呼吸道病原体抗体检测及临床应用课件

1、呼吸道病原体抗体检测及临床应用呼吸道病原体抗体检测及临床应用呼吸道病原体检测的必要性实现呼吸道感染的早期诊断和治疗；明确病因-指导治疗决策；重症肺炎的病因学诊断；社区获得性肺炎或医院内感染的快速诊断；减少抗菌素的不合理使用；监控新发或突发传染病，快速、准确的实验室检测是早期发现传染病病例和传染病早期预警的有效科学手段。 由于呼吸道感染的病原体种类繁多 ，病症相似临床上不易区分 ，建立切实有效的呼吸道病原体快速检测技术必不可少。呼吸道病原体检测的必要性实现呼吸道感染的早期诊断和治疗；呼吸道病原体感染的特点 病原学复杂，病毒变异性大、高度传染性，易在人群中造成爆发流行； 大部分情况下，病毒入侵部位

2、、入侵后繁殖部位、由此引起发的组织和免疫病理改变以及表现出的临床症状和体征的部位基本在呼吸道；大多数病毒不通过血液侵入机体其他部位，往往查不出病毒血症；有些病毒还可以引起肠道病毒感染； 表面感染后获得的免疫力，一般来说是不持久的。呼吸道病原体感染的特点 病原学复杂，病毒变异性大、高度传染呼吸道感染状况-儿童5岁以下儿童死亡的首位病因易出现反复的呼吸道感染儿童反复呼吸道感染的主要原因：与儿童呼吸道生理特点有关，儿童鼻腔短小，没有鼻毛，鼻粘膜柔嫩，容易受感染。儿童免疫功能不成熟。过敏体质常见。因喂养不当所致营养不良有关。病毒感染占急性上呼吸道感染90%左右。呼吸道感染状况-儿童5岁以下儿童死亡的首

3、位病因呼吸道感染状况-孕妇 由于妊娠期患者生理状况与普通成人患者有所不同，临床医生可能会面临两种情况：1、妊娠期的生理改变会使呼吸临床表现更为复杂，这些复杂的临床表现影响疾病及时诊断；妊娠期的生理改变是否会使疾病的临床表现不典型，并因此影响疾病的及时诊断；2、各种检查诊断技术应用及治疗药物是否可能对胎儿产生不利的影响。呼吸道感染状况-孕妇 由于妊娠期患者生理状况与普通成人呼吸道感染-概述呼吸道感染：指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。分为上呼吸道感染和下呼吸道感染。上呼吸道感染： 鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称。常见病因以病毒为主，主要有鼻病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感、副

4、流感病毒、冠状病毒等。细菌感染可以是原发的，也可以继发于病毒感染。细菌以化脓性链球菌为最常见，其次是流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌等，肺炎支原体和肺炎衣原体较少见。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性，而且可引起严重并发症。包括普通感冒，急性鼻窦炎、中耳炎、扁桃体炎等。下呼吸道感染： 气管、支气管、肺部急性炎症的概称。常见病原体为病毒，支原体、衣原体，少数是细菌引起。常见的有气管、支气管炎、毛细支气管炎、肺炎等。 呼吸道感染是儿童最常见的感染性疾病，占儿科住院患儿的24.5-65.2。急性呼吸道疾病是全球范围内人类疾病和死亡的主要原因之一。 目前已证明95

5、%的急性上呼吸道疾病和大部分的下呼吸道疾病是由细菌外的病原引起，其中以呼吸道病毒最常见。肺炎支原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒和副病毒等病原体IgM抗体都在1周左右出现，因此IgM可作为近期感染的一个有效指标。呼吸道感染-概述呼吸道感染：指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、呼吸道感染-病因呼吸道合胞病毒流感病毒副流感病毒腺病毒鼻病毒柯萨奇病毒埃可病毒冠状病毒单纯疱疹病毒EB病毒其它类型病毒继发溶血性链球菌肺炎链球菌流感嗜血杆菌肺炎支原体肺炎衣原体金黄色葡萄球菌其它病毒感染后继发细菌感染呼吸道感染-病因呼吸道合胞病毒继发溶血性链球菌病毒感染后继目前国内外检测较多的呼吸道病原体1、病毒： 呼吸道合

6、胞病毒、腺病毒、流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒、柯萨奇B组病毒、埃可病毒、水痘-带状疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、风疹病毒、鼻病毒等。2、其它微生物： 肺炎支原体、肺炎衣原体、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等。3、目前国内外检测较多的是下面15种： 呼吸道合胞病毒、腺病毒、A型流感病毒、B型流感病毒、副流感病毒、柯萨奇B组病毒、埃可病毒、水痘-带状疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、风疹病毒、肺炎衣原体、肺炎支原体。目前国内外检测较多的呼吸道病原体1、病毒：呼吸道病原体感染率呼吸道病原体感染率呼吸道病原体抗体检测及临床应用呼吸道病原体感染临床特征的异同

