高效液相色谱法测定金钱草颗粒中槲皮素和山奈素的含量

1、高效液相色谱法测定金钱草颗粒中槲皮素和山奈素的含量【关键词】金钱草颗粒；,槲皮素；,山奈素；,含量测定；,高效液相色谱法摘要：目的建立用高效液相色谱(HPL)法测定金钱草颗粒中槲皮素和山奈素含量的方法。方法采用DalianEliteHypersilDS252004.6柱，以甲醇0.4%磷酸溶液4555为流动相；流速：1.0lin1；检测波长为360n。柱温：30。结果该法线性关系良好，槲皮素平均回收率为101.2%，RSD为1.14%；山奈素平均回收率为100.1%，RSD为1.33%。结论该方法简便、准确、重现性好，可用于该制剂的质量控制和评价。关键词：金钱草颗粒；槲皮素；山奈素；含量测定；

2、高效液相色谱法DeterinatinfQueretinandKaepferlinHerbaLysiahiaeGranulesbyHPLAbstrat：bjetiveTestablishanHPLethdfrthedeterinatinfqueretinandkaepferlinHerbaLysiahiaeGranules.ethdsDalianEliteHypersilDS252004.6lunasused.Thebilephaseasethanl-0.4%phsphriaidslutin(4555).Theflrateas1.0lin1；Thedetetinavelengthas360n；T

3、helunteperatureas30.ResultsThelinearrelatinasgd.Theaveragereveryfqueretinas101.2%ithRSD=1.14%；Theaveragereveryfkaeferlas100.1%ithRSDas1.33%.nlusinTheethdissiple,aurateandithagdreprduibilityandanbeusedfrthequalityntrlfthegranules.Keyrds：HerbaLysiahiaeGranules；Queretin；Kaepferl；Deterinati；HPL金钱草颗粒为单味药

4、制剂，具有清利湿热，通淋消肿的成效。用于热淋，沙淋，尿涩作痛，黄疸尿赤，痈肿疔疮，毒蛇咬伤，肝胆结石，尿路结石等症的治疗。所含的槲皮素和山奈素为主要有效成分。本方收载于?国家中成药标准汇编?中成药地方标准上升国家标准局部内科、肝胆分册标准中无含量测定方法，不利于制剂的质量控制。本文参考有关文献1,2，采用HPL法测定金钱草颗粒中槲皮素和山奈素的含量，别离度好，回收率高，能有效控制金钱草颗粒的含量。1仪器与试药1.1仪器美国aters1525高效液相色谱仪、2487双波长紫外检测器，Breeze色谱工作站，AY120电子天平日本岛津公司，AB265S电子天平日本岛津公司。1.2试药槲皮素对照品购

5、自中国药品生物制品检定所，批号100081202206，含量97.3%,120枯燥4h后使用；山奈素对照品购自中国药品生物制品检定所，批号：110861202204,样品由重庆某药厂提供批号：040509，040603，040401；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1对照品溶液的制备精细称取120枯燥4h的槲皮素对照品10.41g，置100l容量瓶中，加80%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每毫升含槲皮素101.2893g。精细称取山奈素对照品10.25g，置100l容量瓶中，加80%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每毫升含山奈素102.5g。作为对照品储藏液。

6、2.2样品溶液的制备取本品10袋的内容物，混匀，研细，精细称取1g，置锥形瓶中，精细加80%甲醇50l，称定重量，超声30in，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，滤过，精细量取续滤液25l，精细参加盐酸5l，置90水浴中加热水解1h，取出，迅速冷却，转移置50l容量瓶中，用80%甲醇稀释置刻度，摇匀，即得。转贴于论文联盟.ll.2.3色谱条件与系统适应性实验采用十八烷基硅烷键合硅胶填充色谱柱；以甲醇0.4%磷酸溶液4555为流动相；流速1.0lin1；检测波长为360n。理论板数以槲皮素峰计算大于6000，主峰与相邻杂质峰之间的别离度大于1.5。结果见图1。2.4线性关系考察分别精

7、细汲取槲皮素对照品储藏液1.0l，分别置10，25，50，100，200l容量瓶中，各精细参加山奈素对照品储藏液5.0l，加80%甲醇稀释至刻度，摇匀，制成系列混合对照品溶液。按上述色谱条件分别进样测定，以峰面积积分值A为纵坐标，以槲皮素和山奈素的浓度gl1为横坐标，其标准曲线回归方程和线性范围结果见表1。表1各组分的回归方程和线性范围回归方程略2.5精细度实验精细量取上述对照品溶液10l，重复进样5次，按上述色谱条件测定，槲皮素和山奈素峰面积积分值的RSD分别为0.50%和0.61%。2.6重复性实验分别取同一批号批号：040509样品各5份，照2.2样品溶液的制备和测定方法进展测定，结果槲

8、皮素的平均含量为0.042%，RSD为1.02%，山奈素的平均含量为0.168%RSD为0.52%。2.7稳定性实验取同一批号的供试品溶液批号：040509，每隔2h进样1次10l，共进样6次，按上述色谱条件分别测定，结果槲皮素和山奈素的RSD分别为1.24%和1.55%，说明供试品溶液在12h内稳定。2.8空白实验按处方比例及工艺，制备缺金钱草的阴性制剂，再按供试品溶液制备方法制备不含金钱草的阴性对照品溶液，进样10l测定。结果阴性对照品溶液分别在与槲皮素和山奈素对照品一样保存时间位置未见有一样保存时间的吸收，说明辅料对本方法测定槲皮素和山奈素的含量无干扰。见图谱1-。2.9加样回收率实验取

9、含量的样品批号：040509内容物适量，精细称定，分别精细参加槲皮素对照品溶液101.2893gl12.0l和山奈素对照品溶液10.0l，按照供试品溶液制备项下的方法制备，依法测定，计算回收率。结果见表23。表2槲皮素回收率测定结果略表3山奈素回收率测定结果样品重略2.10样品测定取3批样品，按上述测定方法进展测定，以外标峰面积法计算样品的含量，结果见表4。表4样品含量测定结果略3讨论3.1本实验样品溶液的制备是参照?中国药典?2022年版部金钱草含量测定项下供试品溶液制备的方法，因本样品为颗粒剂，因此把回流1h改为超声30in，经试验证明该法提取效果较好，干扰成分较少。3.2试验中以文献1提供的色谱条件为根底，改变流动相的比例，通过试验探索，金钱草颗粒中各组分可以实现较好的别离，证明该条件合适金钱草颗粒的含量测定。3.3本文建立的方法