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文档简介
1、 21果酒制作的原理1 果酒和果醋的制作酵装置要清洗干净;每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。18250C?30350C?温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。200C 左右最适合酵母菌生殖,因此需要将温度把握在其最人类利用微生物发酵制作果酒,该过程用到的微生物是,它的代谢类型是,与异化作用有关的方程式有。生活状态:进展发酵,产生大量。果酒制作条件传统发酵技术所使用的酵母菌的来源是。酵母菌生长的最适温度是; PH呈;适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为30350C,因此要将温度把握在 30350C。4制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气?醋酸菌是好氧菌,再将酒精变成醋酸时需要养
2、的参与,因此要适时向发酵液中充气。P4:A 同学:每次排气时只需拧松瓶盖,不要完全揭开瓶盖;制醋时,再将瓶盖翻开,盖上一层纱布,进展葡萄醋的发酵。来防止发酵液被污染,由于操作的每一步都可能混入杂菌红色葡萄酒呈现颜色的缘由是:酒精发酵过程中,随着的提高,红色葡萄皮的B 同学:分析果酒和果醋的发酵装置中充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通进入发酵液,使葡萄酒呈色。在、的发酵液中,酵母菌可以生长生殖,而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。果醋的制作原理果醋发酵菌种是,陈代谢类型。过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接?充气口:是在醋酸发酵时连接充气泵进展充气用的; 排气口:是
3、在酒精发酵时用来排出二氧化碳的;出料口:是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是防止空气中微生物的污染。使用该装置当氧气和糖源充分时醋酸菌将糖分解成,当糖源缺乏时醋酸菌将变为制酒时,应当关闭充气口;制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气。再变成醋酸,其反响式。操作过程应留意的问题制作原理2 腐乳的制作为防止发酵液被污染,发酵瓶要用消毒。葡萄汁装入发酵瓶时,要留出大约的空间。制作葡萄酒时将温度严格把握在时间把握在d左右可通过对发酵的状况进展准时的监测。1经过微生物的发酵,豆腐中的蛋白质被分解成小分子的和,脂肪被分解和,因而更利于消化吸取。2腐乳的发酵有多种微生物参与,如、等
4、,其起主要作用的是。它是一种丝状,常见、制葡萄醋的过程中,将温度严格把握在,时间把握在d,并留意适时在上。充气。4酒精的检验检验试剂:。3现代的腐乳生产是在严格的条件下,将优良菌种直接接种在豆腐上这样可以避开其他菌种的,保证产品的质量。2. 腐乳制作的试验流程:反响条件及现象:在条件下,反响呈现。5.制作果酒、果醋的试验流程让豆腐长出3.试验留意事项-密封腌制。选择葡萄果酒果醋P4 旁栏思考题1你认为应领先洗葡萄还是先除去枝梗,为什么?应领先冲洗葡萄,然后再除去枝梗,以避开除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的时机。2你认为应当从哪些方面防止发酵液被污染?需要从发酵制作的过程进展全面的考虑,
5、由于操作的每一步都可能混入杂菌。例如:榨汁机、发在豆腐上长出毛霉时,温度把握在,自然条件下毛霉的菌种来自空气中的。将长满毛霉的豆腐块分层加盐加盐量要随着摆放层数的加高而表层要。加盐的目的是使豆腐块失水,利于,同时也能的生长。盐的浓度过低,;盐的浓度过高,。卤汤中酒精的含量应把握在左右它能微生物的生长同时也与豆腐乳独特的形成有关。酒精含量过高,;酒精含量过低,。香辛料可以调制腐乳的风味,同时也有作用。瓶口密封时,最好将瓶口,防止瓶口污染。P6旁栏思考题1.你能利用所学的生物学学问,解释豆腐长白毛是怎么一回事?豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。2.王致和为
6、什么要撒很多盐,将长毛的豆腐腌起来?盐能防止杂菌污染,避开豆腐腐败。 3你能总结出王致和做腐乳的方法吗? 让豆腐长出毛霉加盐腌制密封腌制。P7我们寻常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?含水量为 70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。吃腐乳时,你会觉察腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?“皮”是前期发酵时在豆腐外表上生长的菌丝匍匐菌丝形。“皮”对人体无害。P8腌制腐乳时,为什么要随豆腐层的加高而增加盐的含量?为什么在接近瓶口的外表要将盐厚铺一些?越接近瓶口,杂菌污染的可能性越大,因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量,在接近瓶口
7、的外表,盐要铺厚一些,以有效防止杂菌污染。怎样用同样的原料制作出不同风味的腐乳?可以不看 在酒和料上作变动红腐乳:又称红方,指在后期发酵的汤料中,配以着色剂红曲,酿制而成的腐乳。白腐乳:又称白方,指在后期发酵过程中,不添加任何着色剂,汤料以黄酒、白酒、香料为主酿 油方、霉香、醉方、辣方等品种。青腐乳:又称青方,俗称“臭豆腐”,指在后期发酵过程中,以低度盐水为汤料酿制而成的腐乳, 具有特有的气味,外表呈青色。酱腐乳:又称酱方,指在后期发酵过程中,以酱曲大豆酱曲、蚕豆酱曲、面酱曲等为主要辅料酿制而成的腐乳。3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量质亚硝胺,亚硝胺对动物有致畸和致突变作用。泡菜制作大致流程:原
