祖卡木颗粒剂的除杂工艺研究

1、祖卡木颗粒剂的除杂工艺研究【关键词】祖卡木颗粒摘要：目的优选出祖卡木颗粒剂的除杂工艺。方法以总黄酮、总蒽醌、甘草酸的保存率及固形物减少率为考察指标比拟不同除杂工艺超滤法、吸附澄清法、高速离心法、醇沉法及自然沉降法的效果。结果采用高速离心法进展除杂，有效成分保存最多。结论在比照的几种除杂方法中，采用高速离心法有效成分保存最多，而且操作简单，省时。关键词：祖卡木颗粒剂；超滤法；吸附澄清法；高速离心法；醇沉法StudiesnthePurifiatinTehnlgyfZukauGranulesAbstrat:bjetiveTselettheptiupurifiedtehnlgyfZukaugranul

2、es.ethdsThepurifiatinnditinsereptiizedbyntentdeterinatinfttalflavnes，ttalanthraquinne，glyyrrhiziaidandtheyieldfdriedextratparingultrafiltratinethdithabsrbinglarifyingethd，ultraentrifugatinethdandalhlpreipitatinethd.ResultsAllfigurestreatedbyultraentrifugatinethderethehighestangthepurifiedtehnlgies.n

3、lusinTheultraentrifugatinethdisthebestbeausefhighntentpreserved，sipleperatinandsavingtie.Keyrds:ZukauGranules；Ultrafiltratinethd；Absrbinglarifyingethd；Ultraentrifugatinethd；Alhlpreipitatinethd祖卡木颗粒剂是由山萘、睡莲花、大枣、大黄、甘草等药材提取制成，具有调节异常气质、清热、发汗、通窍之成效，用于感冒咳嗽、发热无汗、咽喉肿痛、鼻塞流涕等病症，疗效显著1。由于本品原工艺采用醇沉法除杂，需消耗大量乙醇和时间

4、，为降低本钱，需要寻找一个操作简便、本钱孝省时的除杂方法，同时又能保证药物疗效。本研究比拟了超滤法、吸附澄清法、高速离心法、醇沉法、自然沉降法等几种除杂方法的效果，优选出了祖卡木颗粒剂最正确的除杂方法。1仪器与材料1.1仪器UF80实验型膜别离(超滤)装置，中空纤维膜组件(分子量截流值分别为1万、3万、5万，膜材均为聚砜，天津膜天膜工程技术)；GQ76高速管式别离机(上海市离心机械研究所)；岛津L10ATvp高效液相色谱仪，SPD10Avp紫外可见检测器，LASSvp6.0数据工作站(日本岛津)；UV2501P紫外可见分光光度计(日本岛津)；BS110S型电子天平(德国Sartrius)。1.

5、2材料药材由新疆维吾尔药业有限责任公司提供；芦盯甘草酸单胺盐、1，8二羟基蒽醌对照品均由中国药品生物制品检定所提供；壳聚糖由华东理工大学理学院华凯科技贸易公司提供；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1考察指标确实定2除杂目的是降低出膏率，即增加固形物减少率，并且最大程度地保存有效成分，所以将固形物减少率作为考察指标之一，权重系数定为0.1。因为本制剂为抗感冒制剂，处方中多数药材都含有黄酮类成分，而黄酮类成分具有抗菌、抗病毒、抗炎等作用，故将其成分保存率作为考察指标，权重系数定为0.6；大黄为方中主药之一，含蒽醌类衍生物，具有抗菌、抗病毒、抗炎作用，故将其成分保存率作为考察指标，

6、权重系数定为0.2；甘草中所含的甘草酸具有抗炎、镇咳祛痰及免疫增强作用，故将其成分保存率作为考察指标，权重系数定为0.1。本研究用成分保存率来表示不同除杂工艺对总黄酮、总蒽醌、甘草酸含量的影响，计算公式如下：2.2考察指标的测定方法2.2.1总黄酮的测定方法3采用分光光度法测定总黄酮，即芦丁对照品分别加5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠溶液显色，于510n波长处测定吸收值，得回归方程为：(g)=0.01361+0.8936A，r=0.9998，在0.10451.0445g浓度范围内呈良好线性关系。精细量取一定量样品溶液，同法操作，在510n处测定吸收值，代入回归方程，计算含量。2.2.2

