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文档简介
1、背景知识:用于治疗病毒感染和癌症的干扰素是从动物体内提取的 ,在体外很难保存。?改造背景知识:用于治疗病毒感染和癌症的干扰素是从动物体内提取的 ,在体外很难保存。?蛋白质工程概述 通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构和功能,并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和基因重组DNA技术改造基因,以定向改造天然蛋白质,甚至创造自然界不存在的蛋白质的技术前提途径目的了解蛋白质的结构和功能计算机辅助设计、基因定点诱变和基因重组DNA技术定向改造或制造蛋白质一、蛋白质工程的基本原理基因DNA氨基酸序列多肽链蛋白质三维结构预期功能生物功能mRNA转录翻译折叠DNA合成分子设计X射线衍射仪核磁共振法基因的
2、定点诱变技术(是改变蛋白质结构的核心技术之一)氨基酸序列预期功能根据蛋白质被改造部位的多少,可以将对蛋白质的改造分成在蛋白质分子中改变某一个 或一个特定的结构域。目的:途径:方法:小改:中改:大改:设计并制造出自然界中不存在的全新蛋白质,使之具有特定的_、空间结构和_。肽段改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸残基改善蛋白质的性质和功能。项目定点诱变技术条件操作方法结果适用范围原料脱氧核苷酸 酶DNA聚合酶和DNA连接酶引物含突变顺序的DNA分子片段空间结构完全清楚的蛋白质后代中半数为诱变的DNA分子PCR 基因工程蛋白质工程的应用蛋白质工程的应用(1)改变酶的结构,提高酶的热稳定性替换酶的几种 ;在蛋白质分子中引入 ;氨基酸二硫键(2)生物工程制药例1:t-PA的天冬酰胺替换为谷氨酰胺可变区恒定区鼠抗体人抗体嵌合抗体减少了鼠源成分,降低了鼠源性抗体引起的不良反应,而抗体特异识别功能没有丧失。优点例2:嵌合抗体(3)疾病诊断蛋白质芯片抗原-抗体特异性结合原理项目基因工程蛋白质工程过程结果联系获取目的基因构建基因表达载体导入目的基因检测和鉴定目的基因预期蛋白质功能设计蛋白质结构推测氨基酸序列推测核苷酸序列合成DNA 表达出蛋白质生产自然界中已有的蛋白质
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