光学检测技术_第1页
光学检测技术_第2页
光学检测技术_第3页
光学检测技术_第4页
光学检测技术_第5页
已阅读5页，还剩8页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、光学检测技术利用物质所具有的各种光学性质，对物质进行定性、定量及结构分析的技术。包括：旋光检测、析光检测、荧光检测、分光光度检测、散射光谱检测等。生化领域常用：分光光度检测、旋光检测、荧光检测一 分光光度检测又称分子吸收光谱检测，是利用物质分子所特有的吸收光谱而对物质进行定性定量测定的检测技术。紫外分光光度检测（200400nm）可见光分光光度检测（400760nm）红外光分光光度检测（76010000nm）1 样品溶液的配备（1）对各种光有选择性吸收特性的物质（2）本身没有颜色的物质，转变为有色的物质溶液2 样品的检测选择好入射光的波长，空白液调零，测定。3 待测物质的定性分析（1）将样品溶

2、液在一定条件下（pH、温度、缓冲液等）测得的吸收光谱与物质的标准吸收光谱相对照，推断样品是什么。（2）根据样品吸收光谱中峰顶与峰谷吸光度之比值，与相当条件下资料所载的比值比较，推断样品是什么。如ATP: OD280/OD260=0.85, OD250/ OD260=0.90AMP: OD250/OD260=0.85, OD280/OD260=0.22(3)将分光光度检测与层析或电泳分离技术相配合，综合判断。4 待测物质的定量分析（1）标准曲线法 注意：对于存在有干扰物质的样品要进行校正。（2）Lambert-Beer E=KCL, K-消光系数二 旋光检测技术利用旋光计测量出旋光物质（光学活性

3、物质）对偏振光旋转角度的方向（左旋或右旋）和大小，从而进行定性与定量分析的技术，称为旋光检测技术。旋光物质对偏振光的旋转方向和角度大小是该物质的固有特性。偏振光旋转的方向和角度称为旋光度。左旋（），右旋（）。物质的旋光度主要取决于物质本身的结构，此外与入射光的波长及温度有关，对溶液而言，还与溶液性质、溶液浓度和溶液厚度有密切关系。溶剂确定后， t LC/100 旋光度 L 溶液厚度（分米）t 比旋光度，通常采用20D L 溶液厚度（分米） C溶液浓度，100mL溶液中所含物质的克数。根据物质的20D 和实际测出的，可计算得到C= 100/ (t L)操作要点：（1）样品液的配制（2）旋光度的测

4、定旋光法测定味精浓度样品溶液配制精确称取味精样品10.00g，加4050mL蒸馏水溶解，搅拌加入分析纯盐酸16mL，使味精全部溶解。冷却至室温，蒸馏水定容至100mL。旋光仪调零预热10min，放进滤光片。取16mL分析纯盐酸蒸馏水定容至100mL。装满旋光管，调整零点。样品液测定样品洗涤旋光管三次，装满旋光管，放进样品室，测定旋光度，记录温度。计算C= 100/ (t L)t320.06（20t)C味=C187.13/147.13味精纯度 C味/样品重量三 荧光检测技术有些物质的分子吸收了一定波长的光（辐射能），分子内电子被激发到较高的能级以后，由于电子旋转或酸离解等消耗一部分能量，当电子返回到低能级状态时，重新放出较长波长的光，这就是荧光。不同物质放射的荧光光谱不同，荧光的强度与物质的浓度有关。检测方法直接

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 信息产业

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论