8、料处理装坛成品配制盐水:清水和盐的比例为,盐水后备用。装坛蔬菜装至时参加香辛料装至时加盐水盐水要,盖好坛盖。坛盖边沿水槽中,保证坛内环境。腌制过程种要留意把握腌制的、和。温度过高食盐用量缺乏10%、过短简洁造成,。测亚硝酸盐含量的原理是。将显色反响后的样品与浓度的进展比较,可以大致出泡菜中亚硝酸盐的含量。测定步骤:配定溶液 制备样品处理液P9为什么含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶?酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。P10 旁栏思考题: 1为什么日常生活中要多吃颖蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜?有些蔬菜,入小白菜和萝卜等,含有丰富的硝
9、酸盐。当这些蔬菜放置过久发生变质发黄、腐烂 或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物复原成亚硝酸盐,危害人体安康。2为什么泡菜坛内有时会长一层白膜?你认为这层白膜是怎么形成的?形成白膜是由于产膜酵母的生殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液养分丰富,其外表氧气含量也很丰富,适合酵母菌生殖。P12 练习: 2你能总结果酒、果醋、腐乳、泡菜这几种发酵食品在利用微生物的种类和制作原理方面的不同吗? 你能总结出传统发酵技术的共同特点吗?果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵,果醋的制作利用的是醋酸菌将酒精转变成醋酸的代谢, 腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类, 泡菜的制作利用的是乳酸菌
10、的乳酸发酵。传统的发酵技术都奇异的利用了自然菌种,都为特定的菌种供给了良好的生存条件,最终的发酵产物不是单一的组分,而是成分简单的混合物。乳酸菌代谢类型为,在状况狂下,将葡萄糖分解为乳酸。在自然专题二 微生物的培育与应用界中分布广泛,在、内都有分布。常见的乳酸菌有和两种,其中常用于生产酸奶。亚硝酸盐为,易溶于,在食品生产中用作。一般不会危害人体1 微生物的试验室培育依据培育基的物理性质可将培育基可以分为和。培育基一般都含有、四类养分物质,另外还安康,但当人体摄入硝酸盐总量达g 时,会引起中毒;当摄入总量到达g 时,会需要满足微生物生长对、以及的要求。引起死亡。在特定的条件下,如、和的作用下,会
11、转变成致癌物3获得纯洁培育物的关键是。消毒是指灭菌是指P18为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作完毕时,仍旧需要灼烧日常生活中常用的消毒方法是此外人们也常使用化学药剂进展消毒如用、接种环吗?为什么?等。常用的灭菌方法有、,此外,试验室里还用或操作的第一步灼烧接种环是为了避开接种环上可能存在的微生物污染培育物;每次划线前灼烧接进展消毒。制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的方法步骤是,。微生物接种的方法中最常用的是和。平板划线是指。稀释涂布平板法指。菌种的保藏:临时保藏:将菌种接种到试管的,在适宜的温度下培育,长成后,放入冰箱中保藏,以后每36 个月,转移一次的培育基。缺点是:保
12、存时间,菌种简洁被或产生变异。长期保存方法:法,放在冷冻箱中保存。P15无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 无菌技术还能有效避开操作者自身被微生物感染。P16请你推断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。假设需要,请选择适宜的方法。培育细菌用的培育基与培育皿玻棒、试管、烧瓶和吸管试验操作者的双手1、2需要灭菌;3需要消毒。P17培育基灭菌后,需要冷却到 50 左右时,才能用来倒平板。你用什么方法来估量培育基的温度?可以用手触摸盛有培育基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进展倒平板了。为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?通过灼烧灭菌,防止瓶口的微
13、生物污染培育基。3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?平板冷凝后,皿盖上会分散水珠,凝固后的培育基外表的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培育基外表的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染。4.在倒平板的过程中,假设不留神将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培育微生物吗?为什么?空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物。种环是为了杀死上次划线完毕后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目渐渐削减,以便得到菌落。划线完毕后灼烧接种环,能准时
