胃癌中Cks1、p27Kip1和Skp2蛋白的表达

1、胃癌中Cks1、p27Kip1和Skp2卵白的表达赵勇，高建飞，饶智国，欧武陵，朱宇泽，杜光祖【摘要】目的探究ks1在胃癌产生及其在Skp2调治p27Kip1落解历程中的作用。要领应用流式细胞术测定正常胃粘膜和胃癌构造中ks1、p27Kip1、Skp2卵白表达。效果胃癌构造中ks1、Skp2表达显着高于正常胃粘膜2=22.69，0.05；2=13.42,P0.05，而p27Kip1表达那么低于正常胃粘膜2=14.83,P0.05。胃癌中ks1、Skp2表达与p27Kip1表达呈负相干r=-0.649，P0.05；r=-0.732，P0.05；而ks1卵白表达与Skp2卵白缺乏相干性P0.05)

2、。胃癌中ks1的表达与肿瘤分化程度相干2=5.05,P0.05，而与肿瘤浸润深度、淋逢迎转移及临床分期不相干P0.05。结论ks1大概到场了胃癌的产生；胃癌中ks1大概到场了Skp2调治p27Kip1泛素化落解历程。【关键词】胃肿瘤；ks1卵白；Skp2卵白；p27Kip1卵白1质料与要领1.1质料与试剂猎取手术切除、经临床、病理证明的64例胃癌标本及20例正常胃粘膜构造。全部标本术前均未行放疗、化疗或免疫治疗。胃癌患者中，男34例，女30例；年事2278岁，均匀年事54.7岁。TN分期：期12例，期23例，期19例，期10例。分化程度：高分化17例，中分化19例，低分化18例，未分化10例。

3、癌转移环境：淋逢迎转移31例，无淋逢迎转移33例；远处转移10例，无远处转移54例。胃壁浸润深度：浸润未凌驾浆膜层T1T232例，浸润凌驾浆膜层T3T432例。ks1兔抗人单克隆抗体及Skp2鼠抗人单克隆抗体购自美国ZYED公司，p27Kip1鼠抗人单克隆抗体购自丹麦DAK公司。1.2要领手术切除的奇怪构造，取无出血区部门构造块，PBS洗净血迹，机器破裂法制成单细胞悬液。将细胞悬液0.5l参加两只小试管，PBS液洗涤一次，离心，弃上清，试管内参加兔抗人ks1或p27Kip1、Skp2荧光多克隆抗体10l，比较试管参加PBS，混匀，4孵育30in，PBS洗涤一次，离心，扫除多余未结合抗体后上机检

4、测。每1标本检测10000个细胞。ks1或p27Kip1、Skp2阳性率=试管中ks1或p27Kip1、Skp2阳性细胞数阴性比较阳性细胞数/10000100%。设阳性率10%为阳性表达，阳性率30%为高表达1。2效果2.1ks1、p27Kip1、Skp2的表达胃癌构造中ks1、Skp2阳性率显着高于正常胃粘膜构造(2=22.69,P0.05；2=13.42,P0.05)，而p27Kip1阳性率那么低于正常胃粘膜构造(2=14.83,P0.05),见表1。表1ks1、p27Kip1、Skp2在差异胃构造标本中的表达注：组间比力P0.05胃癌构造中ks1表达与癌构造分化程度相干，低、未分化组ks

5、1表达阳性率显着高于高、中分化组(2=5.05,P0.05)，而与胃癌患者年事、性别、肿瘤浸润深度、淋逢迎转移和临床分期不相干(P0.05,见表2。2.2胃癌中ks1表达与Skp2、p27Kip1的关联性64例胃癌构造按照ks1、Skp2卵白表达环境分为三组：ks1、Skp2同时高表达21例；ks1、Skp2同时低表达27例；ks1高表达、Skp2低表达或ks1低表达、Skp2高表达16例。21例ks1、Skp2同时高表达者18例p27Kip1低表达；27例ks1、Skp2同时低表达者23例p27Kip1高表达。胃癌构造中ks1、Skp2表达均与p27Kip1卵白表达负相干r=-0.649,r

6、=-0.732，P0.05，但有6例Skp2卵白与p27Kip1卵白同时高表达，4例Skp2卵白与p27Kip1卵白同时低表达；而ks1卵白表达与Skp2卵白缺乏相干性(P0.05)。3讨论本研究表现胃癌构造中Skp2表达显着高于正表2胃癌中ks1表达与临床病理因素的干系(%)种别例数ks1P年事岁603574.3(26/35)602972.4(21/29)P0.05性别男3473.5(25/34)女3073.3(22/30)P0.05分化程度高中分化3661.1(22/36)低未分化2889.3(25/28)P0.05侵袭深度T1T23271.2(23/32)T3T43275.0(24/32

7、)P0.05淋逢迎转移有3177.4(24/31)无3369.7(23/33)P0.05临床分期+3568.6(24/35)+2979.3(24/35)P0.05组间比力P0.05,2=5.05,P0.05常胃粘膜，而p27Kip1表达那么低于正常胃粘膜；胃癌构造中Skp2卵白与p27Kip1卵白负相干。这一效果支持p27Kip1、Skp2到场了胃癌的产生及Skp2到场了p27Kip1泛素化落解历程的推论。但本实行还创造10例Skp2，p27Kip1同时高表达或Skp2，p27Kip1同时低表达。Den等2创造50%的宫颈癌构造中p27Kip1，Skp2同时高表达或低表达。HaraT3等创造在

8、缺乏Skp2的胞浆内，仍可检测到p27Kip1的泛素化运动，说明细胞浆内大概存在p27Kip1其他泛素化历程。Sitry等4研究表白，无论在体内或体外，Skp2只有结合ks1后才气识别p27Kip1举行泛素化卵白落解。本研究创造ks1、Skp2同时高表达者p27Kip1低表达；ks1、Skp2同时低表达者p27Kip1高表达，ks1、Skp2表达均与p27Kip1卵白表达负相干，这说明ks1、Skp2大概配合到场了p27Kip1的泛素化落解历程。Kitajia等5创造将ks1、Skp2单独转染细胞时ks1并不克不及使p27Kip1的程度落落，而ks1、Skp2同时转染细胞可致p27Kip1落解，通过siRNA按捺ks1的表达可使p27Kip1表达增长，并可按捺肿瘤细胞生长。而asuda等6研究创造ks1、Skp2同时转染细胞并不使p27Kip1RNA程度低落，而是低落了p27Kip1卵白程度，这再次证明白ks1、Skp2大概配合到场了p27Kip1卵白的泛素化落解历程。本研究创造胃癌构造中ks1表达显着高于正常胃粘膜，ks1的表达与肿瘤分化程度相干，这说明ks1大概到场了胃癌的产生，ks1卵白表达增多，使得胃癌细胞分开了原有的正常生长周期调控，呈无控制生长状态，ks1表达越多，细胞分化程度