7、点病原体名称临床共同特征临床特异特征流感病毒A头痛发烧畏寒鼻塞咳嗽咽痛发烧体温较高、恶寒明显、肌肉酸痛、常年流行流感病毒B发烧体温较高不如A型高，恶寒不如A型明显、肌肉酸痛副流感病毒小儿肺炎、小儿哮喘、中耳炎腺病毒腺病毒肺炎、流行性角膜炎、阑尾炎、肠炎呼吸道合胞病毒喘憋性肺炎、中耳炎、胸膜炎、心肌炎EB病毒传单、慢性活动性EBV感染、EBV相关嗜血淋巴组织细胞增多症、鼻咽癌、淋巴瘤、何杰金氏病柯萨奇B组病毒病毒性心肌炎、无菌性脑膜炎、流行性心痛埃可病毒病毒性心肌炎、无菌性脑膜炎、胸膜炎、脑脊髓炎腮腺炎病毒腮腺炎、脑膜炎、睾丸炎、卵巢炎、胰腺炎水痘带状疱疹病毒水痘、带状疱疹、无菌性脑炎、格林巴利

8、综合症、莱耶综合征脑炎、水痘性肺炎麻疹病毒结膜炎、口腔黏膜斑、全身丘疹风疹病毒出疹巨细胞病毒肝炎肺炎支原体非典型肺炎、儿童哮喘、过敏性紫癜肺炎衣原体社区获得性肺炎、鼻窦炎呼吸道病原体感染临床特征的异同点病原体名称临床共同特征临床特临床组合推荐门诊病人 ： 血常规 + CRP （PCT） + 肺炎支原体 / 肺炎衣原体 流感季节： 甲流、乙流、副流感 +（合胞病毒、腺病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体） 感冒咳嗽两项：血常规+肺炎支原体+肺炎衣原体 感冒咳嗽两项：肺炎支原体+合胞病毒或者肺炎衣原体+合胞病毒住院病人： 肺炎支原体+肺炎衣原体+肺炎链球菌+金黄色葡萄球菌+呼吸道病毒（流感、副流感、合胞病

9、毒、腺病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒、腮腺炎病毒等）临床组合推荐门诊病人 ：临床组合推荐社区获得型肺炎（CAP）：肺炎支原体 + 肺炎衣原体 + 肺炎链球菌毛细支气管炎（呼吸四项）：呼吸道合胞病毒、腺病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体 小儿病毒性心肌炎患者：柯萨奇B组病毒 + 埃可病毒小儿脑膜炎等神经系统疾病患者：柯萨奇B组病毒+埃可病毒+水痘病毒+腮腺炎病毒（HSV-I, EB，CMV。）传染性单核细胞增多症患儿：EB病毒系列手足口病患儿：柯萨奇A组病毒肠道病毒临床组合推荐社区获得型肺炎（CAP）：肺炎支原体 + 肺炎衣呼吸道病毒早期检测的临床意义减少不必要的抗生素使用，降低医疗费用监控和控制院内感染

10、提供临床诊断需要的流行病学信息呼吸道病毒早期检测的临床意义减少不必要的抗生素使用，降低医疗呼吸道病毒早治疗的益处缓解症状，缩短病程，并降低并发症发生率缩短排毒时间，降低病死率在流行期间，预防性使用可降低患病率呼吸道病毒早治疗的益处缓解症状，缩短病程，并降低并发症发生率实验室检测技术涂片及培养血培养免疫学诊断（血清学检测） 抗体：目前常用的诊断技术 尿抗原：SP、LP Biomarker:降钙素原：-区分细菌及非细菌感染-评估感染严重程度-比CRP特异血清学检测：酶联免疫法（ELISA）：目前为首选的检测方法。灵敏度高（10-15g）, 特异性强。75分钟内出结果。即可单人份，又可批量检测。化学

11、发光法（CLIA）：灵敏度高（10-18 g）, 特异性强。板式发光90分钟内出结果，全自动磁微粒发光30分钟内出结果。分子诊断：病原体核酸检测阳性的价值逐渐提高。实验室检测技术涂片及培养呼吸道病原体潜伏期及IgM抗体产生情况呼吸道病原体潜伏期及IgM抗体产生情况病原体感染后 IgM、IgG相关临床意义病原体感染后 IgM、IgG相关临床意义新鲜采集的血清样本应先充分离心，然后取澄清的液体进行检测，如未充分沉淀，悬浮的纤维蛋白可能引起假阳性。避免使用含悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血（血红蛋白含量大于10g/L）、高胆红素（胆红素含量大于0.2g/L）、高脂（甘油三脂含量大于20g/L）的样品。

12、标本中含有EDTA、柠檬酸钠、肝素钠等抗凝剂时，不影响结果，可用于本实验。短期（1周）内进行检测的血清样品可存放于28，如需长期保存，应置于-20以下冻存，避免反复冻融。使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品实验前需混匀。样本要求19新鲜采集的血清样本应先充分离心，然后取澄清的液体进行检测，如储存条件、有效期及适用仪器ELISA法试剂盒：于28避光保存，有效期12个月。ELISA法试剂盒：开包装后请在30天内用完。加样器、温箱、洗板机、单波长450nm或者是双波长450nm/630nm的酶标仪。胶体金法试剂盒：于4-30避光保存，有效期12个月。胶体金法试剂盒：使用环境相对湿度60%时，开袋后30分钟内使用。储存条件、有效期及适用仪器ELISA法试剂盒：于28避光注意事项1.测定结果的判断必须以酶标仪读数为准。2.任何血清都应作为具有传染性样品对待。3.试剂盒置28保存，有效期12个月，请于有效期内使用。4.不同批号试剂请勿混用。5.严格