：无临床意义64（六）单核细胞（MONO）:64类白血病与慢粒

21、的鉴别类白血病反应慢粒明确病因有无临床表现原发病症状明显消瘦、乏力、低热、脾大WBC计数及分类30100*109/L、分叶、杆状居多、原粒少见常100*109/L、可见各阶段细胞，与骨髓象相似BASO、EOS不增多常增多粒细胞中毒性改变常明显不明显RBC、PLT无明显变化早期RBCPLT后期均骨髓象无明显变化极度增生、粒系增生显著中性粒碱性磷酸酶积分显著增高积分显著降低，甚至为0Ph染色体无可见于90%以上病例65类白血病与慢粒的鉴别类白血病反应慢粒明确病因有无临床表现原发DIFF通道4DL 完全溶解红细胞血小板 在白细胞膜上打孔有大分子有机酸增强EOS染色4DS 对核酸染色纵坐标：侧向荧光（

22、SFL） 反应核酸含量横坐标：侧向散射光（SSC） 反应细胞内容物复杂程度检测参数：WBCD，NB,，L ,， MO ,，EO L, ,，66DIFF通道检测参数：WBCD，NB,，L ,，WBC/BASO通道STROMATOLYSER-FB 低渗、强酸溶血素完全溶解红细胞除嗜碱细胞以外的白细胞溶解为裸核嗜碱细胞保持原状检测参数：WBCBBASO，纵坐标：前向散射光（FSC） 反映细胞大小横坐标：侧向散射光（SSC） 反映细胞内容物复杂程度嗜碱其他WBC67WBC/BASO通道嗜碱其他WBC67原理IG可报告参数 IG#/% 通过美国FDA批准IG: 未成熟粒细胞 Promelocyte, M

23、yelocyte, Metamyelocyte68原理IG可报告参数 IG#/% 通过美国FDA批准68Conventional AlgorithmNew AlgorithmIG 检测区域固定的门可变的门IG检测原理69Conventional AlgorithmNew AlgoHPC可报告参数HPC#HPC: Hematopietic progenitor cellFDA clearedIMI-ch70HPC可报告参数HPC#70 幼稚粒细胞表面脂质含量比成熟粒细胞少 成熟粒细胞更易被表面活性剂破坏 幼稚粒细胞部分受损，含硫氨基酸进入细胞形成保护层成熟粒细胞幼稚粒细胞Lipid- Cholesterol- Phospho Lipid- Glyco LipidSuper SurfactantAmino AcidHPC检测原理IMI通道 （1）试剂原理 幼