相关护理班常用免疫学检查课件

1、 临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、细胞免疫检测四、肿瘤标志物检测五、自身抗体检测六、感染免疫检测免疫系统免疫学方法教学目的与要求：了解掌握临床免疫学检查的主要内容、检测原理以及临床实际应用的重要意义重点与难点各种抗体的特点补体定义及CH50测定肿瘤标志物及其特异性，AFP与CEA的特点，各种类型的特异性自身抗体与自身免疫的关系及各类型自身抗体检测的方法及临床意义乙肝五项测定以及临床意义临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测免疫球蛋白（Ig）定义：是由浆细胞合成分泌的一组具有

2、抗体活性的球蛋白，存在于机体的血液、体液、外分泌液和部分细胞的膜上。检测：感染性疾病、免疫增值性疾病和免疫缺陷性疾病的诊断、鉴别诊断、疾病进展和预后。血清免疫球蛋白分类根据重链稳定区的分子结构和抗原特异性的不同，分为五类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE血清免疫球蛋白G检测IgG人体内含量最多，占Ig的70-80再次免疫应答的主要抗体对细菌、病毒和寄生虫都有抗体活性唯一可通过胎盘的Ig参考值7.016.6 g/L临床意义-IgG 增高 多克隆性增高 见于各种慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球菌感染以及自身免疫性疾病单克隆性增高 仅见一种Ig增高，主要见于免疫增殖性疾病，如IgG分泌

3、型多发性骨髓瘤临床意义IgA增高 见于IgA型MM，SLE,类风湿性关节炎，肝硬化，湿疹和肾脏疾病等IgA降低 见于反复呼吸道感染，非IgA型MM，重链病，轻链病，原发和继发性免疫缺陷病和自身免疫性疾病免疫球蛋白M检测IgM是五聚体，分子量最大的Ig不能通过血管壁，不能通过胎盘个体发育过程中最早合成的抗体，脐带血IgM增高提示胎儿宫内感染体液免疫应答中IgM是最早产生的抗体参考值参考值 0.5 2.6 g/L临床意义IgE增高 见于IgE型MM、重链病、肝脏病、结节病、类风湿性关节炎，以及各种过敏性疾病和寄生虫感染等。IgE降低 见于先天性和获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期应用免疫抑制剂

4、和共济失调性毛细血管扩展症等。血清M蛋白M蛋白(M protein)或称单克隆免疫球蛋白，是一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。【参考值】蛋白电泳法、免疫比浊法或免疫电泳法：正常人为阴性。图14号为多发性骨髓瘤病人的血清蛋白电泳图谱13 123456789101112【临床意义】检测到M蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增殖病。见于：多发性骨髓瘤：以IgG型最常见，其次为IgA型，IgD和IgE罕见，也有IgM型的报道。 多发性骨髓瘤（multiple myeloma）是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤（plasnocytoma），因其引起骨破坏而得名

5、。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。男性多发，男女比约为2:1，平均发病年龄是46.5岁。多发性骨髓瘤患者骨破坏所致头颅肿物及眼球突出巨球蛋白血症(macroglobulinemia)：该病血液中存在大量单克隆IgM。重链病：出现Ig重链轻链病：出现单克隆游离轻链。半分子病：系由一条重链和一条轻链组成的单克隆Ig片段。恶性淋巴瘤：血液中可出现M蛋白。良性M蛋白血症：临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测补体（Complement）补体是一组具有酶源活性的糖蛋白，由传统途径的九种成分C1(C1q/C1r/C1s）-C9

6、，旁路途径的三种成分及其衍生物B/D/P/H/I等因子组成参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理反应+C一、溶细胞作用：靶细胞抗 体抗原抗体 复合物C1-C9靶细胞溶 解Ca+C1rC1sC1q C4C4ab细胞膜识 别 阶 段C3转化酶的形成C4bMg+C4aCa+C1rC1sC1q C2C2abC2bC4b2b 为C3转化酶活化阶段C5转化酶的形成C4bMg+C4aCa+C1rC1sC1q C2aC2bC3 C3abC4b2b3b 是C5 转化酶; 它导致膜攻击复合体(MAC)的形成活化阶段C3b C2aC4bC5bC5a C5b C6C7膜攻击阶段MAC形成并插入到细胞内C5b C6C7C

