动物微生物细菌病的实验室诊断方法培训课件

1、动物微生物细菌病的实验室诊断方法动物微生物细菌病的实验室诊断方法学习目标知识目标掌握细菌病实验室诊断的方法理解利用各种诊断方法的进行鉴定的意义能力目标具备结合临床病例设计实验室诊断方案的能力动物微生物细菌病的实验室诊断方法2学习目标知识目标动物微生物细菌病的实验室诊断方法2主要内容病料的采集、保存和运送细菌的形态学检查细菌的分离培养生化试验动物接种血清学试验分子生物学技术动物微生物细菌病的实验室诊断方法3主要内容病料的采集、保存和运送动物微生物细菌病的实验室诊断方重点与难点重点细菌病实验室诊断的方法难点设计实验方案 动物微生物细菌病的实验室诊断方法4重点与难点重点动物微生物细菌病的实验室诊断方

2、法4细菌病的实验室诊断 初诊：根据流行病学、症状、病变等方面的疾病特征，做出初步诊断 通过实验室诊断，确定病原是否是细菌以及病原菌的类型实验室诊断是在临床诊断的基础上进行的动物微生物细菌病的实验室诊断方法5细菌病的实验室诊断 初诊：根据流行病学、症状、病变等方面细菌病实验室诊断方法病料的采集、保存和运送细菌的形态学检查细菌的分离培养生化试验动物接种血清学试验分子生物学技术动物微生物细菌病的实验室诊断方法6细菌病实验室诊断方法病料的采集、保存和运送动物微生物细菌病的病料的采集、保存和运送病料采集遵循的原则防止污染 无菌采样 适时采样 适当部位病料采集方法（不同病料不同方法）实质脏器 液体材料 其

3、他病料病料的保存和送检动物微生物细菌病的实验室诊断方法7病料的采集、保存和运送病料采集遵循的原则动物微生物细菌病的实防止污染动物剖检个人防护和消毒动物尸体处理废弃物处理动物微生物细菌病的实验室诊断方法8防止污染动物剖检动物微生物细菌病的实验室诊断方法8动物剖检剖检场所：应选择便于消毒、不渗水的解剖地点，最好有专门的剖检场所和剖检台 。剖检前，动物尸体应浸泡消毒。动物微生物细菌病的实验室诊断方法9动物剖检剖检场所：应选择便于消毒、不渗水的解剖地点，最好有专个人防护和消毒做好个人防护：剖检过程中，注意个人防护。剖检后的器械浸泡消毒后洗刷。动物微生物细菌病的实验室诊断方法10个人防护和消毒做好个人防

4、护：剖检过程中，注意个人防护。动物微动物尸体焚烧炉深埋（投入消毒药）动物尸体处理焚烧或深埋：剖检后动物尸体和病料焚烧灭菌或消毒深埋。动物微生物细菌病的实验室诊断方法11动物尸体焚烧炉深埋（投入消毒药）动物尸体处理焚烧或深埋：剖检垃圾直接洗刷处理不当会引起人和动物疫病的散播动物或人的传染病废弃物处理动物微生物细菌病的实验室诊断方法12垃圾直接洗刷处理不当会引起人和动物疫病的散播动物或人的传染病无菌采样目的 防止病料被污染方法所用器械和器皿必须灭菌点燃酒精灯注意无菌操作动物微生物细菌病的实验室诊断方法13无菌采样目的 动物微生物细菌病的实验室诊断方法13适时采样细菌丰富增殖时期、病料应该新鲜：取濒

5、死动物或刚死亡的动物。死亡动物采集病料夏天不宜迟于68h，冬天不迟于24h。动物微生物细菌病的实验室诊断方法14适时采样细菌丰富增殖时期、病料应该新鲜：取濒死动物或刚死亡的适当部位选择病料的部位可采用两个原则第一原则：根据疾病的类型和表现采集病变最典型的部位第二原则：一般采集正常无菌的部位动物微生物细菌病的实验室诊断方法15适当部位选择病料的部位可采用两个原则动物微生物细菌病的实验室典型采样心包积液脑部病变动物微生物细菌病的实验室诊断方法16典型采样心包积液脑部病变动物微生物细菌病的实验室诊断方法16实质脏器的采集剖开体腔后，立即采集，置于无菌容器内。污染或剖开过久的被检器官：先烧烙表面，然后

6、在烧烙的深部取一块实质脏器，放在灭菌容器内。如有细菌检验条件，可在剖检后直接做病料的触片染色和细菌的分离培养。动物微生物细菌病的实验室诊断方法17实质脏器的采集剖开体腔后，立即采集，置于无菌容器内。动物微生液体病料的采集脓汁、胸水一般用灭菌的棉棒或吸管吸取放入试管内，塞好棉塞送检。血液可无菌操作从静脉或心脏采血，然后加抗凝剂（每1ml血液加3.8%枸橼酸钠0.1ml）。若需分离血清，则采血后放在灭菌的容器中，摆成斜面，待血液凝固析出血清后，再将血清吸出，置于另一灭菌试管中送检。动物微生物细菌病的实验室诊断方法18液体病料的采集脓汁、胸水一般用灭菌的棉棒或吸管吸取放入试管内其他病料的采集 皮肤要

