猪场及外围洗消非洲猪瘟采样方法

1、猪场及外围洗消非洲猪瘟釆样方法鼻腔是猪群感染病毒或排毒的主要途径之一，无论在口然感染或者人工 造病的条件下，猪群都可以通过鼻腔带毒和排毒。病毒感染的早期诊断对F猪群 疫病的控制至关重要，因此开展科学、准确及可执行的监测方案势在必行。ASF病毒感染途径的研究发现，鼻腔拭子的检测比血液或其他采样方法 更早出现，同时也具有易采集、可操作性强、对猪群应激较小等优点，从而成为 临床首选。本文参考文献报道结合临床实际情况，对鼻腔拭子采样做一介绍： 第一步准备鼻拭子采样材料：保存缓冲液、封口胶带、一次性注射器、一次性无菌拭子、记号笔。第二步保定猪只，将无菌棉拭子深插入猪只鼻腔内，旋转三次，将拭子放入保存管中

2、，记录猪只信息。第三步用无菌注射器注入2ml拭子保存缓冲液，封口，垂直放置，冷藏保存,48h内尽快送检。猪场内环境的样品采集涉及到固体和液体环境,结合生产实际情况，对猪场内坏 境样本采集做一介绍:固体环境釆样教程步骤一、准备采样材料：保存缓冲液、封口胶带、一次性注射器、一次性无菌轼子、记 号笔。步骤二、用无菌注射器向拭管注入2nd保存缓冲液，先浸润无菌棉拭子。步骤三.固体环境采样点表面呈井字采样（详见视频）,将拭子放入拭管中，记录采样 信息；封口，垂直放置，冷藏保存，48h内尽快送检。二、液体环境采样教程 步骤一、准备采样材料：无菌离心管、一次性无菌吸头、保存缓冲液、封口胶带、一次性注射器、记

3、号笔。步骤二、用无菌注射器向离心管注入4ml保存缓冲液。步骤三、用无菌吸头吸取采样点液体lml置r离心管中（详见视频）。封口，记录釆样 信息，冷藏保存，48h内尽快送检。三.猪场内环境建议采样点猪场内环境涉及的点和面非常多，以下建议采样点涉及的主耍是常见污染区域或者 需关注的采样点，供养殖场参考。1、物资消毒间：物资消毒架、物资进口区域门把手、脚踏区域：2、人员消毒通道：门把手、入口处脚踏区域；3、兽药房：药房门把手、药房冰箱门把；4、工作服：刮取污染的工作服上污染物；5、雨鞋：刮取雨鞋侧面及鞋底的污染物；6、内部转运车辆：轮胎、货仓、司机室、脚踏、方向盘、油门及刹车部位；7、内部运输斗车：轮

4、胎、手推把手：8、饲料加工成品仓出料口：出料口、环境样品、饲料袋：9、猪场内门把手：猪舍及曽医室等建筑门把手；10、道路：猪场内道路、猪舍内道路。以上监测建议频率为一周一次，各养殖场可根据当地疫情压力调整监测频率。猪场内环境采样出猪台是猪场与外界车辆直接接触的部位，如果外面售猪车辆洗消不到位，猪场员工装 猪时，乂没有严格遵循严格的脏净分离原则，直接将场内的猪赶到拉猪车上，就很容易 将洗消不彻底的拉猪车上的病毒（包括ASFv、FMDv、PEDv等）带入生产区，从而使猪 场染上新的疫病，这也是目前猪场最容易出现问题的环节。据调査了解，ASFv通过离猪 场很近的装猪台感染机率有85%的机会。目前疫情

5、紧张，在猪场外建独立的售猪中转站（或转运中心），來避免ASFv的感 染是最实用的办法之一，可以有效的缓冲疫情的威胁。转运中心可以很好避免场内工作 人员与外界拉猪车辆接触，人员即使接触也是场内的周转车，而场内的周转车辆是严格 按要求做好洗消烘干工作再來装猪的，相对來讲全场的生物安全就有了保障，因此转运中心现在变成了规模猪场的必耍设施。转运中心的建设，是猪场生物安全的璽耍一部分，而转运中心的环境是否安全关 乎猪场疫病是否发生，有案例报道，一养殖场在转运中心监测到相关的病原菌，因洗消 工作执行不到位，20天后该病原菌传播到猪场。可见转运中心的洗消工作和环境安全 预警的重要性，洗消工作可采用低圧冲洗、

6、清洁剂打湿浸泡、热水高圧清洗、晾干、消 毒、烘干等步骤执行，环境安全预警可定期通过实验室（按照相关部门规定执行）监测 环境评估。转运中心环境监测包括：外部污区、转运灰区及内部净区三个部分，本文结合实 际情况，对转运中心环境采样做如下预案：一、转运中心采样建议一、采样区域 按划分的三个区域进行采样，包括：外部污区、转运灰区.内部净区。二 采样示意图 1 外部污区选择污区的2个区域，如图所示。选择区域1的左上 角、右下角采样，选择区域2的左下角、右上角采样。 2.转运灰区选择灰区的 2个区域，如图所示。选择区域3的左上角、右下角采样，选择区域4的左下角、右上 角采样。 3.内部净区 选择灰区的2个

7、区域，如图所示。选择区域5的左上角、 右下角采样，选择区域6的左下角、右上角采样。采样示对象及方法釆样对象：所选釆集区域的固体表面.或者环境液体。釆样方法：采用专用动物病毒采样管套装，按净区灰区-污区顺序采样。（1）固体表面：使用棉拭子釆样，采用“井”字形法采样后放入保存管中。（2）液体环境：吸取环境中的液体0. 5-lml,放入保存管中。3.现场监测人员耍依照规 范进行操作，做好现场记录。以上监测频率为一周一次，各转运中心可根据当地疫情压力调整监测频率。转运中心釆样视频在当前非洲猪瘟疫情严峻形势下，猪场需加强生物安全体系建设，切断病原传播 链条。运猪车辆在猪场与猪场之间、猪场与屠宰场之间、猪

8、场与饲料厂之间交义运输的 情况很常见，带來病毒交义传播风险。对丁猪场来说，猪只和饲料的进出都是无法避免的，而负责运输的载体一车辆，是当前交义污染最突出的问题。被外部污染 的车辆与猪场的接触.流通是病毒从猪场外部进入内部的主要途径之一。因此，提高猪 场的“运输安全系数”，使用彻底清洗、消毒和烘干的车辆非常重要。洗消房是洗消中心的第一道防线，车辆经过彻底清洁后，车辆、洗消房内部区域环境及洗 消污水的污染与否，直接反映洗消中心的安全系数。同时，当前建立的洗消中心多为区 域性共用，洗消中心的安全系数关乎是否造成运输车辆的二次污染，是否增加区域内猪 场的安全风险。洗消房的环境监测涉及到车辆.内部区域环境及污水三个部分，根据文献结合实际 情况，对洗消中心-洗消房采样做一建议：一、车辆釆样建议一、采样清单序号釆样区城运猪车饲料畤车头、双侧门（手把）、车尾、车身VV车轮、挡泥板、底盘V43；驶室脚踏板、方向盘、 档位杆、座位V车厢4V/O二.采样示意图（1）示意车头双侧门(手把车尾车身(2)示意(3)示意、洗消房-内部区域环境采样建议一、采样区域选择原则：所选择的采样区域要具有一定的覆盖面，越大越好。 建议：取前、中、后三个区域，具有覆盖面，并贴合实际。二、采样示意图建议选择3个区域进行采样，如图所示，包括：进入洗消间区域A、污水道表而区域 B、洗消间区域C。区域A：