7、8 C9C9C9C9C9C9C9C9C9CH50在50%溶血附近，“S”形曲线最陡，接近一条直线。在此范围内补体活性稍有变动，溶血程度就有明显变化，即是以50%溶血作为反应的终点比以100%溶血作为终点更为敏感，因而该试验被称为补体50%溶血试验（complement hemolysis 50%） ，即CH50试验。CH50测定的临床意义增高：见于急性炎症，组织损伤和某些恶性肿瘤。减低：免疫复合物性疾病（如肾小球肾炎）、自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良和遗传性补体成分缺乏症等补体C3检测是一种由肝脏合成的2-球蛋白。C3在补体系统各成分中含量最多

8、，是经典途径和旁路途径的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。 【参考值】 成人血清C3：O815gL。 【临床意义】 (1)增高：常见于一些急性时相反应，如急性炎症、传染病早期、肿瘤、排异反应、急性组织损伤。 (2)减低：见于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎活动期、大多数肾小球肾炎(如链球菌感染后肾小球炎、狼疮性肾炎、基底膜增殖性肾小球肾炎)、慢性活动性肝炎、慢性肝病、肝硬化、肝坏死、先天性补体缺乏(如遗传性C3缺乏症)等。它们或是由于消耗或丢失过多或是由于合成能力降低造成。 临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测 肿瘤标

9、志物 肿瘤标志物（tumor marker、TM）： 在肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞所产生或机体在肿瘤细胞刺激下产生的，与肿瘤存在相关的物质，存在于血液、细胞、组织液、体液中。2008年我国卫生事业发展统计公报 卫生部统计信息中心 肿瘤的发展与诊断10-100 g榛子大小针头大小免疫学方法生物物理学方法早期亚临床阶段晚期1 mg1 g1kg1 g高灵敏度的肿瘤标志物的测定对肿瘤的早期诊断和治疗方案设计是十分重要的手段 世界卫生组织（WHO）指出：若能早期诊断并及时治疗，90%95%的肿瘤是可以治愈的。临床可检测的肿瘤肿瘤标记物 (无形的肿瘤)一般肿瘤细胞在癌前病变时，会产生表达肿瘤异常蛋白

10、质，多数肿瘤从癌前病变发展到0.5 cm 以上的占位性病变需要 5 y10 y的时间。如果能够在这段时间内运用肿瘤标志物检测技术，早期检测到患者血液中肿瘤所表达的异常蛋白质，就可以早期发现、早期诊断，并获得早期治疗的良好效果。恶性肿瘤增长的检测Tumor mass1g10 1mg1061g109 10-100g1010-11 1kg1012肿瘤标记物 (无形的肿瘤)临床可检测的肿瘤肿瘤增长Tumor cellsLead time世界卫生组织（WHO）指出：若能早期诊断并及时治疗，90%95%的肿瘤是可以治愈的。肿瘤标志物免疫分析现实的肿瘤标志物灵敏度有限；特异性有限；存在正常异常交错；存在不稳

11、定性与临床表现存在差异理想的肿瘤标志物肿瘤患者血液中含量明显增高；与肿瘤组织的定位有关；肿瘤标志物的含量与肿瘤的大小分期有关；肿瘤标志物的含量与肿瘤的生长、消退或转移、复发有关；假阴性率与假阳性率低。TM分类蛋白质类，如AFP、CEA和PSA等。糖脂类，如CA19-9和CA-50等酶类，如PAP、NSE和AFU等。激素，如HCG、雌激素受体等其它 肿瘤标志物，如核酸、多胺等。肿瘤标志物检测方法化学发光免疫分析系统临床常用肿瘤标志物1.蛋白质类肿瘤标志物检测甲胎蛋白（-fetoprotein，AFP）在胎儿发育早期,由肝脏和卵黄囊合成，出生后一年内降至正常水平。细胞恶变后又重新具有分泌AFP的能