14、杀死接种环上残留的菌种,避开细菌污染环境和感染操作者。在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进展划线? 以免接种环温度太高,杀死菌种。在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划线?划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开头,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌生殖而来的菌落。P19涂布平板的全部操作都应在火焰四周进展。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想, 2应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培育皿的距离要适宜、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周;等等。P20 六、课题成果评价培
15、育基的制作是否合格假设未接种的培育基在恒温箱中保温12 d 后无菌落生长,说明培育基的制备是成功的,否则需要重制备。接种操作是否符合无菌要求假设培育基上生长的菌落的颜色、外形、大小根本全都,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;假设培育基上消灭了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未到达要求, 需要分析缘由,再次练习。是否进展了准时细致的观看与记录12 h 24 h 能观看到其他一些微小的变化。这一步的要求主要是培育学生良好的科学态度与习惯。P20提示:可以从微生物生长需要哪些条件的角度来思考。例如,微生物的生长需要水、空气、适宜的温度,食品保存可以通过保持枯燥、真空的条件,
16、以及冷藏等方法来阻挡微生物的生长。提示:可以从这三种培育技术的原理、操作步骤等方面分别进展总结归纳。例如,这三种培育技术都需要为培育物供给充分的养分,但无土栽培技术的操作并不需要保证无菌的条件,而其他两种技术都要求严格的无菌条件。提示:这是一道开放性的问题,答案并不惟一,重点在于鼓舞学生乐观参与,从不同的角度思考问题。例如,正是由于证明白微生物不是自发产生的,微生物学才可能进展成为一门独立的学科; 巴斯德试验中用到的加热灭菌的方法导致了有效的灭菌方法的消灭,而这一灭菌原理也适用于食品的保存等。课题2土壤中分解尿素的细菌的分别与计数尿素只有被分解成之后才能被植物吸取利用选择分解尿素细菌的培育基特
17、点:惟一氮源,按物理性质归类为培育基。PCR是一种在体外将。此项技术的自动化,要求使用耐高温的DNA聚合酶。P221.想一想,如何从平板上的菌落数推想出每克样品中的菌落数?3 个平板,计算出平板菌落数的平均值,然后按课本旁栏的公式进展计算。P223 试验室中微生物的筛选应用的原理是:人为供给有利于生长的条件包括两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数 106的培育集中,得到以等,同时抑制或阻挡其他微生物生长。选择培育基是指。常用来统计样品中活菌数目的方法是。即当样品的稀释度足够高时,培育基外表生长的一个菌落来源于样品稀释液中的 。通过统计平板上的菌落数就能推想出样品中
18、大约含有多少活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在的平板进展计数,计数公式是。利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是 。另外,也是测定微生物数量的常用方法。一般来说,统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。这是由于。因此,统计结果一般用而不是活菌数来表示。设置比照试验的主要目的是,提高试验结果的可信度。比照试验是满足该条件的称为未满足该条件的称为。试验设计包括的内容有:、 、 和 ,具体的试验步骤以准时间安排等的综合考虑和安排。不同种类的微生物往往需要不同的培育和培育在试验过程中,一般每隔 24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以。土壤有“”之称,同其他生物环境相
19、比,土壤中微生物、。土壤中的微生物约是细菌,细菌适宜在酸碱度接近潮湿土壤中生长。土壤中微生物的数量不同,分别不同微生物承受的的稀释度不同。一般来说,在肯定的培育条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括菌落的、和等方面。在进展多组试验过程中,应留意做好标记,其目的是。对所需的微生物进展初步筛选,只是分别纯化菌种的第一步,要对分别的菌种进展一步的鉴定,还需要借助的方法。在细菌分解尿素的化学反响中细菌合成的 将尿素分解成了 。氨会使培育基的碱性 ,PH。因此,我们可以通过检测培育基 变化来推断该化学反响是否发生。在以 为唯一氮源的培育基中参加 指示剂。培育某种细菌后,假设PH 上升,指示
20、剂将变 ,说明该细菌能够 。下两种统计结果:1.第一位同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为 230;2.其次位同学在该浓度下涂布了三个平板第一位同学只涂布了一个平板,没有设置重复组,因此结果不具有说服力。其次位同学考虑到设312过程中可能消灭了错误,因此,不能简洁地将3P22A 同学的结果与其他同学不同,可能的解释有两种。一是由于土样不同,二是由于培育基污染或操作失误。到底是哪个缘由,可以通过试验来证明。试验方案有两种。一种方案是可以由其他同学用 与 A同学一样的土样进展试验,假设结果与A 同学全都,则证明A 无误;假设结果不同,则证明A操作失误或培育基的配制有问题。另一种方案是将A
