高效液相色谱法测定抗病毒胶囊中连翘苷的含量

1、高效液相色谱法测定抗病毒胶囊中连翘苷的含量【关键词】抗病毒胶囊；,连翘苷；,高效液相色谱法摘要：目的建立抗病毒胶囊中连翘苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定该药中连翘苷的含量，色谱条件：DS18柱4.6250,5为色谱柱,乙腈水2872为流动相；流速：0.8l/in；检测波长：230n。结果连翘苷浓度范围在4.9649.6g/l之间峰面积与浓度线性关系良好，r=0.9999,平均回收率为97.7%，RSD为1.77%;结论该方法准确、可靠、专属性强，可用于抗病毒胶囊的质量控制。关键词：抗病毒胶囊；连翘苷；高效液相色谱法DeterinatinfFrsythininAnti-virusap

2、sulebyHPLAbstrat：bjetiveTestablishaethdfrthedeterinatinffrsythininAnti-virusapsule.ethdsFrsythininFrutusFrsythiaeasdeterinedbyHPL.Thehratgraphinditinsere：DS-18(2504.6,5asanalytilun,aetnitrile-ater(2872)asbilephase,thedetetinavelengthassetat230nandtheflrateas0.8l/in.ResultsThelinearityffrsythininther

3、angef4.9649.6g/lasgd,r=0.9999,theaveragereveryas97.7%,RSD=1.77%.nlusinTheethdisaurate,reliableandspeifiandanbeusedfrthequalityntrlfAnti-virusapsule.Keyrds：Antivirusapsule；Frsythin；HPL抗病毒片处方来源于中华人民共和国国家药品监视管理局标准，由板蓝根、石膏、芦根、生地黄、郁金、知母、石菖蒲、广藿香、连翘等九味中药组成。板蓝根、连翘清热凉血，驱除外感邪毒；石膏、知母、芦根、生地和郁金清肺热，凉血热兼解散肌表之热；广藿香

4、疏散表邪；石菖蒲主咳逆止气。九味组方治内热感冒、上呼吸道感染等症，可谓合理得当。本品由抗病毒片改制而成，对上呼吸道感染、支气管炎、流行性出血性结膜炎、腮腺炎有疗效，对病毒性流感疗效尤为显著。为控制抗病毒胶囊的质量，本文采用高效液相色谱法测定抗病毒胶囊中连翘苷的含量，结果说明：该方法准确，重现性好，可有效控制抗病毒胶囊的质量。1仪器与试药1.1仪器岛津L10ATvp高效液相色谱仪，SPD10Avp紫外检测器，岛津18柱4.6250，梅特勒电子天平上海梅特勒托利多。1.2试剂与药品连翘苷对照品中国药品生物制品检定所，抗病毒胶囊(安徽省华康医药科技开发公司提供)，甲醇、乙腈(色谱纯),重蒸水自制。2

5、方法与结果2.1色谱条件固定相：DS18柱4.6250；流动相：乙腈水2872；流速：0.8l/in；检测波长：230n；柱温：25；进样量：20l。2.2对照品溶液的制备精细称取经105枯燥至恒重的连翘苷对照品适量，加甲醇制成每毫升中含连翘苷约15g的溶液，摇匀，即得。2.3供试品溶液的制备取本品精细称定，置具塞锥形瓶中，精细参加甲醇25l，密塞，称定重量，超声功率35040in，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，于4中放置过夜，滤过，精细量取续滤液10l，蒸至近干，加硅胶0.5g拌匀，加于硅胶柱200300目，3g，内径11.5上，用氯仿甲醇40160l洗脱，弃去洗脱液，继用氯

6、仿甲醇151洗脱，搜集10l洗脱液弃去，继搜集70l洗脱液，浓缩至干，残渣用甲醇溶解转移至10l量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。2.4线性关系考察精细称取连翘苷对照品9.92g，置100l量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精细量取0.5，1.0，2.0，3.0，5.0l分别至10l量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，按色谱条件进展含量测定，以峰面积S对浓度作二元一次线性回归，得回归方程S=92697+19063(r=0.9999)。结果见表1。表1线性关系考察略结果说明：连翘苷浓度范围在4.9649.6g/l之间峰面积与浓度线性关系良好。2.5精细度实验精细汲取上述供试品溶液2

7、0l，连续进样6次，按上述色谱条件测定，连翘苷峰面积积分值分别为1014021.1，1060035.9，1046227.8，1038431.3，1050578.5，1042934.9，RSD为1.67%，精细度良好。转贴于论文联盟.ll.2.6溶液稳定性实验精细汲取上述供试品溶液20l，分别在0，3，6，9，24，48h进样20l，按上述色谱条件测定，计算得平均RSD=0.74%，即连翘苷在48h以内稳定。2.7重现性实验取同一批抗病毒胶囊样品，按上述供试品溶液的制备的方法制备6份，按上述色谱条件测定。结果RSD=1.77%，重现性较好。2.8回收率实验采用加样回收法，精细称取连翘苷对照品，用

8、甲醇配成193.5g/l的对照品溶液，分别精细量取1l参加到五份含量的同一批样品溶液中，按供试品溶液的制备方法制得供试品溶液，照上述色谱条件进展测定，计算回收率。结果见表2。表2回收率试验结果略2.9样品含量测定取不同批号的样品，分别按供试品溶液的制备方法制备，按上述色谱条件测定，计算出样品中连翘苷的含量。结果见表3。表3样品中连翘苷的含量测定略*为每丸中含量3讨论3.1在该实验中，曾选用乙腈甲醇水体系作为流动相，但柱压太大，对色谱柱有损伤，后改用乙腈-水体系为流动相，通过调节不同比例的流动相实验，结果说明，以乙腈水2872为流动相别离度好R1.5,而且保存时间适宜。3.2本法中供试品溶液制备的试验研究，原样品采用甲醇超声，滤过直接进高效液相，结果杂质含量测定有影响，别离度不合要求，将样品进展前处理再进入高效液相，即将样品过柱子，现对吸附剂进展了考察，用氧化铝作为吸附剂时极性大的成分多对主峰有影响，且峰出完时间长；用硅胶作为吸附剂，对其规格、用量及洗脱剂均作了考察，确定硅胶的粒度及用量；又对洗脱剂的选择、配比及用量作了试验研究，经过大量的挑选试验，以氯仿-甲醇体系不同比例洗脱，用氯仿-甲醇401洗脱，继用氯仿甲醇151洗脱去除杂质多且将测定成分连翘苷洗脱完全，能到达峰出完时间