12、力。对诊断肝细胞癌及滋养细胞恶性肿瘤有重要的临床价值。参考值血清 300g/L。病毒性肝炎与肝硬化患者血清中AFP可增高，但常300g/L。生殖器胚胎性肿瘤、胃癌、胰腺癌患者血清中AFP可升高。妊娠时AFP可升高，峰值低于400g/L，若异常升高应考虑胎儿神经管缺损畸形。癌胚抗原（carcinoembryonic antigen、CEA）早期胎儿的胃肠道及某些组织均有合成CEA的能力胎儿出生后血清 CEA的含量极低参考值血清 5g/L临床意义升高主要见于胰腺癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃癌等消化系统肿瘤。血清CEA连续随访检测，可用于恶性肿瘤治疗后的疗效观察及预后判断。病情好转时，CEA浓度下

13、降，病情加重时可升高。肠道憩室炎，直肠息肉，结肠炎，肝硬化，肝炎和肺部疾病也有不同程度的升高。抽烟前列腺特异性抗原（PSA)前列腺分泌的单链糖蛋白存在于前列腺管道的上皮细胞，前列腺癌时血清水平明显升高总PSA (t-PSA）中，80结合形式，20游离（ f-PSA)参考值： t-PSA4.0g/L、 f-PSA0.25临床意义前列腺癌是60-90患者血清t-PSA明显升高前列腺炎、增生，轻度升高， t-PSA 4.0-10.0g/L t-PSA 4.0-10.0g/L ， f-PSA /t-PSA 的比值对诊断更有价值，f-PSA /t-PSA0.1时提示前列腺癌2.糖脂类肿瘤标志物检测肿瘤细

14、胞内糖基化过程发生变异，从而导致细胞分泌性或细胞膜上的糖蛋白或糖脂中的糖基序列发生改变，形成了一种和正常糖蛋白不同的特殊抗原，可利用单克隆抗体技术检测这些抗原，结果诞生了糖蛋白类抗原。作为新一代的肿瘤标记物，远较酶和激素类标记物敏感、特异。 CA125糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于上皮性卵巢组织及患者血清中CA-125在卵巢诊断中的应用8090的卵巢上皮癌中CA-125可明显升高子宫内膜癌、透明细胞癌、输卵管癌及未分化卵巢癌患者中CA-125含量也可明显升高粘液性卵巢癌患者的阳性率则较低CA-125在卵巢包块良恶性的鉴别上特别有价值，敏感度为78、特异性95、阳性预测价值82、阴性预测价值91

15、。 CA-125和CEA联合测定，计算两者比值，可提高卵巢癌检出的敏感性和特异性。 其他应用非卵巢癌类的恶性肿瘤，如胰腺、肝、胃、肠、子宫、和乳腺癌症患者中CA-125的阳性率可分别高达73、70、53、27、22和20。然而CA-125血清浓度轻微上升还可见于1健康妇女，36的良性卵巢疾患或非肿瘤患者，包括孕期起始3个月、行经期、子宫内膜异位、子宫纤维变性、子宫肌瘤、良性卵巢瘤、急性输卵管炎、急性胰腺炎、肝病、胸腹膜和心包感染等。应注意排除 。二、CA19-9 为唾液酸化的型乳糖系岩藻五糖，有六个糖基组成 正常在胰腺导管、胆道、胃、肠、子宫内膜和涎腺上皮细胞中均有表达CA19-9的应用CA1

16、9-9的器官特异性不强在各种腺癌特别是消化系统的恶性肿瘤如： 7193胰腺癌、67肝胆管癌、4050胃癌、3050肝癌、30直肠癌和15乳腺癌的CA19-9都有升高在急性胰腺炎、胆汁淤积性胆管炎、胆道结石和肝脏疾患中CA19-9也有可能升高，但很少超过120kU/L，往往是呈“一过性”升高。CA19-9在胰腺癌中的应用CA19-9在胰腺癌中的阳性率最高，常被认为是针对胰腺癌的一种肿瘤标记物。早期胰腺癌CA19-9敏感性较低， T1期为60.7、T2期为78.4 检测胰腺癌的治疗效果及术后复发情况 CA15-3 分子量约为40 000的糖蛋白是抗原决定簇、糖和多肽组成的糖蛋白临床意义 :CA15

