氯沙坦对自发性高血压大鼠脂肪组织脂联素造成的影响

1、氯沙坦对自发性高血压大鼠脂肪组织脂联素造成的影响【摘要】目的：讨论福辛普利和氯沙坦对自发性高血压shr大鼠脂肪组织脂联素的影响。方法：22周龄shr大鼠随机被分成四组，分别予福辛普利、氯沙坦、福辛普利加氯沙坦、抚慰剂喂养。同系魏凯氏ky大鼠作对照组。8周后取尿检测大鼠尿微量蛋白upr和n-乙酰-d-氨基葡萄糖苷酶nag含量，取脂肪组织用免疫组化法及逆转录聚合酶链式反响rt-pr检测脂联素的rna的表达。结果：shr大鼠脂肪组织脂联素表达较ky大鼠降低；upr和nag酶程度升高p均0.01；福辛普利组和氯沙坦组与shr组比较血压降低p0.01；upr和nag酶程度降低p0.01，脂联素表达上调p

2、0.01。结论：(1)shr大鼠upr和nag酶程度升高，脂肪组织脂联素表达下调;(2)福辛普利和氯沙坦可以进步shr大鼠脂肪组织脂联素表达，降低upr和nag酶程度。【关键词】大鼠;脂联素;福辛普利;氯沙坦authrsaddress：the163hspitalfpla,hangsha,hunan,410003,hinakeyrds：rat;adipnetin;fsinpril;lsartan脂联素(adipnetin)是由脂肪组织分泌的一种激素蛋白。脂联素具有改善胰岛素抵抗ir、抗炎、抗动脉粥样硬化的作用。目前已有研究说明肥胖、ir、型糖尿病和冠心病患者的血浆脂联素浓度下降，也有部分研究说明

3、高血压患者脂联素程度也下降。本研究旨在研究shr大鼠脂肪组织脂联素的表达情况，及福辛普利、氯沙坦在降压的同时对脂肪组织脂联素表达和尿微量蛋白upr、n-乙酰-d-氨基葡萄糖苷酶nag的影响。1资料与方法1.1实验动物22周雄性自发性高血压shr大鼠20只，以及其同系对照鼠kyistar-kyt大鼠5只，以上动物均由成都史莱克实验动物研究所提供。1.2主要试剂与仪器兔抗鼠脂联素抗体，nag酶试剂盒，逆转录试剂盒(tyb公司)；taq耐热dna聚合酶(rrakar.公司)，超明晰度病理图文分析系统pips-2000，凝胶分析系统，pr分析软件；fr-900dna扩增仪(上海复日公司)。1.3观察指

4、标及方法每组5只：高血压组(shr组)，福辛普利组(fs组，福辛普利10g/kgd灌胃)，氯沙坦组l组，氯沙坦50g/kgd灌胃)，福辛普利氯沙坦组fsl组，福辛普利10g/kgd氯沙坦50g/kgd结合灌胃。22周龄雄性ky大鼠5只(ky组)，为正常对照组。shr组和ky组给予蒸馏水清晨灌胃。各组大鼠自由进食、饮水，共喂养8周。1血标本的采集：各组大鼠于实验完毕时30周龄，称体重，测尾动脉血压，心脏采血5l，4离心10in，取上清液，-80保存待测。用德国罗氏公司的全自动生化仪测定血肌酐sr、血尿素氮bun；2尿标本的搜集：处死大鼠前一天，用代谢笼搜集大鼠24h尿液，离心，弃渣，留上清尿液，

5、-80保存待测。upr用放射免疫法检测。按nag酶试剂盒说明检测nag酶活性；3脂肪组织标本的采集与制备：麻醉大鼠，固定于蛙板上，剖腹，取出肾周脂肪组织，一部分置于多聚甲醛溶液中固定，常规石蜡包埋，用于免疫组织化学染色分析。余脂肪组织用生理盐水和0.1%焦碳酸二乙脂水冲洗后，置于液氮中保存，用于做rt-pr检测。a值。1引物设计脂联素：上游：5-tatagattaggtag-3；下游：5-tgatatggtgtaggtgaag-3，扩增片段长度为238bp。pr反响条件为94预变性，5in；变性：94，30se；退火：56，30se；延伸：72，1in；25反响循环，72，10in终止反响，4

6、冷却；2-atin：上游：5-gttgaatgtaaaga-3，下游5-tggaaggtggaagtgag-3，扩增片段长度为201bp。pr反响条件与同管扩增目的基因条件一样。pr扩增产物-20保存，备用于琼脂糖凝胶电泳，照相及图象半定量分析。比较采用方差分析anva和q检验，p0.05为差异有显著性。2结果2.1五组大鼠一般资料比较比较：五组大鼠体重(b)无显著性差异(p0.05)。shr组与fs组，l组及fsl组收缩压无显著性差异(p0.05)，shr组和fs组，l组及fsl组收缩压，upr，nag酶均明显高于ky组(p均0.05)，见表1。表1实验前五组大鼠一般资料比较注：与魏凯氏组比

7、较p0.05；fs组，l组和fs+l组三组比较无显著差异。比较：shr组收缩压，upr，sr和nag酶程度明显高于ky组(p均0.05)，而fs组，l组及fsl组收缩压，bun，sr与ky组比较无显著性差异(p0.05)；fs组，l组及fsl组三组间血压，upr，sr，bun和nag酶程度比较无显著性差异(p0.05)；fs组，l组及fsl组收缩压，upr，sr和nag酶程度明显低于shr组(p均0.05)，见表2。2.2五组大鼠脂肪组织脂联素蛋白免疫组化染色免疫组化结果显示，脂联素蛋白主要表达在脂肪细胞胞浆中；shr大鼠脂肪组织中脂联素蛋白含量明显低于ky大鼠p0.05；而fs和l干预后脂肪