21、同学配制的培育基在不加土样的状况下进展培育,作为空白比照,以证明培育基是否受到污染。通过这个事例可以看出,试验结果要有说服力, 比照的设置是必不行少的。P24为什么分别不同的微生物要承受不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围一样吗?这是由于土壤中各类微生物的数量单位:株/kg是不同的,例如在干旱土壤中的上层样本中: 2185 万,放线菌数约为477 万,霉菌数约为23.1类型的微生物,就需要按不同的稀释度进展分别,同时还应当有针对性地供给选择培育的条件。P25 结果分析与评价培育物中是否有杂菌污染以及选择培育基是否筛选出菌落比照的培育皿在培育过程中
22、没有菌落生长,说明培育基没有被杂菌污染。牛肉膏培育基的菌落数目明显大于选择培育基的数目,说明选择培育基已筛选出一些菌落。样品的稀释操作是否成功2 2 30300 的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进展菌落的计数。重复组的结果是否全都假设学生选取的是同一种土样,统计的结果应当接近。假设结果相差太远,教师需要引导学生一起分析产生差异的缘由。P262.提示:反刍动物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微 还应参照厌氧菌的培育方法进展试验设计。的另一缺点是:有些微生物具有降解色素的力量,它们在长时间培育过程中会降解刚果红形成明显的透亮圈,与纤维素分解菌不易区分。课题3
23、分解纤维素的微生物的分别纤维素是类物质,是自然界中纤维素含量最高的自然产物此外木材、作物秸秆等也富含纤维素。为什么选择培育能够“浓缩”所需的微生物?在选择培育的条件下,可以使那些能够适应这种养分条件的微生物得到快速生殖,而那些不适应这种养分条件的微生物的生殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。2纤维素酶是一种酶,一般认为它至少包括三种组分,即、P29 六、课题成果评价三种酶的协同作用下,纤维素最终被水解成葡萄糖,为微生物的生长供给养分,同样,也可以为人类所利用。筛选纤维素分解菌可以用法,这种方法能够通过直接对微生物进培育基的制作是否合格以及选择培育基是否筛选出菌落:比照的培育基在培育过程中没有
24、菌落 分别的结果是否全都:由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量,因此最简洁分别得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同,学生也可能得到真菌和放线菌等不同的分别结果。行筛选。可以与像纤维素这样的多糖物质形成,但并不和水解后的P30练习和发生这种反响。纤维素分解菌能产生分解纤维素,从而使菌落四周形成。答:流程图表示如下。土壤取样选择培育此步是否需要,应依据样品中目的菌株数量的多少来确定梯度稀释分别分解纤维素的微生物的试验流程图如下:梯度稀释将菌悬液涂布到有特定选择作用的培育基上选择单菌落发酵培育-。为确定得到的菌是否是纤维素分解菌,还学进展的试验。纤维素酶的发酵方法有发酵和发酵。测定方法
25、一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的进展定量测定。P28222氮源的选择性培育基上,直接分别得到菌落。本课题通过选择培育,使纤维素分解菌得到增殖后,再将菌液涂布在选择培育基上。其他步骤根本全都。为什么要在富含纤维素的环境中查找纤维素分解菌?由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于一般环境。将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应当埋进土壤多深?将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚拢10 cmP291想一想,这两种方法各有哪些优点与缺乏?你打算选用哪一种方法?两种刚果红染色法的比较方法一是传统的方法,缺点是
26、操作繁琐,参加刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;其优点是这样显示出的颜色反响根本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便,不存在菌落混杂问题,缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物消灭假阳性反响。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透亮圈较为模糊,由于培育基中纤维素占主要地位,因此可以与纤维素酶产生的透亮圈相区分。方法二1 菊花的组织培育有某种生物全套的任何一个活细胞,都具有发育成的力量,即每个生物细胞都具有但在生物体的生长发育过程中并不表现出来这是由于在条件下,通过基因的,构成不同组织和器官。植物组织培育技术的应用有:实现优良品种的;培育作物;制作种子
27、;培育作物以及细胞产物的等。细胞分化:个体发育中细胞在上消灭差异的过程。愈伤组织是通过形成的,其细胞排列,高度呈状态的细胞。植物组织培育的过程可简洁表示为:脱分化脱分化愈伤组织生长个体材料:植物的种类、材料的和等都会影响试验结果。菊花组织培育一般选择作材料。养分:常用的培育基是培育基,其中含有的大量元素是,微量元素是,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。激素:在培育基中需要添加和等植物激素,其、等都影响结果。环境条件:PH、等环境条件。菊花组培所需PH 为,温度为,光照条件为。配制各种母液:将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时依据母液的,计算用量,并加稀释。配制培育基:应参加的物
