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文档简介
1、 布洛芬在小鼠体内的分布1课前准备取小鼠2只,称重,编号。2号用20布洛芬灌胃0.1ml/10g。3号用20布洛芬灌胃0.1ml/10g。计时2实验目的掌握测定药物分布的方法和临床意义。了解药物在体内的分布动力学规律。3相关知识药物分布药物分布的概念:药物从血液向组织、细胞间液和细胞内液转运的过程。药物分布影响因素:血浆蛋白结合率器官血流量组织细胞结合体液pH和药物解离度体内屏障血脑屏障、胎盘屏障和血眼屏障4小鼠灌胃给予同等剂量的布洛芬溶液后,在不同时间点测量血液、脑、肾、肝中布洛芬的浓度,绘出不同时点的布洛芬的组织分布图。测量血液、肝中布洛芬浓度采用比色法。实验原理5实验步骤1标准管的制备:
2、0.00125%布洛芬溶液6取小鼠3只(已禁食12h),称重,编号。1号用生理盐水灌胃0.1ml/10g,立即断头取血摇匀。2号用20布洛芬灌胃0.1ml/10g,30min断头取血摇匀。3号用20布洛芬灌胃0.1ml/10g,60min断头取血摇匀。取离心管3支编号,分别于1管(对照)、2管(给药30min)和3管(给药60min)内加肝素0.1ml,断头取血,立即摇匀。分别从3支管中取抗凝血各0.5ml加入已预加无水乙醇4.5ml试管中,摇匀。称取各小鼠300mg肝组织,分别置于研磨器中,加无水乙醇(0.4ml/100mg)研碎后再加入无水乙醇(0.5ml/100mg) 摇匀,制成匀浆后全
3、部倾入试管中。实验步骤27实验步骤38实验步骤4将对照鼠和各给药鼠的血及组织匀浆离心5min(3500转/分),分别取上清液3.0ml放入比色杯中(稀释)如果液体太浓,可用蒸馏水按比例稀释,得到的光密度值乘以稀释倍数即实际光密度值。9实验步骤5用分光光度计在222nm波长下以对照鼠样品管作空白管,测定各用药样品管的光密度值,代入到公式换算出血药浓度(g/ml)和组织药物浓度(g/g)。 血药浓度(g/ml) = 样品管浓度稀释倍数(10)组织内浓度(g/g) = 样品管浓度稀释倍数(10)10实验后处理利用计算机绘制给药后血液和肝脏组织中的药物分布图。 11注意事项取血:每次的取血量要准确 血样加至无水乙醇试管应该立即摇匀匀浆:匀浆器上的数字应对应 组织匀浆后应立即离心 匀浆器应清洗干净离心:离心前一定要用水配平, 离心管不要弄混 离心后将转速和时间归零吸管要干净
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