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文档简介

1、实验一免疫学应用天然免疫实验一免疫学应用天然免疫实验一免疫学应用天然免疫实验一免疫学应用天然免疫实验一免疫学应用天然免疫实验一免疫学实验内容一、讨论:(一)免疫学应用(预防、诊断、治疗)(二)固有免疫的组成、功能二、示教(一)常见各类疫苗(二)小吞噬、大吞噬(三)血脑屏障三、操作(一)人中性粒细胞噬菌实验(二)鼠尾静脉注射及血脑屏障实验内容一、讨论:(一) 免疫学应用免疫预防:如各类疫苗免疫诊断:如已知抗体鉴别未知细菌免疫治疗:破伤风抗毒素(一) 免疫学应用免疫预防:如各类疫苗1. 固有免疫(innate immunity) 非特异性免疫/先天性免疫/天然免疫概念:机体在长期种系进化过程中形成

2、的天然防御功能,机体的第一道防线。该系统与生俱来,发生非特异性抗感染效应并清除体内损伤、衰老或畸变的细胞参与适应性免疫应答INNATE IMMUNE SYSTEM(二) 固有免疫的组成、功能、检查方法1. 固有免疫(innate immunity)INNATE固有免疫组织屏障体表屏障:物理、化学、生物屏障内部屏障:血脑屏障、血胎屏障。中性粒细胞、单核/巨噬细胞、 DC、NK、 NKT、 T、B-1B细胞、肥大细胞、嗜碱粒细胞、嗜酸性粒细胞等。固有免疫分子:补体、细胞因子、抗菌肽、 溶菌酶、乙型溶素等。固有免疫细胞:2. 固有免疫系统的组成INNATE IMMUNE SYSTEM固有免疫组织屏障

3、体表屏障:物理、化学、生物屏障内部屏障:血脑物理屏障:皮肤黏膜、肠蠕动、呼吸道上皮纤毛运动、尿液冲洗。化学屏障:汗腺分泌的乳酸、皮脂腺分泌的不饱和脂肪酸、胃酸、呼吸道和消化黏液中的溶菌酶、抗菌肽、补体等。生物学屏障:皮肤黏膜寄生的正常菌群,如大肠杆菌可分泌细菌素抑制厌氧菌和革兰氏阳性菌定居和繁殖。体表屏障物理屏障:皮肤黏膜、肠蠕动、呼吸道上皮纤毛运动、尿液冲洗。体内部屏障:血脑脊液屏障软脑膜、脉络丛INNATE IMMUNE SYSTEM内部屏障:血脑脊液屏障软脑膜、脉络丛INNATE IMMU血胎屏障:绒毛膜滋养层细胞 + 基蜕膜INNATE IMMUNE SYSTEM血胎屏障:绒毛膜滋养层

4、细胞 + 基蜕膜INNATE IMMU固有免疫分子补体细胞因子急性期蛋白抗微生物肽溶菌酶乙型溶素固有免疫分子补体固有免疫细胞吞噬细胞(phagocyte)中性粒细胞(neutrophil)单核细胞和巨噬细胞树突状细胞特殊淋巴细胞自然杀伤细胞(natural killer, NK)NK T细胞B-1 B细胞其它固有免疫细胞肥大细胞(mast cell)嗜碱性粒细胞(basophil)嗜酸性粒细胞(eosinophil)固有免疫细胞吞噬细胞(phagocyte)中性粒细胞(多形核白细胞)Bone marrowHSCNeutrophils in blood circulationtissuesinf

5、lammation中性粒细胞(多形核白细胞)Bone marrowHSCNeu抗感染抗肿瘤维持自身耐受参与特异性免疫: 参与特异性免疫的启动 影响特异性免疫的强度 影响特异性免疫的类型3. 固有免疫的功能抗感染3. 固有免疫的功能二、示教(一)常见各类疫苗(二)小吞噬、大吞噬(三)血脑屏障二、示教(一)常见各类疫苗中性粒细胞葡萄球菌中性粒细胞葡萄球菌鸡红细胞巨噬细胞鸡红细胞巨噬细胞血脑屏障血脑屏障三、操作(一)人中性粒细胞噬菌实验(二)鼠尾静脉注射及血脑屏障(见示教三、操作(一)人中性粒细胞噬菌实验1. 人中性粒细胞噬菌实验取肝素抗凝剂0.02ml(25单位/ml)入凹玻片。无名指采血0.02 ml 至有肝素的凹玻片中,混匀。加入一滴葡萄球菌菌液,混匀。凹玻片置铺有纱布的有盖容器内(此容器先放37温箱中预温) 37温箱孵育20分钟。 制作血涂片,室温干燥。均匀滴加3滴吉姆萨染液A,染色1分钟。均匀滴加6滴吉姆萨染液B,染色3分钟。洗涤后室温干燥。镜下观察,计算吞噬百分率 。实验步骤1. 人中性粒细胞噬菌实验取肝素抗凝剂0.02ml(25单位血推片方法血推片方法血涂片质量评价头体尾 分明厚 薄 均 匀长 度 适 中血涂片质量评价头体尾 分明均匀滴加3滴吉姆萨染液A,染色1分钟。均匀滴加6滴吉姆萨染液B,染色3分钟。染色方法均匀滴加3滴吉姆萨染液A,染

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