28、质有琼脂、 、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液,并用定容到 毫升。在菊花组织培育中,可以不添加,缘由是菊花茎段组织培育比较简洁。灭菌:实行的灭菌方法是。发酵操作前期预备:用消毒工作台,点燃酒精灯。留意全部接种工作都必需在酒精灯旁进展,器械使用前后都要用火焰灼烧 。接种操作:接种过程中插入外植体时朝上,每个锥形瓶接种 个外植体。外植体接种与细菌接种相像之处是。培育过程应当放在 中进展,并定期进展消毒,保持适宜的 和 。课题成果评价分裂分裂一对接种操作中污染状况的分析课题成果评价分裂分裂一对接种操作中污染状况的分析时期n细胞n细胞n接种 34 d 后,在接种操作中被杂菌污染的培育物会表现
29、出被污染的现象。请学生适时统计污染率,分析接种操作是否符合无菌要求。单核期n细胞核n细胞核n二是否完成了对植物组织的脱分化和再分化观看试验结果,看看是否培育出了愈伤组织,记录多长时间长出愈伤组织。统计更换培育基后愈伤组织进一步分化成根和芽的比例和时间。三是否进展了统计、比照与记录做好统计和比照,填好结果记录表,培育严谨的科学态度。从试验的第一步开头就要求学生做好试验记录,可以让学生分组配制不同培育基,如诱导愈伤或直接分化丛芽的培育基,然后做不同配方的比较。2.你打算做几组重复?你打算设置比照试验吗?答:教师可以安排学生分组,做不同的材料或配方,最终分别汇报成果。但每种材料或配方至少要做一组以上
30、的重复。设置比照试验可以取用一个经过灭菌的装有培育基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培育,用以说明培育基制作合格,没有被杂菌污染。二练习答:植物组织培育所利用的植物材料体积小、抗性差,对培育条件的要求较高。用于植物组织培育的培育基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培育物一旦受到微生物的污染,就会导致试验前功尽弃,因此要进展严格的无菌操作。答:外植体的生理状态是成功进展组织培育的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,简洁诱导脱分化和再分化。2 月季的花药培育1.小孢子母细胞小孢子母细胞2n个精子(n)单核期n分裂双核期育被子植物花粉的发育要经受、和等阶段。花粉是由花粉母
31、细胞经过而形成的,因此花粉是。在正常状况下一个小孢子母细胞可以产生个精子在一枚花药中可以产生个花粉。产生花粉植物的两种途径四生根苗的移栽是否合格生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根系外表的培育基,又不能伤及根系。一般使用无土栽培花药中的花粉脱分化丛芽诱导生根移栽5%的高锰酸钾,并用塑料薄膜掩盖 12花药中的花粉脱分化丛芽h24 h 才能移栽。移栽的组培苗要在温室过渡几天,等壮苗后再定植大田或进展盆栽。学生可以在课后统计自己移栽的成活率,看看移栽是否合格。答案和提示一旁栏思考题你能说出各种养分物质的作用吗?同专题2 中微生物培育基的配方相比,MS 培育基的配方有哪些明显的不同?答:微量元素和大量
32、元素供给植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖供给碳源,同时能够维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到肯定影响后所产生的特别养分需求。微生物培育基以有机养分为主。与微生物的培育不同,MS 培育基则需供给大量无机养分,无机盐混合物包括植物生长必需的大量元素和微量元素两大类。诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的凹凸,受多种因素影响, 其中影主要因素是:和等。材料的选择:从花药来看,应中选择初花期、盛花期、晚花期的花药;从花粉来看,应中选择四分体期、单核期、双核期、萌发期的花粉;从花蕾来看,应中选择完全未开放、略微开放、完全盛开的花蕾。选择花药时一般通过确定花粉发
33、育时期,此时需要对花粉细胞核进展染色,最常用的染色剂是和,它们分别可以将细胞核染成色和色。在使用焙花青铬钒溶液时,需要首先将花药用处理20min。该试剂的配制方法是将按体积比为的比例混合均匀。消毒后的花蕾,要在 条件下除去花萼、花瓣。剥取花药时,一是留意不要损伤花药,缘由是;二是要彻底除去花丝,原因是。剥取的花药要马上接种到 上每个培育瓶接种 个花药花药培育利用的培育基是培育基,pH 为 ,温度为 ,幼苗形成之前需要、不需要光照。在花药培育基中,用量最高的激素是;在诱导丛芽或胚状体培育基中,用量最高的激素是 ;在诱导生根的培育基中,用量最高的激素是。培育2030d后花药开裂长出或释放出胚状体前
34、者还要转移到上进展分化培育成再生植株;后者要尽快并转移到的培育基上。通过愈伤组织形成的植株,经常会消灭的变化,因而需要鉴定和筛选。课题成果评价一选材是否恰当选材是否成功是花药培育成功的关键。学生应学会通过显微镜观看处于适宜发育期的花粉。二无菌技术是否过关假设消灭了污染现象,说明某些操作步骤,如培育基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。三接种是否成功概念:原理:细胞的全能性根底:条件:脱分化再分化 以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。答案和提示一旁栏思考题为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?答:花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。二练习答:F2Aasusu 或 AAsus