7、取有病变且带有一部分正常皮肤的部位。被毛或羽毛取病变明显部位，并带毛根放平皿。胎儿可将流产胎儿送往实验室，也可用吸管或注射器吸取胎儿胃内容物放入试管送检。肠道及内容物需选择病变最明显的部分，将其中内容物去掉，用灭菌水轻轻冲洗后放平皿内。动物微生物细菌病的实验室诊断方法19其他病料的采集 皮肤要取有病变且带有一部分正常皮肤的部位。动细菌性病料的保存和送检低温保存尽快送检做好记录畜主姓名、动物种类、地址、发病情况、欲检部位及检验项目、采集时间等动物微生物细菌病的实验室诊断方法20细菌性病料的保存和送检低温保存动物微生物细菌病的实验室诊断方细菌的形态学检查方法光学显微镜检查电子显微镜检查意义观察病料

8、中有无细菌以及细菌的形态、数量、分布、结构、种类等，进行初步判断动物微生物细菌病的实验室诊断方法21细菌的形态学检查方法动物微生物细菌病的实验室诊断方法21细菌的分离培养方法：用分区划线法在合适培养基上培养意义看培养基中有无细菌生长推断是否为细菌病依据菌落的特征判断细菌种类用菌落中的细菌进一步作形态学鉴定可进一步作生化鉴定、血清学鉴定及动物试验可进一步作药敏试验动物微生物细菌病的实验室诊断方法22细菌的分离培养方法：用分区划线法在合适培养基上培养动物微生物分离培养通常选用适合目标菌生长的平板培养基对细菌进行分离培养。不同细菌的菌落大小、形态、色泽、表面特征、边缘状态、隆起度、透明度等特征不同。

9、有的细菌在鲜血琼脂平板上形成溶血环。 也可采用选择培养基或鉴别培养基，以起到抑制杂菌或快速鉴别的效果。比如肠道杆菌科可选择麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂。动物微生物细菌病的实验室诊断方法23分离培养通常选用适合目标菌生长的平板培养基对细菌进行分离培养分区划线法动物微生物细菌病的实验室诊断方法24分区划线法动物微生物细菌病的实验室诊断方法24动物微生物细菌病的实验室诊断方法培训课件溶血环有的细菌在鲜血培养基上有-溶血现象动物微生物细菌病的实验室诊断方法26溶血环有的细菌在鲜血培养基上有-溶血现象动物微生物细菌病的伊红美蓝培养基、麦康凯培养基上大肠杆菌菌落动物微生物细菌病的实验室诊断方法27伊红美蓝培养

10、基、麦康凯培养基上大肠杆菌菌落动物微生物细菌病的细菌的生化试验进行生化试验的细菌必须是纯培养物。检验时，根据可疑细菌的生化特性选择特定的一组生化试验，将结果与标准进行对比，以确定病原菌的种类。例：不同种沙门氏菌的生化鉴定动物微生物细菌病的实验室诊断方法28细菌的生化试验进行生化试验的细菌必须是纯培养物。动物微生物细鸡白痢沙门氏菌鸡伤寒沙门氏菌鼠伤寒沙门氏菌不同种沙门氏菌的生化鉴定动物微生物细菌病的实验室诊断方法29鸡白痢沙门氏菌鸡伤寒沙门氏菌鼠伤寒沙门氏菌不同种沙门氏菌的生意义将待检细菌液接种到动物体内，观察动物发病情况，进一步确认可疑细菌的致病作用和类型。接种对象本动物试验动物接种途径动物接

11、种动物微生物细菌病的实验室诊断方法30意义动物接种动物微生物细菌病的实验室诊断方法30灌口肌肉注射腹腔注射皮下注射脑内接种静脉注射常用的动物接种途径动物微生物细菌病的实验室诊断方法31灌口肌肉注射腹腔注射皮下注射脑内接种静脉注射常用的动物接种途血清学试验临床诊断中，可用于细菌的血清分型、快速诊断或大群检疫。用已知抗体检测动物体内的病原菌用已知的病原菌抗原检测动物血清中的抗体例：鸡白痢的检疫动物微生物细菌病的实验室诊断方法32血清学试验临床诊断中，可用于细菌的血清分型、快速诊断或大群检1、加一滴抗原2、加一滴鸡的全血3、将抗原和血液混匀4、静置2min,观察结果鸡白痢检疫全血平板凝集试验动物微生

12、物细菌病的实验室诊断方法331、加一滴抗原2、加一滴鸡的全血3、将抗原和血液混匀4、静置鸡白痢检疫结果动物微生物细菌病的实验室诊断方法34鸡白痢检疫结果动物微生物细菌病的实验室诊断方法34分子生物学方法分子生物学技术对病原菌的快速诊断和不能人工培养的细菌的探索发挥巨大的作用。 PCR技术、核酸分子杂交技术等。动物微生物细菌病的实验室诊断方法35分子生物学方法分子生物学技术对病原菌的快速诊断和不能人工培养大肠杆菌病实验室诊断方案病料中细菌的形态学检查病料中细菌的分离培养18小时后动物致病性试验涂片革兰氏染色生化试验H2S试验糖发酵试验MR试验10日龄小鸡，皮下注射0.2ml/只病料纯培养动物微生物细菌病的实验室诊断方法36大肠杆菌病实验室诊断方案病料中细菌的形态学检查病料中细菌的分大肠杆菌病实验室诊断结果 剖检（采集病料）纤维素渗出物的涂片染色分离培养（麦康凯或伊红美蓝琼脂平板）培养物涂片革兰氏染色生化试验动物接种试验动物微生物细菌病的实验室诊断方法37大肠杆菌病实验室诊断结果 剖检（采集病料）动物微生物细菌病的大肠杆菌病纤维渗出物中的细菌动物微生物细菌病的实验室诊断方法38大肠杆菌病纤维渗出物中的细菌动物微生物细菌病的实验室诊断方法伊红美蓝培养基、麦康凯培养基上大肠杆菌菌落动物