柴苓归芪汤对实验性肾病综合征大鼠脂质过氧化功能的影响

1、柴苓归芪汤对实验性肾病综合征大鼠脂质过氧化功能的影响【摘要】目的讨论柴苓归芪汤对脂质过氧化损伤的保护作用。方法SD大鼠36只随机分为模型组、辛伐他汀组、柴苓归芪组和正常组。模型组、辛伐他汀组和柴苓归芪组采用尾静脉一次性注射阿霉素5g.kg复制肾病综合征大鼠模型，正常组注射等量0.9%氯化钠注射液。选模1周后开场灌胃，辛伐他汀组给予辛伐他汀1g.kgd，柴苓归芪组给予柴苓归芪汤煎剂27gkgd，蚓激酶每日给予1次2.5g.100g，1500U.g，共用药5周。正常组和模型组灌服等量蒸馏水。分别用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥法检测血清及肾组织超氧化物歧化酶SD的活性和丙二醛DA含量。结果模型组血清及

2、肾组织中SD活性均较正常组明显降低P0.05，P0.01，而DA含量却较正常组升高P0.05，P0.01，提示阿霉素肾病AN大鼠去除氧自由基才能降低;柴苓归芪组血清和肾组织SD活性明显升高P0.05，P0.01，而DA含量明显降低P0.05，P0.01，提示柴苓归芪汤不仅能进步全身氧自由基去除才能，而且能改善肾脏部分脂质过氧化状态。结论柴苓归芪汤可以有效的增强肾病综合征大鼠血清及肾组织SD活性，降低血清及肾组织DA含量，从而进步机体抗氧化才能，减轻脂质过氧化损伤。【关键词】肾病综合征大鼠SD脂质过氧化超氧化物歧化酶;丙二醛【Abstrat】bjetiveTstudytheeffetfhaili

3、ngguiqidetinninjuryflipidperxidatin.ethds36ratdelfnephrtisyndreeredupliatedbyinjetinfAdriayin.Ratseredividedintdelgrup，Sivastatingrup，hailingguiqidetingrupandntrlgrup.Ratsindelsrupandntrlgruperetabkenbydistillednater.RatsinSivasfatingrupandhailigguiqigrupadinistratedseparatelySivastatin1g.kgdandhail

4、ing-guiqidetin.ThententsfSDandDAinseruandtissueeredetetedbyethdfxanthinxidaseandthi-bar-bitne.ResultsSDativityinseruandtissueindelgruperedereasedparediththseinntrlgrup.ThententfDAinseruandtissueindelgrupereinreasedparediththseinntrlgrup.TheresultsshedthatAdriayin-induednephrpathyratlssabilityfreving

5、xygenfreeradial.SDativityinseruandtis-sueinhailingguiqidetingrupereinreased.ThententfDAinseruandtissueinhailingguiqidetingruperedereased.nlusinhailingguiqidetinaneffetivelyinreaseSDativityinseruandtissueanddereasententfDAinseruandtissue，thenelevateabilityfantixygenfreeradial.【Keyrds】Nephrtisyndre;Li

6、pidperxidatin;SD;DA自由基是肾小球损伤的重要介质1。近年来，有关氧化损伤、氧自由基对肾脏损伤的机制备受关注23。我们已从实验研究证实了柴苓归芪汤通过降低血脂、减少蛋白尿，保护阿霉素肾病AN大鼠的肾功能4。AN大鼠模型是经典的实验性肾病综合征大鼠模型，本研究采用该型5，观察柴苓归芪汤对AN大鼠血清及肾组织超氧化物歧化酶SD、丙二醛DA的影响，讨论其对脂质过氧化损伤的保护作用。1材料与方法1.1实验动物与药物1.1.1实验动物选用清洁级安康雄性SD大鼠36只，体重为18010g，由河北医科大学动物中心提供编号DK0311-0102。1.1.2实验用药阿霉素:由汕头经济特区明治医药

7、消费批号:020702，10g.支。柴苓归芪汤由柴胡10g、黄芩10g、当归15g、黄芪30g、茯苓15g、猪苓12g地龙等组成按比例称取后，水煎、过滤、浓缩，每L含生药1.8g。鉴于地龙中主要活性成分蚓激酶在65以上酶活性开场下降，8530in酶活性完全丧失6，不能入煎剂，故用其提取物蚓激酶替代地龙冲服。蚓激酶:由北京百奥药业有限责任公司消费批号:20220706，30万单位.粒;辛伐他汀:由杭州默沙东制药消费批号:N1027，10g.片。SD、DA试剂盒:南京建成生物工程研究所。1.2模型制备、分组与给药实验动物用普通饲料适应性喂养1周后，分别置于代谢笼里取尿，检测尿蛋白和尿红细胞，结果全

8、部为阴性。按体重随机分为正常组、模型组、辛伐他汀组和柴苓归芪组。正常组为6只，其他3组均为10只。模型组、辛伐他汀组、柴苓归芪组按5g.kg进展一次性尾静脉注射阿霉素，正常组注射等量0.9%氯化钠注射液。造模1周后开场灌胃，辛伐他汀组给予辛伐他汀1g.kgd;柴苓归芪组给予柴苓归芪汤煎剂27g.kgd，用药量为成人剂量的15倍;蚓激酶用量按文献报道每日给予1次2.5g.100g，1500U.g7。共用药5周。正常组和模型组灌服等量蒸馏水。1.3血清及组织制备1.3.1血清制备在实验第7周末用10%水合氯醛按30g.kg的剂量将大鼠腹腔注射麻醉，心脏采血，离心，取血清备用。1.3.2肾组织匀浆制

