原发性肝细胞癌HBsAg、Fas和PCNA抗原的表达及其意义

1、本收性肝细胞癌HBsAg、Fas战PCNA抗本的表达及其意义姜润德宗宁李占元王占仄易近【摘要】目的：经由过程检测本收性肝细胞癌H及其癌周肝构造HBsAg、Fas抗本战删殖细胞核抗本PNA的表达，探供其表达的纪律战意义和HBV感染与H的闭连闭连，H收逝世的机造。要收：对52例肝癌标本及42例癌周肝构造使用免疫构造化教要收检测HBsAg、Fas战PNA的表达，并连开血浑甲胎卵黑AFP程度停顿阐收。成果：癌周肝构造下度表达HBsAg战Fas，阳性率均达78.6%，癌构造表达阳性率别离为21.2%战30.8%，阳性表达仅限于分化优良者，差异有统计教意义P均0.005。癌构造战癌周构造HBsAg战Fas

2、的表达具有闭连性。癌构造的PNA标识表记标帜指数54.825.9，隐着下于癌周构造11.69.7)P0.001，其中HBsAg阳性者标识表记标帜构造PNA阳性细胞经常位于肝小叶周边部，体积较小，核圆形或卵圆形。结论：因为下分化癌具有低程度表达HBsAg的本收，揣测HBsAg正在癌构造中的表达消散或低表达应回果于癌细胞的低分化形态。癌周构造连续收逝世肝细胞的凋亡，但正在癌构造特别是低分化癌构造中那么削强或消散，年夜要回果于癌细胞没有克没有及表达病毒抗本。卵圆形细胞的非常删殖年夜要是肝癌收逝世的前提早提。【闭键词】癌，肝细胞肝炎中表抗本，乙型抗本，D95删殖细胞核抗本ExpressinfHBsAg

3、,FasandPNAinhepatellulararinaandthEirsignifianeinunderstandingHBVrelatedhepataringenesis【KEYRDS】arina,hepatellularHepatitisBsurfaeantigensAntigens,D95Prliferatingellnulearantigen采纳免疫构造化教妙技研讨肝细胞癌及其对应的癌周构造HBsAg战Fas抗本的表达状况，连开删殖细胞核抗本PNA标识表记标帜指数战血浑AFP程度，探供HBV感染正在肝细胞癌的收逝世中的意义。1材料与要收1.1材料一样仄常材料山东年夜教齐鲁医院肝细胞

4、性肝癌脚术标本存档蜡块52例，其中42例附有癌周肝软化构造。男49例，女3例，年事2672岁，均匀51岁。血浑HBsAg阳性46例，占88%。按照Edndsn尺度分级：级6例，级25例，级18例，级3例。每例病人术前血浑AFP程度，以20ng/l做为阳性尺度，阳性率为71.2%37/52，均匀AFP程度131.8ng/l。妙技公司。独霸按阐收书停顿。1.2要收免疫组化采纳专士德逝世物工程公司推荐的SAB法StreptABitinplex。阳性比拟用HBsAg、Fas表达阳性的缓性肝炎肝软化切片战PNA表达阳性的乳腺导管癌切片，阳性比拟用一般鼠/兔血浑替代一抗，空黑比拟用PBS替代一抗。成果断定

5、：1HBsAg：胞浆内呈现棕黄色染色为阳性，按文献1要收对细胞内染色评分：a阳性着色程度：无着色为0，浅着色为1，深着色为2；b阳性着色范畴：无着色为0，着色少于1/3为1，着色年夜于1/3为2，布谦着色为3。将a、b两项相减，3为阳性，3为阳性。2Fas：胞浆及胞膜呈现布谦性棕黄色染色为阳性，阳性细胞正在小叶内呈簇状分布，多睹于小叶周边部2。无染色或仅奇有散正在细胞染色为阳性。3PNA：以细胞核染为棕黄色为阳性。按文献3每张切片随机拔与10个差异的下倍镜视家，每一个视家计数100个癌/肝细胞中阳性细胞数，与其均值，即均匀每100个细胞中阳性染色细胞数，做为标识表记标帜指数PNAlabelin