7、总蒽醌的测定方法4采用分光光度法测定总蒽醌，即1，8二羟基蒽醌对照品分别加0.5%醋酸镁甲醇溶液显色，于510n波长处测定吸收值，得回归方程为：(g)=-5.8417+239.3144A，r=0.9981，在47.232283.392g浓度范围内呈良好线性关系。样品溶液加0.5l浓盐酸和30l氯仿，加热回流1h，放冷，分取氯仿层，水层再用氯仿提取3次(20l/次)。合并氯仿层，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5l容量瓶中，并用甲醇稀释至刻度。取此样品溶液同法操作，在510n处测定吸收值，代入回归方程，计算含量。2.2.3甘草酸的测定方法5色谱条件：色谱柱为ShipakLDS柱4.6150，5；

8、流动相为乙腈2%乙酸溶液(4060)；流速1l/in；检测波长254n；柱温30。标准曲线制备：取甘草酸单胺盐对照品约10g，精细称定，置100l量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，精细量取一定体积用甲醇配成系列浓度溶液。精细汲取各溶液10l注入高效液相色谱仪，以甘草酸的峰面积A与甘草酸单胺盐的浓度作直线回归，得回归方程为：(g/l)=-5.9524+1.397010-4A，r=0.9992，在13.52270.40g/l浓度范围内呈良好线性关系。供试品溶液制备及测定：精细量取一定量的样品溶液置10l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，静置24h，离心，取上清液用0.45滤膜过滤。取续滤液10l注入高

9、效液相色谱仪，将测得的峰面积代入回归方程，计算含量。阴性对照溶液的制备及测定：按处方比例，取除去甘草的其它药味，制成模拟空白样品。按前述方法操作，结果在甘草酸的出峰位置处无其它干扰。2.2.4出膏率及固形物减少率测定2精细量取一定体积的样品溶液，置于已枯燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于真空枯燥箱中减压枯燥至恒重，在枯燥器中冷却30in，迅速称重，计算出膏率及固形物减少率。转贴于论文联盟.ll.2.3除杂工艺条件挑选2.3.1提取液(原液)制备按处方比例称取薄荷、洋甘菊、山奈，参加10倍量水，蒸馏法提取挥发油6h，蒸馏后的水溶液滤过，备用；其余甘草等七味，加14倍量水，煎煮3次，1h/次，合并煎

10、液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至一定体积，即得。2.3.2超滤法超滤是根据体系中分子大小和形状，通过膜孔的筛分作用，在分子程度上进展别离，起到别离、纯化、浓缩或脱盐作用。影响超滤的主要因素有分子量截流值和超滤体积6，7，实验采用单因素考察法对这两个因素进展研究。分子量截流值考察：量取一定体积的提取液，倒入储液罐中，连接超滤器进展超滤。控制一定的压力，至超滤液的体积是原体积的1.5倍时，停顿超滤。测定滤液中的各指标，计算综合评分。结果见表1。表1分子量截流值考察分子量截流值略由表1可以看出，经不同分子量截流值的膜超滤后的滤液，其固形物减少率差异不大，但是5万分子量截流值的膜可以保存更多的有

11、效成分，故采用5万分子量截流值的膜进展超滤体积倍数考察。超滤体积倍数考察：用5万分子量截流值的膜进展超滤。控制一定的压力，至规定的超滤体积倍数，停顿超滤。测定滤液中的各指标，计算综合评分。结果见表2。由表2可以看出，虽然3倍超滤体积可以保存更多的有效成分，但是需处理的液体量太大，使后续的浓缩枯燥过程变得很困难，故在实际消费中不实用。表2超滤体积倍数考察超滤体积略2.3.3吸附澄清法近年来出现的吸附澄清工艺因其使用简便、本钱低、有效成分损失少而越来越受到人们的重视。甲壳素类澄清剂资源丰富、制备简单、本钱低、应用方便，而且对人体无毒，体内可生物降解。选用壳聚糖对提取液进展吸附澄清处理，影响吸附澄清