35、u。假设运用常规育种方法,将 F2 代中的紫色甜玉米与白色甜玉米aasusu进展测交,可以选择出基因型为AAsusu 纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐,耗时也较长,需要至少三年的选种和育种时间。假设利用花药培育的技术,在 F1 代产生的花粉中就可能有Asu 的组合,再将花粉植株进展染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米植物组织培育的根本过程: 外植体愈伤组织胚状体幼苗菊花外植体的选择的组影响植物组织培育的因素:养分、环境等织培植物激素的用法养植温度、pH、光照等物组试验操作:制备MS 培育基外植体消毒接种培育移栽栽培织培被子植物花粉的发育:花粉母细胞减数分裂小孢子母细胞四分体时期 养单核期双核
36、期精子月产生花粉植株的两种途径:的纯合体AAsus。这种方法可以大大缩短育种周期。答:植物组织培育技术与花药培育技术的一样之处是:培育基配制方法、无菌技术及接种操作季花的花药中的花粉花脱分化分化胚状体丛芽诱导生根移栽诱导等根本一样。两者的不同之处在于:花药培育的选材格外重要,需事先摸索时期适宜的花蕾;花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要准时更换培育基;花药培育对培育基配方的要求更为严格。这些都使花药培育的难度大为增加。药培花药中的花粉养脱分化再分化愈伤组织丛芽主要因素:材料的选择与培育基的组成影响花药培育的因素: 重要因素:选择适宜的花粉发育时期5 DNA等质技术材料的选取:确定花粉发育时期
37、的方法7试验操作: 材料的消毒:接种和培育: 10一DNA 的粗提取与鉴定试验原理提取生物大分子的根本思路是。对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用与、等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。DNADNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以到达分别目的。DNA 不溶于溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分别。DNA蛋白酶能水解,但是对没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080oC 的高温,而DNA才会变性。洗涤剂能够瓦解,但对DNADNA在条件下,DN
38、A 遇会被染成色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。试验设计试验材料的选取但凡含有的生物组织, 成功的可能性更大。DNA裂开动物细胞:如在鸡血细胞液中参加肯定量的,同时用搅拌,过滤后收集滤液即可。裂开植物细胞如洋葱,需在切碎的洋葱中参加肯定的和,进展充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。参加蒸馏水作用:蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种液体,使血细胞,再加上搅DNA。参加洗涤剂的作用是:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解,有利于的释放;参加食盐的作用是:溶解。假设研磨不充分,会使细胞核内的释放不完全,提取的DNA 量变,影响试验结果,导致看不到、用二苯胺鉴定不显示等。去除滤液中的杂质方案一:利用DNA
39、 在不同浓度NaCl不同,通过把握去除杂质。方案二:依据酶的专一性,利用木瓜蛋白酶分解,而不分解;方案三:利用DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使变性,与分别。DNADNA,静置 23min,溶液中会消灭,这就是粗提取的DNA。DNA的NaCl4ml,混合均匀后,在条件下,溶液被染成色。留意事项以血液为试验材料时,需要参加柠檬酸钠防止要提取洋葱等的DNA 时,参加洗涤剂后,动作要,否则简洁产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。参加酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致DNA 分子不能形成絮状沉淀。二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。当NaCl0.14mol/LDNA;当NaCl0.14
40、mol/LDNA。专题六植物有效成分的提取课题1植物芳香油的提取【导学诱思】植物芳香油的来源自然香料的主要来源是和。动物香料主要来源于麝、灵猫、海狸和抹香鲸等,植物香料的来源更为广泛。植物芳香油可以从大约50 多个科的植物中提取。例如,工业生产中,玫瑰花用于提取,樟树树干用于提取。提取出的植物芳香油具有很强的,其组成也,主要包括及其思考:你能说出一些用于提取某些植物芳香油的器官吗?并分别可提取哪种芳香油?植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有 、和 等具体承受那种方法要依据植物原料的特点来决定。是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是依据蒸馏过程中 的位置,可以将水蒸气蒸馏法划分为 、 和
