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文档简介
1、实验报告专用纸实验一刺激强度、频率对肌肉的影响一、实验目的1掌握蛙类坐骨神经腓肠肌标本的制备方法2.观察组织的兴奋性、刺激与反应的规律以及骨骼肌收缩的特点3观察组织反应与刺激强度之间的关系,从而掌握阈强度、阈刺激、最大刺激等概念,理解动作电位 “全或无”的特点4观察不同刺激频率对骨骼肌收缩的影响,从而了解强直收缩的机制二、实验对象蛙或蟾蜍三、实验器材和药品蛙类手术器械(蛙板、玻璃板、蛙钉、刺蛙针、粗剪刀、组织剪、眼科剪、镊子、玻璃分针、放污 碟和棉线等),任氏液,烧杯,滴管,锌铜弓,双凹夹,铁架台,张力换能器,肌动器(肌槽),生 物信号采集处理系统。四、实验方法与步骤1破坏蛙脑和脊髓 取蛙一只
2、用自来水洗净,一手握蛙,小指和无名指夹住两后肢,用拇指按压背部, 中指放在胸腹部,用食指下压头部前端使头前俯,另一只手持刺蛙针沿枕骨正中线向脊柱端触划, 当触到凹陷处即为枕骨大孔。刺蛙针可由此垂直刺入枕骨大孔,再折向前方插入颅腔并左右搅动, 捣毁脑组织;而后退针至皮下,针尖向右刺入椎管并上下搅动以破坏脊髓。当蛙四肢松软、下颌呼 吸消失、反射消失则表示其脑和脊髓被完全毁坏,否则应重复以上操作。2剪除躯干上部及内脏在蛙骶髂关节水平以上12cm处用粗剪刀剪断脊柱,一手握双后肢,使蛙 的头与内脏自然下垂,一手持粗剪刀,沿两侧将蛙的头、前肢和内脏全部剪除并置于放污碟内,仅 保留蛙的双后肢、腰骶部脊柱及由
3、它发出的坐骨神经丛(呈淡黄色)。3剥离皮肤一手持镊子夹住蛙脊柱端(注意镊子不要触及神经),另一手捏住其上的皮肤边缘,向 下剥掉蛙的皮肤,然后将标本放在盛有任氏液的烧杯中备用。将手及使用过的手术器械洗净,防止 蛙皮肤的分泌物可能对神经肌肉组织造成影响4分离双后肢用镊子从背位夹住脊柱将标本提起,用粗剪刀剪去向上突出的骶尾骨(注意勿损伤坐 骨神经),再沿正中线将脊柱分为两半,并从耻骨联合剪开双后肢,最后将分离的双后肢浸入盛有任 氏液的烧杯中。5游离坐骨神经 取一侧后肢,腹面向上,用蛙钉将其固定在蛙板上,在大腿背侧的半膜肌与股二头 肌之间用玻璃分针分离出坐骨神经。分离时要仔细用剪刀剪断坐骨神经的分支,
4、向上分离至基部, 向下分离至腘窝。保留与坐骨神经相连的一小块脊柱。6剔除肌肉,剪断股骨 将分离出来的坐骨神经搭在腓肠肌上,用组织剪从膝关节周围向上剪除大腿 的所有肌肉,将膝关节上方的股骨刮干净,暴露股骨并在距膝关节上1cm处用粗剪刀剪断。7分离腓肠肌,完成标本在腓肠肌跟腱处穿线结扎,提起结扎线,剪断结扎线后的跟腱,分离腓肠 肌至膝关节处,在膝关节处将小腿除腓肠肌外的其余部分剪断,即制备出一个完整的坐骨神经-腓肠 肌标本。&检查标本的兴奋性 将浸在任氏液的锌铜弓短暂接触坐骨神经,若腓肠肌发生收缩,则表示标本的 兴奋性良好,可放入任氏液中备用。9实验装置及标本安放 将肌动器固定在铁架台的双凹夹上,
5、并与张力换能器平行,然后把标本中预 留的股骨固定在肌动器上,使肌肉处于自然拉长的长度;坐骨神经干放置在肌动器的刺激电极上, 保持神经与刺激电极接触良好。将张力换能器与刺激电极分别连接生物信号采集与处理系统。五、实验结果刺激模式采用单刺激,逐步增大刺激幅度,找到刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度(阈强度) 是0.10V,继续增加刺激强度,观察到肌肉收缩反应相应增大,找到刚能引起肌肉出现最大收缩的最 小刺激强度(最大刺激强度)为刺激模式采用单刺激,逐步增大刺激幅度,找到刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度(阈强度) 是0.10V,继续增加刺激强度,观察到肌肉收缩反应相应增大,找到刚能引起肌肉出现最大
6、收缩的最 小刺激强度(最大刺激强度)为0.25V。选用最大刺激强度刺激,使刺激频率逐渐增加,依次记录得A:1V,H:1时为单收缩,A:1V,H:11时为不 完全强直收缩,A:1V,H:41时为完全强直收缩。六、实验讨论本实验使用的标本蛙坐骨神经干是复合神经干,其中包括有许多根神经纤维,因此其与刺激强 度的关系具有复合神经干的特点。由于组成神经干的神经纤维兴奋性不同,对于不同的强度的刺激, 被兴奋而产生动作电位的神经纤维的数目就会不一样。保持足够的刺激时间不变,刚能引起其中兴 奋性最高的神经纤维产生兴奋,并使其所支配的肌纤维发生收缩的刺激强度即为这些神经纤维的阈 强度,具有此强度的刺激称为阈刺激
7、。随着刺激强度的不断增加,有较多的神经纤维兴奋,肌肉的 收缩幅度也逐渐增大。当神经中全部纤维均产生兴奋,此时肌肉做出最大的收缩幅度,再继续增加 刺激强度,肌肉收缩幅度不再随之增大。将引起肌肉最大收缩幅度的最小强度的刺激称为最大刺激。给神经肌肉标本一个或一连串的有效刺激,可使肌肉出现不同的收缩形式:如果刺激是一个或 者是间隔时间大于肌肉收缩期与舒张期之和的一串刺激,可产生一个或一串互相分开的单收缩;当 刺激频率增加,两个刺激的间隔时间缩短,如果刺激间隔时间大于收缩期而小于收缩期与舒张期之 和时,则后一刺激引起的将落在前一刺激引起的收缩过程的舒张期内,肌肉收缩出现不完全的融合, 即出现不完全强直收缩;如果刺激间隔时间小于收缩期时间,则后一刺激引起的收缩将落在前一刺 激引起收缩期内,肌肉收缩出现完全的融合,
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