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文档简介
1、工程是在*4 分子水平上进行设计和施工,因此又叫做*4 重组技术)工程是在*4 分子水平上进行设计和施工,因此又叫做*4 重组技术)1 页 共 13 断开(水解作用*4(回文原核生物(主要/(/ 具有多个(可被限制酶识别)切点 原核真核:13 (聚合酶形成(缩合形成(缩合 具有多个(可被限制酶识别)切点 原核真核:13 (聚合酶形成(缩合形成(缩合形成重组新*4子链 3 页 共 13 人工化肽链(氨基酸序列)S84序列)序列 人通过 6)8 技术(聚合酶链式反应)胞内(高温破坏氢键 3 页 共 13 人工化肽链(氨基酸序列)S84序列)序列 人通过 6)8 技术(聚合酶链式反应)胞内(高温破坏
2、氢键 :GW(*4聚合酶(聚合酶 *4 两条母链(分别作为酶*4分子半保小大启动子(终止子无有无有 )+ (4 页 共 13 )+ (4 页 共 13 1、一定要死认“同种限制酶”绝不动3、一定要妥妥切在目4、酶切技术只能用来5、一定不能切坏任何标 1、一定要死认“同种限制酶”绝不动3、一定要妥妥切在目4、酶切技术只能用来5、一定不能切坏任何标 5 13 种限制酶所识别的) 限制酶R 和 ( ) 限制酶 、 、 识别的序列都是由 个脱氧核苷酸组成* 限制R和 切出的 种限制酶所识别的) 限制酶R 和 ( ) 限制酶 、 、 识别的序列都是由 个脱氧核苷酸组成* 限制R和 切出的 (R4获得目)
3、目经Bgl切割后形成的黏性末端是【例 ) IU8( 用含) * 用分子杂交方法检测上【例 模拟) ( ) 6 页 共 13 (模拟)6)8)只含有引物 或引物(的两个新 *4 分子中推测第三轮循环产物中含有引物 的) 发性过程中被切断的*4分子内碱基对之间(模拟)6)8)只含有引物 或引物(的两个新 *4 分子中推测第三轮循环产物中含有引物 的) 发性过程中被切断的*4分子内碱基对之间的键【例 (模拟)EcoR、1VT和二者的混合物分别降解一个 HV( HV 即 :HV)正确的是)嗜热土壤芽胞杆菌产生的 葡萄糖苷酶(M()利用大肠杆菌表达 (R( 酶( ) 6)8扩增( )图 为质粒限制酶酶切
4、图谱酶识别序列为使6)8扩增的 (增的丌同限制酶( ) 7 页 共 13 【例 ( 新课标)图(G) 载体上的 8 /的切点是唯一的根(/表达载体利用(H)所示的表达载【例 ( 新课标)图(G) 载体上的 8 /的切点是唯一的根(/表达载体利用(H)所示的表达载体获得了(I)产()4连接酶是将两个( 新课标),外源 到X或 KX中会导致相)的失活X 表示氨苄青霉素抗,X 表示四环素抗用(/酶切后,不(/酶切获得的目混合,加入 *4 连接酶迚行连接反应得到的混合物直接转化大肠杆菌, 结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的、含有质粒载体、含有了目的的重组的
5、细胞也是( 8 页 共 13 构建了 - 所示 构建了 - 所示 ( )的表达载体时,需选择图 中( )经酶切后的载体和 - 种:单个载不载体正向连接、-不载体反向连接(如图 所示)为鉴定这 种连接方式,选择 .VG酶和 (GS酶对筛选得到的载体迚行双酶切,并对酶切后的 行电泳分析,结果如图 所示,图中( ) 将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测 -【例 )6. (总长为 QHQH# 9 页 共 13 ,(最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含 QH 质粒的细胞颜色为;含 Q H 质粒的细胞颜色为( )若 ,(最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含 QH 质粒的细胞颜
6、色为;含 Q H 质粒的细胞颜色为( )若将两段分别用限(/(R切开的单个目V. 中 (S/酶切片段,形成 QH( )上述 QH(IU8 QH QH两种QHQH 两种( )的人(动)植*微生【例 (模拟)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图 、图 中箭头表示相关() 一个图 9SG( ) Sma( ) 用图中的质粒和外源*4构建重组质粒,丌能使用( ) 不只使用 EcoR相比较,使用 BamH和 Hind两种限制酶同时处理质粒、外源 *4的优点在于可以防止10 13 ( ) 现使用 BamH和 .OTJ两种限制酶同时处理质粒、外源*4,粒迚行再次酶切,假设所有的酶均可将识别位点完全切开,请根据图 、 中标示的酶切位点及种段采用EcoR和Hind酶切 得种【例 (模拟) ( ) 现使用 BamH和 .OTJ两种限制酶同时处理质粒、外源*4,粒迚行再次酶切,假设所有的酶均可将识别位点完全切开,请根据图 、 中标示的酶切位点及种段采用EcoR和Hind酶切 得种【例 (模拟)( )( ) 在构建表达载体时,可用一 种 或者多种限制酶迚行切割 该酶的 特( )( )11 13 【例 ( 江苏)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图 、图 中标注了相关限制酶( )【例 ( 江苏)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图 、图 中标注了相关限制酶( )片段,通酶
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