精氨酸加压素及其受体对大鼠心肌成纤维细胞iNOS

1、精氨酸加压素及其受体对大鼠心肌成纤维细胞iNOS【关键词】精氨InfluenesfargininevaspressinanditsreeptrsniNSNsysteativityinardiafibrblasts【Abstrat】AI:Texplretheinfluenesfargininevaspressin(AVP)anditsreeptrsninduiblenitrixidesynthasenitrixide(iNSN)systeativityinardiafibrblasts(Fs).ETHDS:AfterFsereislatedandultured,nitriaidredutasee

2、thd,spetrphtetryandRTPRereusedtdetetthehangesfiNSNsysteativityinduedbyAVPanditsreeptrs.RESULTS:AVPsignifiantlyenhanedFsiNSNsysteativity.V1reeptrantagnistinhibitediNSNsysteativityinanentratindependentannerand110-7l/LV1reeptrantagnistdereasediNSNsysteativitytthentrllevel.V1reeptrantagnistandV1+V2reept

3、rantagnisthadthesaeeffetsniNSNsysteativity.NLUSIN:V1reeptrantagnistediatediNSNsysteativityinreasesinAVPinduedFs.V1reeptrantagnistaybeanetargetinthepreventinandreversinfardiaredeling.【Keyrds】ardiafibrblasts;argininevaspressin;argininevaspressinreeptrs;nitrixide【摘要】目的：探究精氨酸加压素(AVP)及其受体对大鼠心肌成纤维细胞(Fs)诱导

4、型一氧化氮合酶一氧化氮(iNSN)体系活性的影响.要领：分散造就SD仔鼠Fs，接纳硝酸复原酶法、分光光度法和RTPR不雅察AVP及其受体拮抗剂对FsiNSN体系活性的影响.效果:AVP明显进步FsiNSN体系活性.V1受体拮抗剂呈剂量依靠性地按捺AVP的这一作用，此中110-7l/LV1受体拮抗剂可将AVP诱导下Fs的iNSN体系活性按捺到底子状态程度.V1+V2受体拮抗剂具有与V1受体拮抗剂相似的作用.结论：AVP干预下FsiNSN体系活性加强由V1受体介导，V1受体可望成为阻断或逆转心脏重构的新靶点.【关键词】心肌成纤维细胞；精氨酸加压素；精氨酸加压素受体；一氧化氮0弁言心肌成纤维细胞(a

5、rdiafibrblasts,Fs)过分增殖和胶原合身排泄过多是心脏重构的紧张病理底子，一氧化氮(N)可通过按捺Fs过分增殖和胶原合身排泄过多按捺心脏重构1-2.精氨酸加压素(argininevaspressin,AVP)可以或许诱导Fs诱导型一氧化氮合酶一氧化氮(iNSN)体系活性增长3，N合成增多.但AVP怎样将这种细胞外信息通报至细胞内，如今尚不明晰.心肌构造有AVP受体表达，AVP受体分为V1和V2两种范例4.AVP干预下FsiNSN体系活性增长由哪一种受体介导尚少见报道.我们用AVP受体拮抗剂干预AVP诱导下的Fs，不雅察其对FsiNSN体系活性的影响，以相识AVP诱导FsiNSN体

6、系活性增长的信息通报途径，为防治心脏重构提供新的思绪.1质料和要领1.1质料实行用SD仔鼠(出生13d,第四军医大学动物中央)；AVP(美国PeninsularLab)；V1受体拮抗剂、V1+V2受体拮抗剂(Siga公司)；N含量和NS活性测定试剂盒(南京建成生物技能研究所)；TRIZL裂解液、lig(dT)，LV反转录酶(Prega公司)；TaqDNA聚合酶(宝生物公司)；PR引物由上海生物工程公司合成.1.2要领统计学处置惩罚：数据以xs表现，应用SPSS统计软件对资料进阐发.多组均数比力接纳F查验，组间比力接纳LSD法，P0.05表现差异有统计学意义.2效果2.1AVP及其V1受体拮抗剂