9、备在实验第7周末杀检动物，取部分肾组织液氮冻存。取适量冻存的肾组织，在0用0.9%氧化钠注射液漂洗，滤纸拭干，称重。用0.9%氯化钠注射液做匀浆缓冲液，制成10%组织匀浆。将玻璃匀浆器置于冰水中，上接电动匀浆机充分研碎组织，使组织匀浆化。匀浆液于4，15000r.in，离心30in。取上清液-70冰箱冻存备用，行SD、DA检测。1.4检测工程与方法1.4.1血清SD、DA检测SD检测用黄嘌呤氧化酶法，DA检测用硫代巴比妥法，严格按照试剂盒操作规程进展。1.4.2肾组织SD、DA检测测定方法同血清。但肾组织SD、DA测定结果须用上清液中蛋白质含量进展校正。蛋白质测定按福林-酚法Lry氏法进展。1

10、.5统计学处理使用SPSS10.0frinds统计软件，所有数据均用均数标准差xs表示，采用单因素方差分析法对实验结果进展统计学分析。2结果2.1动物死亡情况正常组在实验中未出现死亡;辛伐他汀组于实验第6周死亡1只，模型组和柴苓归芪组于实验第7周各死1只，可能是由于尾部感染所致。尾部感染与注射部位阿霉素渗漏引起部分缺血坏死有关。2.2各组大鼠血清SD、DA的测定见表1。表1各组大鼠血清SD、DA的比拟由表1可见，模型组大鼠血清SD活性明显低于正常组P0.01，DA含量明显高于正常组P0.01，提示AN大鼠全身抗氧化功能受损，存在脂质过氧化损伤;辛伐他汀组与模型组相比，SD活性明显增强P0.05

11、，DA含量显著降低P0.01，说明柴苓归芪汤和辛伐他汀有抗氧化损伤作用。辛伐他汀组与柴苓归芪组比拟差异无统计学意义P0.05。转贴于论文联盟.ll.2.3各组大鼠肾组织SD、DA测定见表2。表2各组大鼠肾组织SD、DA的比拟由表2可见，模型组大鼠肾组织SD活性明显低于正常组P0.01，DA含量明显高于正常组P0.05，提示AN大鼠肾组织中抗氧化功能受损，存在过氧化损伤;柴苓归芪组和模型组相比，肾组织中SD活性明显增强P0.05，DA含量显著降低P0.05;而辛伐他汀组和模型组相比，虽然SD数值有所升高，DA数值有所降低，但无统计学意义。提示在肾组织中柴苓归芪汤抗氧化损伤作用优于辛伐他停3讨论N

12、S属于中医学水肿范畴。其形成机理与正气缺乏，气滞、血瘀、水停等有关。治宜行气利水，益气活血，化瘀通络。柴苓归芪汤就是在此法指导下，结合现代中药药理，由柴苓汤治疗NS水肿、蛋白尿的效方和补阳还五汤抗凝、降脂的效方加减化裁而成，旨在从多方位、多靶点治疗NS。本实验中，我们用柴苓归芪汤进展干预性治疗，结果说明:柴苓归芪汤可以有效的增强AN大鼠血清及肾组织SD活性，降低血清及肾组织DA含量，从而进步机体抗氧化才能，减轻脂质过氧化损伤。自由基及其所引发的脂质过氧化反响，在肾脏疾病中发挥着重要作用。在正常情况下，机体内有低分子去除剂如维生素E和复合酶系统如SD，其抗氧化才能与不断产生的氧自由基的氧化才能之

13、间保持着动态平衡，不会引起组织损伤8。假设自由基产生异常增多或肾脏的抗氧化才能下降，出现脂质过氧化反响，将导致肾组织细胞损伤，出现肾小球内皮细胞肿胀，上皮细胞足突交融，肾小球基底膜降解一系列病变9，从而加重蛋白尿。肾病综合征时，过量脂质沉积于肾脏系膜区，内皮细胞、肾小球系膜细胞均能通过活性氧分子修饰低密度脂蛋白，使氧化的低密度脂蛋白X-LDL更具肾毒性。这种过氧化的脂质及其过氧化产物如DA能从多方面加重肾小球硬化和间质纤维化的进程。同时X-LDL能使引起肾损伤的氧自由基增加，形成肾损伤的恶性循环。自由基和不饱和脂肪酸作用而引发脂质过氧化反响，由于脂质过氧化物的形成使膜受体、膜蛋白酶和离子通道的

14、脂质微环境改变，从而也使其功能改变10。DA是脂质过氧化的终产物之一，其生成与脂质过氧化平行，DA的含量可代表脂质过氧化程度，并能从多方面加重肾小球硬化的进程。SD是高效去除剂，可专一去除超氧阴离子，减少DA的形成，维持机体正常生理功能，SD浓度及活性降低必将引起自由基所致的细胞损伤。本实验中，我们不仅对血清SD活性、DA的含量进展了测定，而且对肾组织部分SD的活性、DA的含量进展了定量分析。结果说明:AN大鼠血清及肾组织中SD活性均较正常组明显降低，而DA含量却较正常组升高，提示AN大鼠去除氧自由基才能降低，脂质过氧化可能参与肾脏疾病进展，与国外学者研究结果一致11。柴苓归芪组血清和肾组织SD活性明显升高，而DA含量明显降低，