中药补肾方剂对大鼠骨肉瘤细胞增殖及相关酶活性的影响

1、中药补肾方剂对大鼠骨肉瘤细胞增殖及相关酶活性的影响【关键词】中药EffetfhineseediineBushenreipenprliferatinandprtEinkinaseativityinratsteblastlikeellsinvitr【Keyrds】bushenreipe;steblastlikeell;ellprliferatin;prteinkinase【摘要】目的：讨论中药补肾方剂对成骨样细胞UR106增殖及相关蛋白激酶活性的影响.方法：用不同剂量的中药补肾方剂与成骨样细胞UR106共同培养，以TT法检测细胞的增殖，用32PATP参入反响底物中的摩尔数表示蛋白激酶的活性.结果：

2、该中药补肾方剂在110-1110-5g/L浓度范围均能增加成骨样细胞增殖P0.05或P0.01，110-4g/L浓度处理细胞可使酪氨酸蛋白激酶TPK和蛋白激酶PK活性分别增高44.8%和95.1%.结论：中药补肾方剂可活泼和增进细胞的信号传导，这可能是其促细胞增殖的一种机制.【关键词】补肾方剂；成骨样细胞；细胞增殖；蛋白激酶0引言中药补肾方剂根据祖国传统医学肾主骨理论进展配方，用于治疗老年骨质疏松症，对成骨样细胞有影响1.大鼠成骨肉瘤细胞UR106具有稳定、均一、纯度高的特点2，故用此细胞株研究中药制剂对成骨样细胞增殖的影响.1材料和方法11材料E培养基为Gib产品，小牛血清购自天津生物制品公

3、司；32PATP购自中科院上海原子能研究所；PlyGluTyr41，PlyArgSer31，ATP，AP，DG，磷脂酰丝氨酸，苯甲基磺酰氟PSF，胃蛋白酶抑制剂Pepstatin，亮胰蛋白酶肽Leupeptin，34，5二甲基噻唑22，5二苯基四唑氢溴酸盐TT均购自Siga公司；其余试剂为国产分析纯产品.中药补肾方剂由淫羊霍、杜仲、熟地黄、地骨皮、淮牛膝、山茱萸各10g组成，经生药教研室鉴定.用三蒸水浸泡、煎煮2次，再经750L/L乙醇沉淀，回收乙醇，制成相当于生药2kg/L的药液，调pH至7.0，过滤除菌，分装，密封放置冰箱备用.大鼠成骨肉瘤细胞株UR106由北京医科大学生物化学与分子生物学

4、系转赠，源于美国哈佛医学院麻省总医院内分泌研究室，细胞培养于含100L/L小牛血清的E培养液中.12方法统计学处理:数据以xs表示，采用SPSS10.0统计软件进展Dunnettt检验.2结果21UR106细胞增殖中药补肾方剂提取液对UR106细胞增殖有促进作用，其中药物浓度在110-1和110-2g/L时细胞增殖明显高于对照组P0.01，表1.表1补肾方剂对成骨样细胞UR106增殖的影响(略)22UR106细胞蛋白激酶活性经中药补肾方剂处理的106细胞各蛋白激酶活性均有不同程度的进步，PK活性比对照组增高了95.1%97261430vs4984602，P0.01，TPK活性比对照组增高了44

5、.8%5393829vs3724753，P0.05.3讨论?素问六节脏象篇?中有“肾者其充在骨的说法.我们应用成骨样细胞株UR106，观察到中药补肾方剂能明显促进UR106细胞的增殖，与中医传统理论相一致3-4.TPK与细胞生长关系亲密，可以通过PL磷酸化进一步激活PK5-6.用补肾中药作用于106细胞后两种与细胞增殖关系亲密的蛋白激酶活性均有不同程度的进步，以PK活性增幅更显著，说明本方剂促细胞增殖作用与细胞内信息传递系统有关.【参考文献】1高晓燕，孟燕彬，赵春颖补肾中药对成骨样细胞UR106增殖的影响J.承德医学院学报，2002，191：7-9.2曲耀华，刘彬，张维娟，等.甲状旁腺素促成骨

6、样细胞增殖作用及其与钾离子通道的关系J.中医正骨，2002，146：7-8.3王长海，田立民，蒋永培，等.中药骨松康治疗老年性骨质疏松症的临床对照研究J.第四军医大学学报,2022,24(11)：1029-1031.4王四旺,郑本端,孙纪元，等.安太胶囊治疗骨质疏松症168例J.第四军医大学学报,2022,24(14)：1324-1327.5sadaS,SajiS,sadaK.ritialrlefextraellularsignalregulatedkinasephsphrylatinnenadine(vitainK3)induedgrthinhibitinJ.aner，2001；91(6):1156-1165.6DesndNJ，