8、组织中脂联素蛋白含量明显增加p0.05；但fs组、l组、fs+l组脂肪组织中脂联素蛋白含量仍明显低于ky组p0.05；fs组、l组、fs+l组三组间脂肪组织脂联素含量无显著差异p0.05，见表3。2.3五组大鼠脂肪组织脂联素rna表达shr组脂联素rna表达较ky组明显降低p0.01，fs组，l组和fsl组脂联素rna表达比shr组显著增强p0.05，但三组间差异不显著p0.05，见图1。五组大鼠脂肪组织脂联素rna表达半定量分析结果见表4。表2实验第8周五组大鼠血压及肾功能相关指标比较表3五组大鼠脂肪组织脂联素蛋白表达半定量分析注：与ky组比较p0.05，p0.01；与shr组比较p0.05

9、；fs组，l组和fs+l组三组比较无显著差异。表4五组大鼠脂肪组织脂联素rna表达半定量分析注：与ky组比较p0.05，p0.01；与shr组比较p0.05;fs,l,fs+l组三组间比较p0.05。3讨论近年研究说明，脂肪组织不仅是一个能量储存器官，而且是一个内分泌器官，分泌许多生物活性物质如脂联素，肿瘤坏死因子tnf-，纤溶酶原激活剂抑制因子pai-1，瘦素、抵抗素等参与物质代谢。脂联素是由脂肪细胞特异性分泌的脂肪细胞因子，是1995年sherer等1首先从鼠的脂肪细胞中别离出来的一种蛋白质。研究已证实脂联素在改善胰岛素敏感性、抗炎以及抗动脉粥样硬化等方面，具有非常重要的作用。脂联素通过促

10、进葡萄糖、脂肪的分解，改善胰岛素敏感性、减低ir，同时具有抗炎、抗动脉粥样硬化的作用。目前脂联素与代谢综合症s的其他组成成分研究已经较成熟，血浆脂联素程度与肥胖症、ir、2型糖尿并动脉粥样硬化之间存在显著相关性。作为s的组成成分之一的高血压与脂联素相关性的研究也正在进展中。huang等2报道，在68名安康青少年女性中，脂联素与收缩压、舒张压呈显著负相关。adaazk等3报道，原发性高血压患者血浆脂联素程度较正常血压者明显降低，并与收缩压、舒张压、平均动脉压均呈显著负相关。kazui等4报道，在正常青年男性中，与理想血压者相比，血压正常高值者血清脂联素程度降低。朱俐俐等5发现老年高血压组和s组的

11、血清脂联素程度明显低于正常对照组；直线相关分析说明，脂联素程度与血压、upr、体重指数呈负相关。我国学者林泽鹏等6研究发现高血压患者用培哚普利及缬沙坦治疗两周后,平均压显著下降，血清脂联素浓度和胰岛素敏感性指数明显升高；原发性高血压患者血清脂联素与收缩压和舒张压呈直线相关；血清脂联素与胰岛素敏感性指数和高密度脂蛋白胆固醇呈直线相关。原发性高血压患者低脂联素血症与脂代谢紊乱和ir亲密相关。肾素-血管紧张素系统,可进步原发性高血压患者胰岛素敏感性,从而使血清脂联素浓度升高。本实验首次研究shr脂肪组织脂联素的表达，实验显示高血压模型大鼠脂肪组织脂联素的表达下调，upr和尿nag酶程度升高，提示高血

12、压模型大鼠出现早期肾损害。但经肾素-血管紧张素系统阻滞剂福辛普利和肾素-血管紧张素系统受体拮抗剂氯沙坦干预后高血压模型大鼠血压得到控制，upr和尿nag酶程度下降，肾功能明显改善，脂联素的表达上调，现有的研究已证实脂联素在改善胰岛素敏感性、抗炎以及抗动脉粥样硬化等方面有着重要的作用。脂联素有抗ir的作用，同时脂联素通过减弱生长因子诱导的平滑肌细胞的dna合成，并抑制生长因子刺激的平滑肌细胞的增殖和迁移；脂联素可以抑制巨嗜细胞转化为泡沫细胞，而改善和抑制动脉粥样硬化的形成；脂联素还可以抑制tnf-在动脉内皮细胞诱导的粘附分子的表达，从而抑制单核细胞向动脉内皮细胞的粘附和对内皮细胞的损伤。高血压肾

13、损害主要是由于肾动脉硬化，纤维化所致，福辛普利和氯沙坦降低血压同时上调脂联素的表达，改善ir，能降低upr和尿nag酶程度，对高血压所导致的肾动脉硬化和肾动脉纤维化有改善作用。本课题研究结果为进一步研究脂联素在高血压发病中的作用和高血压靶器官肾损害的治疗提供了新的思路和方法。【参考文献】1shererpe,illianss,fglian,etal.anvelseruprteinsiilart1q,prduedexlusivelyinadpytesj.jbilhe,1995,270:26746-26749.2huangk,henl,huangl,etal.plasaadipnetinlevelsandbldpressuresinnndiabetiadlesentfealesj.jlinendrinletab，2022,88:4130-4134.3adazak，ieeka，funahashit，etal.dereasedplasaadipnetinnentratininpatientsithessentialhypertensinj.ajhypertens，2022，16(1)：72-75.4kazuit，kaaguhia，sakaik，etal.yungenithhigh|nralbldpressurehavelerseruadipnetin,sallerldl|size,an