17、-3作为乳腺癌的主要标记物 23的原发性乳腺癌和69转移性乳腺癌可有 CA15-3的升高乳腺癌的期和期，仅有1020的病人有升高，所以不能用于乳腺癌的早期诊断主要用于乳腺癌病人的治疗监测和预后判断。乳腺癌患者血清CA15-3浓度比原来水平升高预示病情进展、肿瘤复发、转移，其浓度升高比临床症状出现或影像学检查的发现时间早。对晚期病人，当CA15-3100 kU/L 时，肯定有转移，敏感性高于CEA、TPA。 80的胰腺癌、71的肺癌、68的乳腺癌、64的卵巢癌、63的直肠癌、28的肝癌中也可见到CA15-3的升高5.5的正常人、一些良性肝病和良性乳腺病（16）也可见有 CA15-3的升高 其它重

18、要的肿瘤标志物名称 生化特性 相关肿瘤CA15-3 糖蛋白 乳腺癌、肺癌、肾癌、卵巢癌、结肠癌CA125 糖蛋白 卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌CA72-4 糖蛋白 胃癌、结肠癌、胰腺癌、非小细胞性肺癌SCC 糖蛋白 子宫颈癌、肺鳞癌、头颈部鳞癌TPA 蛋白质 膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌肿瘤标志物的合理选用 同一种肿瘤可含多种标志物，而一种标志物可出现在多种肿瘤。选择特异标志物或最佳组合有利于提高肿瘤诊断的阳性率。动态检测有利于良性和恶性肿瘤的鉴别，也有利于复发、转移和预后判断。胃癌：CEA+CA199乳腺癌：CA153+CEA+CA199卵巢癌：CA125+CA724+TPS+AF

19、P临床常用免疫学检查包括一、血清免疫球蛋白检测二、血清补体检测三、肿瘤标志物检测四、自身抗体检测五、感染免疫检测自身免疫病检测正常情况下，机体免疫系统对自身抗原物质不产生免疫应答或只产生极微弱的免疫应答自身免疫性疾病是指机体免疫功能紊乱时,针对自身组织抗原产生自身抗体或致敏淋巴细胞,并导致组织损伤而引起的疾病.如SLE、RA、MCTD等。自身免疫性疾病主要免疫学特征为血清或其它体液中出现高滴度的自身抗体和致敏淋巴细胞,因此通过对自身抗体的检测辅助自身免疫性疾病的诊断.类风湿因子(rehumatoid factor ,RF)RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，是一种以变性IgG的作为靶抗

20、原的自身抗体。RF主要为IgM型抗体, 但也有 IgG, IgA IgD、IgE型抗体。存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。检测方法与参考值乳胶致敏凝集实验：1:10为阴性。酶连免疫吸附实验（ELISA）：阴性。速率散射比浊法：女性，我国携带者约6%，这种人虽然没有临床症状,体检肝功能正常或有轻微损害，有时ALT升高，血中抗-HBS（-），具有一定的传染性,不应作为供血者。可持续数周、数年这种人将来可能发生慢性活动性肝炎、迁延性肝炎、肝硬化和肝癌值得注意。 抗-HBs阳性表示：既往曾感染过HBV，现已恢复；接种乙肝疫苗后；被动性获得抗-HBs抗体HBeAg： HBeAg阳性表明: 患有乙

