人白介素24基因诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的实验研究

1、人白介素24基因诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的实验研究【关键词】人白细胞介素24；a,Ski细胞；乳头状瘤病毒,人；,E6基因；蛋白质P53；细胞凋亡ApptsisindutinfhuanervialaneraSkiellsbyhIL24gene【Keyrds】huaninterleukin24;aSkiells;papillavirus,huan;E6genes;prteinP53;apptsis【摘要】目的：研究人白介素24(hIL24)在体外诱导宫颈癌aSki细胞凋亡及其作用机制.方法：以脂质体包裹重组真核表达质粒pDNA3.1(+)hIL24转染aSki细胞；利用RTPR技术检测处

2、理后aSki细胞中HPVE6癌基因的RNA程度变化；esternBlt分析处理后aSki细胞中抑癌蛋白P53程度的变化；流式细胞仪分析处理后的aSki细胞凋亡情况.结果：处理后aSki细胞中HPVE6癌基因的RNA程度下降，抑癌蛋白P53程度增加，细胞凋亡率升高.结论：真核表达载体介导的hIL24基因体外转染宫颈癌aSki细胞后，能抑制aSki细胞中HPVE6癌基因的表达，使抑癌蛋白P53恢复活性，促使宫颈癌aSki细胞凋亡.【关键词】人白细胞介素24；aSki细胞；乳头状瘤病毒，人；E6基因；蛋白质P53；细胞凋亡0引言人白介素24hIL24是IL10细胞因子家族中的新成员1.hIL24对肿

3、瘤细胞有特异性的抑制和杀伤作用，如诱导凋亡、抑制生长和抑制肿瘤血管生长，而对正常细胞没有影响,其显著的抗肿瘤特性使之成为肿瘤治疗的新热点2-3.子宫颈癌是危害广阔妇女安康最常见的恶性肿瘤之一，仅次于乳腺癌而位居第二.近年来，年轻妇女中宫颈癌的发病率呈明显上升的趋势4，宫颈癌越来越引起人们广泛的关注.本实验我们采用hIL24基因的真核表达载体转染宫颈癌aSki细胞，以讨论hIL24对宫颈癌的治疗效果.1材料和方法1.2方法2结果2.1转染效率断定转染质粒48h后，荧光显微镜观察表达绿色荧光蛋白的细胞比率大约为50%.初步断定转染效率为50%左右图1.图1转染质粒48h后aSki细胞表达绿色荧光蛋

4、白的情况(略)2.2RTPR检测处理后aSki细胞中HPVE6癌基因的RNA程度变化未处理组和对照组aSki细胞中HPVE6癌基因的RNA程度无统计学差异P0.05，而实验组aSki细胞中HPVE6癌基因的RNA程度与前两组比拟均下降(P0.05，表1，图2.表1三组aSki细胞的E6RNA程度、P53蛋白程度和细胞凋亡率(略)图2E6基因RTPR产物的琼脂糖电泳图略2.3esternBlt分析处理后aSki细胞中抑癌蛋白P53程度的变化未处理组与对照组aSki细胞中抑癌蛋白P53程度无统计学差异P0.05，而实验组aSki细胞中抑癌蛋白P53程度与前两组比拟均增加(P0.05，表1，图3.图

5、3蛋白印迹检测aSki细胞中P53蛋白程度略2.4流式细胞仪分析处理后的aSki细胞凋亡情况未处理组与对照组aSki细胞无明显凋亡发生，两组间无统计学差异P0.05.而实验组aSki细胞的凋亡率与前两组比拟均升高(P0.05，表1，图4.图4流式细胞仪分析处理后的aSki细胞凋亡情况略3讨论IL24是由Jiang等于1995年用IFN和EZ诱导黑素瘤细胞终末分化时,利用消减杂交克隆得到,其后鉴定为IL10家族的新成员.一系列研究证实IL24具有广谱抗肿瘤活性，对多种组织起源的肿瘤细胞如黑素瘤5、前列腺癌、乳腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、结肠癌、皮肤癌、胰腺癌、肺癌、骨肉瘤细胞均有显著的生长抑制效应和诱

6、导凋亡作用，但对正常细胞无明显毒副作用.而且，它还能在肿瘤组织内促进血管内皮细胞分化从而抑制血管形成.IL24是一个分泌型细胞因子，可对周围癌细胞行“旁观者杀灭效应6-7，具有刺激免疫系统的功能，还能使某些癌细胞对射线更加敏感8.目前的研究显示，IL24基因很可能是第一个既抑制肿瘤生长又表达刺激免疫系统的蛋白基因，是目前发现的唯一一个细胞因子类的抑癌基因.目前有adp53,adbax等应用于肿瘤的基因治疗研究中，但大多数的应用由于临床治疗潜力差和对正常组织的毒性高且不具有通过刺激免疫应答来杀伤肿瘤细胞的特性而受限.而IL24就以它上述的优点成为目前最理想的肿瘤基因治疗的候选基因.【参考文献】1

7、FikensherH,HrS,KupersH,eta1.Theinterleukin10failyfytkinesJTrendsIunl，2002,23(2)：89-96.2GuptaP,SuZZ,LebedevaIV,etal.da7/IL24:ultifuntinalanerspeifiapptsisinduingytkineJ.PharalTher,2022,111(3)：596-628.3SarkarD，SuZZ，LebedevaIV,eta1da7(IL24)ediatesseletiveapptsisinhuanelanaellsbyinduingtherdinatedverexp

8、ressinftheGADDfailyfgenesbyeansfp38APKJPrNatlAadSiUSA，2002,99(15)：10054-10059.4韩英，丁岩.子宫颈癌病因及发病机制研究进展J.新疆医学，2022,34(2):114-117.5LebedevaIV，SuZZ，hangY,etalTheanergrthsuppressinggeneda7induesapptsisseletivelyinhuanelanaellsJngene,2002,21(5):708-7186SuZ,EdadL,Sauane,etal.Uniqueaspetsfda7/IL24antiturbystanderativity:EstablishingarlefrseretinfDA7/IL24prtEinbynralellsJ.ngene,2022,24(51):7552-7566.7Sauane,LebedevaIV,SuZZ,etal.elanadifferentiatinassiatedgene7/interleukin24prtesturellspeifiapptsisthrughbthseretryandnnseretrypathaysJ.anerRes,2022,64(9):2988-2993.8韩文玲，马大龙.新细胞因子IL24研究进展J.中华免疫学杂