12、效果的主要因素有壳聚糖的参加量和药液浓度8，实验采用单因素考察法对这两个因素进展研究。壳聚糖用量考察：称取一定量的壳聚糖，用1%醋酸溶液配成1%的壳聚糖溶液。量取一定体积的提取液数份，分别浓缩至12(药材重量:浓缩液体积，单位为g/l)，水浴加热至80，参加规定量的壳聚糖溶液，快速搅拌10in，静置24h，观察澄清效果并测定各指标。结果澄清效果都不明显，溶液均不澄清。详细数据见表3。表3壳聚糖用量考察壳聚糖用量略由表3可以看出，不同壳聚糖用量对出膏率影响不大；在5%时可以保存更多的有效成分，应选择5%的用量进展药液浓度考察。药液浓度考察：量取一定体积的提取液数份，分别浓缩至规定量，水浴加热至8

13、0，参加5%的壳聚糖溶液，快速搅拌10in，静置24h，观察澄清效果并测定各指标。结果澄清效果都不明显，溶液均不澄清。详细数据见表4。表4药液浓度考察药液浓度略表4可以看出，不同的药液浓度出膏率变化不大，在16时可以保存更多的有效成分，此药液浓度较合适壳聚糖的澄清处理。2.3.4沉降法自然沉降法：量取一定体积的提取液置500l量筒中，静置48h，取上清液测定各指标。结果见表5。表5沉降法考察结果处理方法略高速离心法：量取一定体积的提取液，经高速管式别离机进展高速离心，转速为20000r/in。考察因素为离心次数，结果见表5。由表5可以看出，自然沉降法和高速离心法的出膏率特别高，但是可以保存更多

14、的有效成分，尤其是高速离心法对于总黄酮、总蒽醌和甘草酸的损失量很校2.3.5醇沉法影响醇沉效果的主要因素有醇沉浓度和药液浓度2，本实验采用单因素考察法对这两个因素进展研究。醇沉浓度的考察：量取一定体积的提取液数份，分别浓缩至12(g/l)，参加规定量的乙醇，使醇沉浓度分别为40%，50%，60%，70%，80%，静置24h，滤过，滤液浓缩至一定体积，测定各指标。结果见表6。表6醇沉浓度考察醇沉浓度略由表6可以看出，醇沉浓度在70%时可以保存较多的有效成分，应选择70%的醇沉浓度进展药液浓度考察。药液浓度考察：量取一定体积的提取液数份，分别浓缩至规定量，参加一定量乙醇，使醇沉浓度为70%，静置2

15、4h，滤过，滤液浓缩至一定体积，测定各指标。结果见表7。表7药液浓度考察药液浓度略由表7可以看出，药液浓度在12与13时都可以较大程度地降低出膏率，并且保存较多的有效成分。3结果分析与讨论将各种除杂方法中优选出的工艺条件对各指标的影响综合列表。见表8。表8优选出的各除杂工艺条件对各指标的影响略超滤法制备的溶液非常澄清，特别适用于制备注射液和口服液，由于本制剂为固体制剂，超滤出的药液体积很大，使后续的浓缩枯燥过程变得很困难，在实际消费中不实用；而且出膏率也较高，有效成分损失较大，其综合评分最低，这可能是由于本研究所用膜的材质聚砜不适用于这几类成分。吸附澄清法制备的溶液不澄清，有效成分损失较小，出

16、膏率也较高，综合评分处于第二位，且操作不如高速离心法简单。高速离心法制备的溶液不澄清，出膏率很高，有效成分损失很小，是保存有效成分的最好方法，综合评分最高，而且操作简单，省时。自然沉降法与高速离心法相比，出膏率一样，但有效成分保存率稍差一些，消耗时间较长，假设工厂内温度较高，药液容易长霉。醇沉法的出膏率低，可以有效降低剂量，但是有效成分的保存率比高速离心法、吸附澄清法低很多；与其它除杂方法相比，醇沉的本钱较高，需要用乙醇，还要回收乙醇，工序复杂。综上所述，采用高速离心法进展除杂，有效成分保存最多，而且操作简单，省时，所以本研究将除杂方法定为高速离心法。参考文献：1帕丽，茹克娅.祖卡木颗粒治疗上呼吸道感染50例的临床观察J.中国民族民间医药杂志，2000，45：205，248.2谢秀琼.中药新制剂开发与应用(第2版).北京：人民卫生出版社，2000：124.3韩莹，张红星.康寿降脂片的工艺研究J.中成药，1998，20(7)：5.4巴根那，包宝柱，白玉霞，等.蒙药方剂顺气汤配伍变化对总蒽醌含量的