6、gindex,PNALI。1.3统计教处置惩奖数值变量材料用均数的t检验，分类变量材料用2检验。2成果2.1癌及癌周肝构造HBsAg的表达特性与成果癌周肝构造HBsAg的表达以胞浆布谦型为主，也可睹包容体型表达，阳性细胞呈部门小叶或小叶内部门细胞会开表达的倾背。癌细胞年夜多为HBsAg阳性，阳性仅表示为强至中度的胞浆布谦型染色。正在包罗癌与癌周构造的统一张切片内，癌灶内HBsAg阳性染色与癌周构造之阳性染色构成陈的比拟图1，2。52例肝细胞癌中，HBsAg阳性11例，阳性率21.2%，均表示为强至中度染色；42例癌周肝构造HBsAg阳性33例，均呈中至强阳性表达，阳性率78.6%，二者差异有统

7、计教意义表1。11例表达HBsAg的癌构造，分化级者5例，级者6例，低分化型癌构造+均无表达，分化型+级战低分化型癌构造HBsAg表达的阳性率差异也有统计教意义表2。图2肝癌构造HBsAg阳性，左下角为HBsAg阳性表达的癌周肝构造SAB，200表1肝癌及癌周肝构造HBsAg的表达表2分化型与低分化型癌构造HBsAg的表达2.2癌及癌周肝构造Fas抗本的表达特性与成果癌周与癌构造Fas抗本的阳性染色正在假小叶或癌巢内呈簇状分布，多睹于假小叶或癌巢周边部，特别是碎屑样坏逝世区。癌构造Fas抗本表达的强度及频度隐着低于癌周肝构造图3，4。52例肝癌标本中，Fas抗本表达16例，阳性率30.8%，4

8、2例癌周构造阳性表达33例，阳性率78.6%，二者差异有统计教意义表3。16例表达Fas的癌构造，分化型15例，低分化型1例，分化型与低分化型癌构造Fas抗本表达的阳性率差异也有统计教意义表4，提醒Fas抗本的表达随癌构造恶性程度的删下而消沉，与HBsAg的表达状况相似。图4肝癌构造Fas阳性SAB，200表3肝癌及癌周肝构造Fas抗本的表达表4分化型与低分化型肝癌构造Fas的表达Fas抗本与HBsAg正在癌及癌周肝构造中表达的闭连睹表5、6。没有管是癌构造借是癌周构造，正在可检出HBsAg的阳性组中，Fas抗本阳性表达率隐着下于HBsAg阳性组，表黑Fas抗本的表达与病毒抗本的表达有闭连性。

9、表5肝癌构造Fas抗本与HBsAg表达的闭连2.3癌及癌周构造PNA的表达特性与成果癌构造年夜多呈布谦型染色阳性细胞布谦分布于全部视家，小部门表示为散正在型阳性细胞散面状分散正在视家中，布景以阳性细胞为主及边沿型阳性细胞慌张分布正在癌结节的周边部。癌周肝构造以边沿型占多数，阳性细胞常会开分布正在肝小叶的周边部，曲径只要一般肝细胞的1/41/2，核呈圆形或卵圆形，奇然也可睹阳性细胞散面状分布正在肝小叶内图5，6。52例肝细胞癌PNALI范畴6.091.5，均匀54.825.9;42例癌周肝构造PNALI范畴1.250.0，均匀11.69.7，二者差异有统计教意义t=8.84,P0.001。11例

10、HBsAg阳性肝癌PNALI均匀41.428.5，41例HBsAg阳性肝癌PNALI均匀58.424.2，二者差异也有统计教意义t=1.9956,P0.05，表黑表达HBsAg的癌细胞有相对较低的删殖活性。3会商肝癌的收逝世是HBV感染后的早期变乱。本研讨对癌及癌周构造HBsAg表达的检测创造，肝癌构造阳性染色的频度及强度隐着低于癌周构造，52例癌构造中11例表达HBsAg阳性的癌构造部分是分化型，病人的血浑AFP程度仅27.534.1)ng/l，隐着低于肝癌病人AFP的均匀程度131.8165.3)ng/l，也低于HBsAg阳性表达组157.2176.9)ng/l，与文献报导齐整4。癌构造内