41、。其中,水中蒸馏的方法对于有些原料不适用,如柑橘和柠檬。这是由于等问题。因此,柑橘、柠檬芳香油的制备通常使用 法。植物芳香油不仅 ,而且易溶于 ,如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不适于用水蒸气蒸馏的原料,可以考虑使用 法。萃取法是将的方法。芳香油溶解于有机溶剂后,只需蒸发出有机溶剂,就可以获得纯洁的了。但是,用于萃取的有机溶剂必需 , ,否则会影响芳香油的质量。3、玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作的主要成分,能使人产生愉悦感。由于玫瑰精油化学性质,难溶于,易溶于,能随一同蒸馏, 通常承受法中的法。 提取玫瑰精油的试验流程、。思考:在提取过程中,如何对乳浊液的处理和玫瑰液的回收?4、橘皮精油的提取,由
42、于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生局部水解,使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题,所以一般承受 法。具体的流程是 、 、 、 、 、 、。试验案例案例一玫瑰精油的提取5 月上、中旬是玫瑰的盛开期,最好是选用当天采摘的鲜玫瑰花。将花瓣用清水冲洗,去掉上面 本试验的具体操作步骤如下。1.50g500mL200mL6-2蒸馏装置。蒸馏装置包括:铁架台两个、酒精灯、石棉网、蒸馏瓶、橡胶塞、蒸馏头、温度计、直 型冷凝管、接液管、锥形瓶,以及连接进水口和出水口的橡皮管。全部仪器必需事先枯燥,保证无水。整套蒸馏装置可分为左、中、右三局部,其中左边的局部通过加热进展蒸馏,中部将蒸馏物冷凝,右 边的安装
43、挨次和方法如下。固定热源酒精灯。6-2 所示,并且保持蒸馏瓶轴心与铁架台的水平面垂直。安装蒸馏头,使蒸馏头的横截面与铁架台平行。连接冷凝管。保证上端出水口向上,通过橡皮管与水池相连;下端进水口向下,通过橡皮管与水龙头相连。连接接液管或称尾接收。 在试验前称重,并做好记录。将温度计固定在蒸馏头上,使温度计水银球的上限与蒸馏头侧管的下限处在同一水平线上。2.蒸馏装置安装完毕后,可以在蒸馏瓶中加几粒沸石,防止液体过度沸腾。翻开水龙头,缓缓通入冷水,然后开头加热。加热时可以观看到,蒸馏瓶中的液体渐渐沸腾,蒸气渐渐上升,温度计读数也略有上升。当蒸气的顶端到达温度计水银球部位时,温度计读数急剧上升。在整个
44、蒸馏过程中,应12 滴为宜。蒸馏完毕,应先撤出热源,然后停顿通水,最终拆卸蒸馏装置,拆卸的挨次与安装时相反。3.收集锥形瓶中的乳白色的乳浊液,向锥形瓶中参加质量浓度为0.1 g/mL 的氯化钠溶液,使乳化液分层。然后将其倒入分液漏斗中,用分液漏斗将油层和水层完全分开。翻开顶塞,再将活塞缓缓旋开,放出下层的玫瑰精油,用接收瓶收集。向接收瓶中参加无水硫酸钠,吸去油层中含有的水分,放置过夜。活塞孔中,以免污染萃取液。塞好活塞后,把活塞旋转几圈,使润滑脂分布均匀。并用水检查分液漏斗的顶塞与活塞处是否渗漏,确认不漏水后再使用。将分液漏斗放置在大小适宜的、并已固定在铁架台上的铁圈中,关好活塞。将待分别的液
45、体从上部开口处倒入漏斗中,塞紧顶塞,留意顶塞不能涂润滑脂。取下分液漏斗,用右手手掌顶住漏斗顶塞并握住漏斗颈,左手握住漏斗活塞处,大拇指压紧活塞,将分液漏斗略倾斜,前后振荡开头振荡时要慢。振荡后,使漏斗口仍保持原倾斜状态,左手仍握在漏斗活塞处,下部管口指向无人处,用拇指和食指旋开活塞,使其释放出漏斗内的蒸气或产生的气体,以使内外压力平衡,这一步操作也称做 23 min,然后将漏斗放回铁圈中,待液体静置分层。案例二橘皮精油的提取课前预备在试验前一天,教师需要预备颖的、没有霉烂的橘皮,用量可依据试验人数来打算。用清水冲 洗橘皮,去掉灰尘等杂质,沥干水分后,将橘皮摊放在枯燥通风处。将晾干的橘皮浸泡在p
46、H 大于 12、7%8%的石灰水中,时间为1624h,23稍硬、脆而不断、具有弹性。这样的橘皮在压榨时不易打滑,橘油的喷射力强;压榨后的残渣呈颗粒 状,残渣中的含水量低,黏稠度不太高,过滤时比较顺当,不易堵塞筛孔。提取橘皮精油的具体步骤如下。将浸泡后的橘皮,用流淌的水漂洗,洗净后捞起、沥干。切记肯定要将橘皮彻底冲洗干净。然 3 mm 大小,放入家用榨汁机或手动压榨机中粉碎。粉碎时参加与橘皮同质量的质量分0.255%的硫酸钠溶液,并调整pH78。在榨出的油水混合液中参加明矾,使之沉淀并变澄清,然后用布袋过滤,除去糊状残渣。再将6 000 r/min8 000 r/min的转速进展高速离心。在正常
47、状况下,离心后获得的香精油将是澄清透亮的。分别出的香精油往往带有少量水分和蜡质等杂质,为了进一步除去杂质,可以将分别的产品放5 10 的冰箱中,静置 57 d,让杂质与水下沉。然后用吸管吸出上层澄清的油层,再通过垫有滤纸或石棉纸的漏斗进展减压抽滤,得到黄色油状的橘皮精油。课题成果评价一是否提取出了植物精油从玫瑰花提取的芳香油是浅黄色至黄色的液体,并带有甜韵的玫瑰香;从橘皮提取的橘皮精油无色透 明,具有迷人的橘香味。本课题只是对两种精油进展了初步的提取,其中仍旧含有大量的杂质。二出油率的计算依据教科书供给的公式计算出油率。假设出油率高,说明试验方案设计合理;假设出油率低,教师可以帮助学生从试验方
48、法的选择、试验过程的操作等各方面分析缘由,改进后再作尝试。答案和提示练习23果实,比方胡桃油、甜杏油。基底油与其他芳香油调配在一起,能够加强成效。香水等化装品。提取出的玫瑰油不含有任何添加剂或化学原料,是纯自然的护肤品,具有极好的抗年轻和止痒作用,能够促进细胞再生、防止肌肤老化、平抚肌肤细纹,还具有使人放松、愉悦心情的成效。杏仁油富含矿物质和维生素,是一种质地轻柔、高渗透性的保湿剂。熏衣草精油取自熏衣草花,具有怡神、助睡眠、舒缓压力的作用,此外它还具有降压、止痛、促进细胞再生的功能,可以用于治疗烫伤和蚊虫叮咬、预防和改善脱发。柠檬精油取自柠檬果皮,具有消退紧急、焦虑、兴奋精神的作用,可用于治疗
