动物细胞工程

1、动物细胞工程课件 第1页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一 救治烧伤病人的有效方法是取其自身皮肤进行自体移植(若用他人的皮肤呢?_.),但这对大面积烧伤者来说做不到,有什么办法获取大量的自体皮肤吗? -将自身皮肤的细胞培养成皮肤!-这叫“动物细胞培养”.第2页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一动物细胞培养-查书P44-45回答上述问题.1.什么叫动物细胞培养?2.动物细胞培养的操作过程是怎样的?第3页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一什么叫动物细胞培养： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放

2、在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖(即分裂).提示:人造皮肤第4页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一幼龄动物取动物器官和组织(如肝脏)剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞的培养过程(简要)细胞贴着瓶壁生长第5页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一动物细胞生长特性细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 第6页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一细

3、胞贴壁过程第7页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一动物细胞培养过程(详细):细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变(癌变) 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹 性纤维）动物胚胎或幼龄动物的组织、器官第8页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？.既然胰蛋白酶能将细胞

4、消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？进一步思考：否 胰蛋白酶水解蛋白质蛋白质蛋白质和磷脂能注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近第9页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一1.无菌无毒的环境2.营养3.温度和pH4.气体环境动物细胞培养的条件: -课本P46.第10页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一那么动物细胞培养有何用处? -查书P4647.生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）检测有毒物质用于某些器官移植药理

5、研究动物细胞培养应用:第11页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分培养目的细胞的全能性细胞增殖蔗糖 植物激素葡萄糖 动物血清快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞或细胞分泌蛋白等第12页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一2、动物细胞工程技术的基础是 -（ ） A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养D课堂反馈练习1、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（ ）A动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白B动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散C细胞

6、遗传物质的改变发生于原代培养过程中D培养至50代后继续传代的细胞是细胞株B第13页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ）A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强D4、下列属于动物细胞工程中的工具是（ ） A限制性内切酶 BDNA连接酶 C胰蛋白酶 D果胶酶C第14页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一昨日黄花-克隆羊“多莉”又是啥来历呢?它是由一个动物细胞培养而来吗? -查书P47-48.“动物体细胞核移植和克

7、隆动物”的文、图.第15页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一克隆羊培育过程:黑面绵羊去核卵细胞白面绵羊乳腺细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激早期胚胎胚胎移植另一头绵羊的子宫妊娠、出生克隆羊多利核移植技术第16页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一供体细胞培养（M卵母细胞）减数第二次分裂中期去核的卵母细胞供体细胞注入去核卵母细胞受体细胞激活，完成减数分裂、发育胚胎移植第17页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一思考:1.用动物细胞克隆动物实际上是通过_技术实现的( ).2. 在动物体细胞核移植技术中,提供细胞核(供体细胞)的是优良动物

8、的_(选:体细胞;生殖细胞),接受细胞核(受体细胞)的是另一动物的_细胞(此前应将该细胞的细胞核_). 受体细胞为什么选用卵母细胞(实为减数第二次中期的次级卵母细胞M期)?_. 细胞核移植卵母还有胚胎移植技术具有较好的发育潜力(能分裂分化;细胞内营养丰富).体去核第18页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一体细胞核移植技术的应用前景：加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育保护濒危物种生产医用蛋白异种移植的供体存在的问题：成功率低；克隆动物食品的安全性问题也有争议第19页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一动物细胞融合 与 单克隆抗体第20页，共30页，2

9、022年，5月20日，21点10分，星期一思考与提示细胞融合是常见的正常的生命活动,如:两个细胞正在融合 受精作用细胞融合的内在原因是:_细胞膜的流动性.第21页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一1.过程：动物细胞A动物细胞B诱导，融合完整的杂交细胞AB有丝分裂（膜融合、质融合）（核融合）注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞（一）动物细胞融合第22页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一（一）动物细胞融合1.过程：诱导方式物理法化学法生物法：灭活的病毒仙台病毒紫外线丧失感染性（不感染细胞）保留融合活性（诱

10、导细胞融合）第23页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一1.过程：灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的流动性）特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体第24页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一思考回答:1.看左图说出制备过程。2.需要筛选几次，作用分别是什么。第25页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一思考与提示:单克隆抗体制备过程: 注射抗原(即免疫小鼠)B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合;筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养大量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养 或注射到小鼠腹腔

11、单克隆抗体2.为何要给小鼠注射抗原(即免疫)?_. 为何要选用骨髓瘤细胞?_.3.杂交瘤细胞的遗传组成包括:_;功能特点:_.两细胞的遗传物质既能产生特异性抗体又能无限分裂(大量快速繁殖)第26页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一4.在单克隆抗体制备过程中,要运用_培养基对进行融合的细胞进行筛选(第一次筛选),目的是保留_.第二次筛选是为了除去_的杂交瘤细胞而保留能产生特异抗体的杂交瘤细胞不能产生特异抗体选择杂交瘤细胞 单-指单个的B细胞(即和骨髓瘤细胞杂交的那一个B细胞); 克隆-指骨髓瘤细胞的大量快速的分裂. 单克隆抗体特点：特异性强、灵敏度高、大量繁殖第27页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一单克隆抗体的应用. -查书P54.思考: 单克隆抗体能被用作诊断试剂和生物导弹的原理都是_.抗原抗体的特异性结合(反应)第28页，共30页，2022年，5月20日，21点10分，星期一植物体细胞杂交和动物细胞融合比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理诱导方法用途细胞膜