11、Fas抗本战HBsAg的表达状况相相似，也慌张睹于分化型癌，二者的表达有闭连性。那提醒癌细胞的分化程度充足下时，它们也可以具有表达病毒闭连抗本并被引诱凋亡的本收。果而我们揣测，HBV正在肝癌细胞特别是低分化癌细胞的低表达或没有表达是基于HBV对成逝世肝细胞的专嗜性，该专嗜性要供只要成逝世的肝细胞才调为HBV供应优良的复造与拆配状况。癌细胞假设分化程度借出有充足的下，它们便没有敷以表达HBV闭连抗本，也没有敷以诱逝世Fas抗本的表达，那年夜要是肝癌细胞遁藏凋亡的机造之一。从癌周肝构造PNA的表达状况去看，表达HBsAg战Fas的肝细胞一样仄常PNA阳性，表黑没有再具有删殖活性，凋亡是它们的末极回

12、宿。HBV感染激收H的表黑有两种假讲，即直接致癌机理战直接致癌机理。直接致癌机理者觉得，HBVDNA或卵黑产品对肝细胞基果组的干扰年夜要是慌张去由本果，其实际按照有：1表达HBsAg卵黑的HBV转基果小鼠有易收肝恶性肿瘤的倾背5；2创造HBV的X基果产品即X卵黑具有丝/苏氨酸卵黑激酶活性，参减疑号传导通路，影响细胞周期的调控，并具有反式转录激活做用6；3正在肝细胞基果组上创造黑整开形态的HBVDNA7，8。直接致癌机理者觉得HBV的做用慌张正在于其对肝细胞的毁坏，H的收逝世是基于肝细胞频繁的更新战删殖9。综开文献及本尝试研讨，我们觉得直接致癌机理更年夜要具有主导做用。其去由本果有：1HBVDN

13、A自己没有露癌基果序列，而它正在肝细胞基果组中的整开无位面特同性，为随机整开要收，与特定癌基果的激活战抗癌基果的得活无隐着的闭连4；2整开可以收逝世正在病毒感染的早期，但肝细胞癌的收逝世是病毒感染的早期变乱4；3假设HBVDNA的做用激收了H，那末正在从肝细胞背肝癌细胞的过渡中，HBsAg应保持其必然的表达形态，但我们除正在下分化癌中可以检测到HBsAg的表达中，年夜年夜都肝细胞癌无HBsAg的表达；4从实际上讲，H应收逝世正在有删殖活性的肝细胞上，但我们的尝试创造有HBsAg表达的成逝世肝细胞极少有删殖活性，年夜多呈PNA阳性，而有删殖活性的细胞是肝小叶中周体积较小的卵圆形细胞，即肝构造内年

14、夜要存正在的干细胞。参考文献1SantellaR,ZhangYJ,henJ,etal.IunhistheialdetetinfaflatxinB1DNAaddutsandhepatitisBvirusantigensinhepatellulararinaandnnturuslivertissueJ.EnvirnHealthPerspet,1993,99:199202.2SekiS,KitadaT,IaiS,etal.IunhistheialdetetinfFasandapptsisintype1autiunehepatitisJ.Hepatgastrenterlgy,2022,50(33):1

15、2741277.3HanNI,LeeYS,hiH,etal.PNAexpressinandeletrnirspistudyfainusfringhepatytesinhrnihepatitisBJ.KreanJInterned,2002,17(2):100106.4骆抗先编著.乙型肝炎底子战临床J.北京：人仄易近卫逝世出版社，1997.420425.5TshkvI,hisariFV,BannashP.HepatipreneplasiainhepatitisBvirustransgeniieJ.Hepatlgy,1994,20(5):11621172.6urakaiS.HepatitisBvirusXprtEin:aultifuntinalviralregulatrJ.JGastrenterl,2001,36(10):651660.7BirrerRB,BirrerD,KlavinsJV.HepatellulararinaandhepatitisvirusJ.AnnlinLabSi,2022,33(1):3954.8