7、对FsNS活性和N含量的影响比较组Fs具有NS活性，可以或许合成N.AVP干预下FsNS活性明显加强，N含量明显增高(P0.05).V1受体拮抗剂呈剂量依靠性地按捺Fs的NS活性和N含量，此中110-7l/LV1受体拮抗剂可将AVP诱导下Fs的NS活性和N含量按捺到与比较组相近程度(P0.05,图1A,B).2.2AVP及其V1受体拮抗剂对FsiNSRNA表达的影响比较组Fs有iNSRNA表达(0.250.04).AVP干预下FsiNSRNA表达明显加强(0.700.03,P0.05).V1受体拮抗剂呈剂量依靠性地按捺FsiNSRNA表达(110-9l/L：0.610.10;110-8l/L：

8、0.490.10;110-7l/L：0.310.05).此中110-7l/LV1受体拮抗剂可将AVP诱导下Fs的iNSRNA表达按捺到与比较组相近程度(P0.05,图2).3讨论AVP是下丘脑排泄的九肽神经内排泄激素，机体很多构造细胞膜上都有AVP特异性受体存在.AVP通过与其特异性受体结合，激活差异的细胞内信号通报体系，发挥差异的生物效应.按照AVP受体后信号通报的第二信使体系差异，将AVP受体分为V1(第二信使为卵白激酶)和V2(第二信使为卵白激酶A)两种范例5，V1和V2受体都有本身特异性的受体拮抗剂.AVP受体拮抗剂是研究AVP生理作用的有用药理东西，心肌构造中有V1，V2两种AVP受

9、体表达6，AVP应该通过其受体作用改变FsiNSN体系活性.我们接纳AVP受体拮抗剂干预AVP诱导下的Fs，效果创造：底子状态下Fs有iNSRNA表达，具有NS活性，可以或许合成必然量的N.110-7l/LAVP明显进步FsiNSRNA表达，加强NS活性，增长N合成；V1受体拮抗剂呈剂量依靠性地按捺AVP对FsiNSN体系活性的进步作用，此中110-7l/LV1受体拮抗剂可将AVP对FsiNSN体系活性的进步作用按捺到与底子状态相近；V1+V2受体拮抗剂和V1受体拮抗剂对FsiNSN体系活性的按捺作用相似，说明AVP对FsiNSN体系活性的进步作用重要由V1受体介导.心脏重构导致心肌紧缩力落落

10、、舒张成效减退和心电紊乱，是心力衰竭、心律变态和心性猝死产生的紧张环节7.AVP干预下FsN合成增长具有紧张的病理生理意义.比年研究创造心脏构造自身可以或许合成AVP8，在心肌梗死、高血压性心脏并心力衰竭等临床病理环境下，心肌构造中AVP含量明显增高9，AVP含量增高可以或许诱导FsN合成增长，N合成增长按捺了上述病理环境下Fs非常增殖和胶原合身排泄过多，从而按捺心脏重构.因此，AVP干预下FsN合成增长是心脏构造自身对病理性损伤的一种自我庇护机制.我们的实行证明V1受体介导了AVP干预下FsiNSN体系活性进步的调治，提示V1受体有大概成为以后阻断或逆转心肌纤维化的一个新的作用靶点.【参考文

11、献】1eberKT.AhisperntheindspansastrJ.ardivasRes,2000,46(2):211-213.2RssiA,RasSG,Prad.hrniinhibitinfnitrixidesynthaseindueshypertensinandardiyyteithndrialandyardialllagenredellingintheabsenefhypertrphyJ.JHypertens,2022,21(5):993-1001.3范延红，赵连友，杨学东，等.核因子B在精氨酸血管升压素诱导大鼠心肌成纤维细胞一氧化氮合成中的作用J.生理学报,2022,55(4):41

12、7-421.4KaygisizZ,KabadereTE,DernekS,etal.TheeffetsfvaspressininislatedratheartsJ.IndianJPhysilPharal,2001,45(1):54-62.5hatterjeeK.NeurhrnalativatininngestiveheartfailureandtherlefvaspressinJ.AJardil,2022,95(9A):8B-13B.6Thibnnier.VaspressinreeptrantagnistsinheartfailureJ.urrpinPharal,2022,3(6):683-687.7eberKT.ardireparatininhypertensiveheartdiseaseJ.Hypertensin,2001,38(3Pt2):588-591.8LuL,angJ,YaT.hangesinvaspressinV1reeptrRNAlevelinratsithhig