高效液相色谱法测定骨康口服液中补骨脂素和异补骨脂素的含量

1、高效液相色谱法测定骨康口服液中补骨脂素和异补骨脂素的含量钟镜金黄晓其龙彦纲曾惠芳苏子仁【摘要】目的创立骨康口服液中有用身分的含量测定要领。要领接纳HPL法测定骨康口服液中有用身分含量。结果补骨脂素和异补骨脂素两种身分均到达精良分散，在测定范畴内线性精良，接纳率均在99%101%之间。结论所创立的定量要领轻便可行、重复性好，可作为骨康口服液的质量监控。【关键词】骨康口服液补骨脂素异补骨脂素高效液相色谱法Keyrds:GukangralLiquid;Psralen;Ispsralen;HPL骨康口服液由补骨脂、淫羊藿、肉苁蓉、白芍、黄芪等10味药材构成，具有补肾壮骨，活血通络，健脾益气的成果，临床

2、上重要用于治疗妇女更年期引起的骨质疏松症。骨康口服液复方共煎，有利于补骨脂素与异补骨脂素的煎出1,2，故接纳水提醇沉工艺制备3。鉴于补骨脂素、异补骨脂素可彼此转化4,2，原尺度接纳TLS法测定补骨脂素、异补骨脂素两者的总量5。但TLS法变异大，应选用HPL法同时测定骨康口服液中补骨脂素与异补骨脂素的含量。现将研究结果报道如下：1仪器与试药DINEXSUIT高效液相色谱仪PDA-100检测器、STH585柱温箱、P680HPL泵、ASI-100主动进样器,hrelen色谱事情站；补骨脂素供含量测定用，110739-202209、异补骨脂素(供含量测定用，110738-202210)，均由中国药品

3、生物成品检定所提供；骨康口服液批号：20221009，20221012，20221015，由广州中医药大学新药开拓研究中央提供；乙腈为色谱纯erk，1192230其他试剂均为阐发纯。2要领与结果2.1色谱条件色谱柱：Phenenexluna18柱(2504.60，5)；活动相：以乙腈为活动相A，以0.1%冰醋酸为活动相B，按表1中的划定举行梯度洗脱；检测波长：246n；流速：1.0lin-1；柱温：25；进样量：10l；理论塔板数均不低于3000。2.2溶液的制备细密称取补骨脂素、异补骨脂素比较品适量，别离置25l量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，以此作为比较品储藏液。细密汲取上述各比较品

4、储藏液适量，加甲醇制成每毫升含补骨脂素35g，异补骨脂素44g的混淆溶液，摇匀即得。取本品10支，混匀，细密汲取药液10l，加乙醚提取4次，10l/次，分取乙醚层，60挥干乙醚,用甲醇溶解残渣，并转移至5l容量瓶中，用甲醇加至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。2.3线性干系观察细密汲取比较品溶液2，4，6，8，10，14l举行色谱测定，按上述色谱条件测定峰面积，并以峰面积Y对进样量X举行回归，补骨脂素在70490ng范畴内呈精良线性干系，异补骨脂素在88616ng范畴内呈精良线性干系，回归方程别离为：补骨脂素：Y=8224.5X-48.1326,r=0.9999；异补骨脂素：Y=7371.7X-

5、52.4752,r=0.9999。2.4细密度实行细密汲取上述补骨脂素和异补骨脂素比较品溶液10l一连进样5次，测得峰面积积分均匀值补骨脂素为3211.929，RSD为0.07%；异补骨脂素为3676.707，RSD为0.16%，表白阐发要领细密度精良。2.5重复性实行根据制定的含量测定要领，对同一批样品批号：20221009制备供试品溶液，平行操纵6份，结果测得补骨脂素均匀含量为0.075gg-1，RSD为2.39%；异补骨脂素均匀含量为0.072gg-1，RSD为2.54%，表白本测定要领具有较好的重复性。2.6不变性实行细密汲取同一供试品溶液10l，在0，2，4，8，12h别离进样，记载

6、峰面积并盘算RSD，结果：补骨脂素均匀峰面积为1330.393，RSD为0.46%；异补骨脂素均匀峰面积为1056.411，RSD为1.6%，表白样品中补骨脂素和异补骨脂素在12h内不变。2.7专属性实行取供试品溶液、比较品溶液、阴性比较溶液,按本色谱条件各进样10l。结果见图1。结果表现，在本色谱条件下,阴性比较无滋扰。2.8加样接纳率实行细密汲取含量的同一批样品2022100910l，别离细密参加必然量的补骨脂素比较品和异补骨脂素比较品，按供试品溶液制备要领制备并测定，按公式接纳率P(%)=(测得量-参加量)/样品量100%盘算接纳率。结果见表2。表白本要领具有精良的接纳率。表1骨康口服液

7、中补骨脂素、异补骨脂素的HPL测定梯度洗脱条件略表2加样接纳率实行结果略表3样品中补骨脂素、异补骨脂素含量测定结果略2.9样品测定取骨康口服液3批,照上述要领处置惩罚后测定,记载峰面积,代入回归方程盘算样品中补骨脂素和异补骨脂素的含量。结果见表3。3讨论3.1提取溶媒的选择本品处方由多味中药构成，且由水煎煮浓缩制得，活性身分多，极性强，影响区分的滋扰因素较多。笔者曾用水直接稀释样品进样阐发，结果杂质峰较多，分散结果差。思量到补骨脂素与异补骨脂素为呋喃香豆素类身分，因此接纳乙醚提龋实行结果表白，该法可使样品中的补骨脂素与异补骨脂素提取完全。3.2活动相的选择如今?中国药典?2022年版和文献报道

8、中HPL法测定补骨脂素与异补骨脂素大多接纳甲醇-水体系69，但颠末实行创造，这些体系均不实用于该制剂的阐发，本文选用乙腈-0.1%醋酸溶液梯度洗脱，可以同时测定补骨脂素与异补骨脂素的含量，且得到较好的分散结果，且峰形更佳。本法操纵轻便，细密度高，重现性好，是操纵骨康口服液内涵质量的有用要领。【参考文献】1苏子仁,刘庆思,徐必达,等.方药配伍对温补肾阳方君药补骨脂素、异补骨脂素煎出的影响J.中国实行方剂学杂志,1996,2(5):8.2苏子仁，徐必达，刘庆思，等.磷脂对骨康方补骨脂素、异补骨脂素煎出增溶作用探究J.中国实行方剂学杂志,1997,3(3):5.3吴雪茹，苏子仁，施佳平，等.骨康口服液工艺优化研究J.中成药,1999,21(5)：218.4苏子仁，徐必达，刘庆思.补骨脂素、异补骨脂素在骨康提取精制历程中化学转化的研究J.中国实行方剂学杂志，1997，3(6)：1.5曾惠芳,苏子仁,刘庆思.骨康口服液中补骨脂素,异补骨脂素的含量测定J.中药新药与临床药理，1999,10(4)：237.6国度药典委员会.中国药典，部S.北京：化学产业出书社，2022：129,229,577.7陆蓓,吴韶铭.HPL法测定益肾灵颗粒中补骨脂素和异补骨