49、神经衰弱、关节炎, 还具有促进血液循环、杀菌止痛、平衡油脂分泌、舒缓肌肤老化、滋养头发的成效。茶树精油具有颖、猛烈的药草香味,能改善毛孔堵塞,净化肌肤,抗感染,对治疗青春痘有奇效。它也能消退疲乏、缓解压力。天竺葵精油能收敛皮肤,平衡、调理、润滑中干性皮肤和敏感性皮肤,改善橘皮样表皮,还有助于恢复精力,平缓心情。茉莉精油能防止肌肤老化,对中干性皮肤和敏感性皮肤具有良好的保湿和滋润作用,尤其对女性的妊娠纹和内分泌有独特的改善效果。橙花精油具有清爽的水果香味,不但能使人冷静,还能防止中干性肌肤的老化现象发生,给肌肤赐予青春活力,促进皮肤再生。建议:教师可以组织学生进展一次社会调查,并要求学生写出具体
50、的调查报告。2 胡萝卜素的提取【导学诱思】胡萝卜素是 化学性质比较 不溶于水微溶于 易溶于等有机溶剂。依据双键的数目可以将胡萝卜素划分为、三类。是其中最主要的组成成分。与-胡萝卜素化学构造类似的胡萝卜素约有 100 多种,它们大多存在于蔬菜中。等蔬菜是提取自然-胡萝卜素的原料。工业生产上,提取自然 -胡萝卜素的方法主要有三种,一是从中提取,二是从中获得,三是利用生产。本课题所供给的方法只能提取胡萝卜素的,假设要获得-胡萝卜素,还需要进一步的。提取胡萝卜素的试验流程有、。思考:影响萃取的因素有哪些?试验案例提取胡萝卜素的主要步骤如下。500g40 的烘箱中烘干,时间约需2h,将枯燥后的胡萝卜进一
51、步粉碎过筛。留意胡萝卜的粉碎肯定要彻底。500 mL200 mL6-730 min,然后过滤萃取液,除去固体物质。按教科书中图 6-2 所示安装蒸馏装置,对萃取的样品进展浓缩。具体的操作步骤及留意事项见11。收集承受器中的样品,观看样品的颜色和气味,并通过纸层析进展鉴定。层析时留意选择干净的滤纸,为了防止操作时对滤纸的污染,应尽量避开用手直接接触滤纸,可以带手套进展操作。点样时应留意点样斑点不能太大直径应小于0.5 c,假设用吹风机吹干,温度不宜过高,否则斑点会变黄。将点好样的滤纸卷成筒状,卷纸时留意滤纸的两边不能相互接触,以免因毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快,溶剂前沿不齐,影响结果。
52、课题成果评价一确定提取胡萝卜素的最正确方案在进展本试验时,教师可以将学生分组,每组可以承受不同的有机溶剂和时间进展萃取,比较各组的试验结果,确定提取胡萝卜素的最正确方案。二是否消灭对应的层析带假设萃取样品中消灭了和标准样品一样的层析带,说明提取胡萝卜素的试验成功。由于提取物中含有杂质,萃取样品的颜色可能比标准样品的颜色浅,我们也可以通过颜色的比较,初步确定提取的胡萝卜素的量。答案和提示一资料一萃取剂的选择争辩题乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗?为什么?答:胡萝卜素可溶于乙醇和丙酮,但它们是水溶性有机溶剂,因萃取中能与水混溶而影响萃取效果,所以不用它们作萃取剂。 答:在这五种有机溶剂中,石油醚
53、的沸点最高,在加热萃取时不易挥发,所以石油醚最适宜用作萃取剂。二练习提取方法提取方法试验原理方法步骤适用范围利用水蒸气将挥发性水蒸气较强的芳香油携带出蒸馏来水蒸气蒸馏分别油层除水过滤再次过滤粉碎、枯燥萃取、过滤浓缩适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油压榨法通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取有机溶剂萃取使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发溶剂后就可获得芳香油适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶液中参考答案专题一传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋的制作1.酵母菌兼性厌氧型C HO +6HO+6O 6CO+12HO+能量无氧时C HO 2C
54、H OH+2CO +能量,61262226126252酒精2附着于葡萄品皮上的野生型酵母菌20 酸性3酒精度色素深红4缺氧酸性1醋酸菌需氧型2醋酸乙醇 乙醛C2H5OH+O2CH3COOH +H2O1体积分数为70%的酒精21/331825 10-12天4303578天 通气口1重铬酸钾2酸性 灰绿色冲洗 榨汁 酒精发酵 醋酸发酵课题2 腐乳的制作1.肽 氨基酸 甘油 脂肪酸2.青霉 酵母 曲霉 毛霉 毛霉 真菌 土壤 水果 蔬菜 谷物3.无菌 毛霉 污染毛霉 加盐腌制 加卤汤装瓶115-18 毛霉孢子2增加盐量 铺厚一些 成形 抑制其它微生物 缺乏以抑制微312% 抑制 腐乳成熟时间延长 缺乏以抑制微生物的生长,导致豆腐腐败 防腐杀菌4通过酒精灯的火焰课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量异氧厌氧型 无氧 空气 土壤 植物体外表 肠道 乳酸链球菌 乳酸杆菌乳酸杆菌白色粉末 水 添加剂 0.3-0.5 3适宜温度 PH 肯定的微生物盐水配制 封坛14:1 煮沸冷却2一半 八成满 没过全部菜料 注满水 无氧3时间 温度食盐的用量 腌制时间细菌大量生殖 亚硝酸盐含量增加在盐酸酸化条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反响后与N一1一萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红染料制备标准显色液 比色专题二 微生物的培育与应用课题1 微生物的试验室培育液
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