21、型肝炎，是病毒复制活跃，传染性强的指标，且HBeAg持续阳性的乙型肝炎，易转变为慢性肝炎,肝硬化。 HBeAg (+) ,HBsAg(+)的孕妇所生的新生儿，母婴垂直传播的机会很高，达90%值得重视。抗-HBe阳性意味着 HBV部分被清除或抑制，复制减少，传染性降低.但慢性肝炎,肝硬化阳性率高e抗体和e抗原一般不同时存在，e抗原消失，e抗体产生。e抗体（+）说明患者曾出现过HBeAg，但对e抗体（+）者不可视为HBV复制平息。抗-HBc IgM ： 是诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标，并提示病人血液有强传染性。抗-HBc IgM阳性也可见于慢性活动性肝炎。 抗-HBc IgG ： 高滴

22、度表明机体正感染HBV；而低滴度抗-HBc IgG则是既往感染过HBV的指标，具有流行病学的意义。(非保护性抗体)HBV DNA： 是HBV感染最直接，最灵敏和最特异的检测指标，且血清中HBV DNA的水平可作为治疗方案与疗效观察的指标。HBV DNA定量检测循环数. 扩增子数 (靶序列拷贝数)122438416532664201,048,576301,073,741,824(10亿)目的基因扩增乙型肝炎病毒血清标志物的综合评价 (1) (2) (3) (4) (5) 急性或慢性乙型肝炎，高传染性 急性、慢性乙型肝炎或慢性HBsAg携带者 急性乙肝趋向恢复或慢性乙肝，弱传染性 急性HBV感染康

23、复期或有既往感染史，有 免疫力 乙肝恢复期，弱传染性 急性HBV感染“窗口期”， 或既往曾感染过乙肝 接种HBV疫苗或HBV感染后康复 急性乙肝康复期，开始产生免疫力 无HBV感染HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc + + + + + + + + + +- 丙型肝炎病毒标志物丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV） 由核心和包膜组成。核心含有单链正股RNA，包膜由结构蛋白和非结构蛋白区域组成。血液为其主要传播途径。病情虽较乙型肝炎轻，但更易转为慢性。检测方法与参考值 标志物 检测方法 参考值 抗-HCV ELISA 阴性抗-HCV IgM ELISA

24、阴性抗-HCV IgG ELISA 阴性 HCV-RNA RT-PCR 阴性临床意义（1）名称 临床意义抗-HCV： 一种非保护性抗体，阳性是诊断 HCV感染的重要依据。 抗-HCV IgM ： 是丙型肝炎活动和具有传染性的 指标，常见于急性HCV感染。抗-HCV IgG ： 阳性表明体内有HCV感染。 临床意义（2）HCV-RNA ： 阳性提示 HCV复制活跃,传染性强，而且血清中HCV-RNA 水平可作为治疗的选择以及疗效观察的指标。城市牛皮藓3.性传播性疾病的免疫学检验3.性传播性疾病的免疫学检验性传播性疾病（sexually transmitted disease, STD）：是指通过

25、各种性接触而传播的疾病，简称性病（venereal disease）正规医疗机构是性病患者的正确选择衣原体淋球菌梅毒螺旋体抗体的检测 梅毒（syphilis）是由梅毒螺旋体(treponema pallidum，TP) 引起的一种危害性严重的性传播性疾病,早期主要侵犯皮肤与黏膜，晚期可侵犯全身各组织器官，特别易侵犯心脏与神经系统。机体感染梅毒螺旋体，可产生梅毒螺旋体的特异性抗体与非特异性抗体（抗类脂质抗原的抗体）过筛实验非特异性抗体的检测不加热血清反应素（unheated serum reagin, USR）试验快速血浆反应素（rapid plasma reagin, RPR）试验确诊实验特异性抗体的检测梅毒螺旋体抗体血凝试验（ treponema pallidum hemagglutination assay,TPHA）荧光密螺旋体抗体吸附（fluorescent treponemal antibody absorption,FTA-ABS）试验梅毒螺旋体制动（treponema pallidum immobilizing,TPI）试验过筛实验的临床意义梅毒的筛选及流行病学调查。梅毒患者的阳性率约为70-95%，特别是二期梅毒，阳性率可高达100%。 其它疾病，如麻风，SLE，硬皮病，结核，雅司病等也有一定的阳性率。梅毒