两种制备方法的紫癜方治疗ITP模型小鼠的药效研究

1、两种制备方法的紫癜方治疗ITP模型小鼠的药效研究【摘要】观察两种制备方法的紫癜方对ITP模型小鼠的治疗作用。方法采用免疫法建立ITP模型，设立正常组、模型组、醋酸泼尼松组D、血美安组X、紫癜水提组S和紫癜工艺组G，利用全自动多物种五分类动物血液分析仪于实验前和实验第14天检测各组小鼠血小板数，实验前、第7天和14天分别记录各组小鼠体重，实验完毕记录各组小鼠皮下出血程度。结果造模前各组小鼠体重和血小板计数均无显著性差异。实验第7天，组小鼠体重低于组，有下降趋势，但无显著性差异；D组、X组、S组和G组小鼠体重高于组，有上升趋势，但无显著性差异；其它各组小鼠体重比拟，无显著性差异。实验第14天，组小

2、鼠体重和血小板计数明显低于组，较组出现明显瘀斑，D组、X组、S组和G组小鼠体重均低于组，血小板计数明显低于组；D组、X组、S组和G组小鼠体重和血小板计数均明显高于组，D组、S组和G组小鼠皮肤瘀斑较组明显减轻，X组小鼠皮肤瘀斑与组比拟无显著性差异；X组、S组和G组小鼠血小板计数明显低于D组；S组和G组小鼠血小板计数明显高于X组；其它各组小鼠体重和血小板计数比拟，无显著性差异。结论紫癜方的两种制备方法对其治疗ITP的药效作用无影响。【关键词】特发性血小板减少性紫癜；紫癜方；制备方法；药效研究QbjetiveTbservetheeffetsfZidianpresriptinextratedbytki

3、ndsfpressnITPie.ethdsUsingAPStinjetintietinduetheITPdel.ieeredividedint6grups:,D,X,SandGgrups.Thenuberfplateletn7thdayand14thdayereeasuredinie.eanhiletheEightn7thdayand14thdayandthedegreefsubutaneusbleedingerererded.ResultsThereisnsignifiantdiffereneinEIghtandthenuberfplateletinallgrupsbefretheexper

4、ient.parediththegrup,theeightisindntrendingrupn7thday,theeightandthenuberfplateleteredelinedingrupn14thday,thepetehiaasrelearlyingrup.parediththegrup,theeightisuptrendinD,X,SandGgrupsn7thday,theeightandthenuberfplateletareenhanedinD,X,SandGgrupsn14thday,thepetehiaasdereasedinD,SandGgrupssignifiantly

5、.parediththeDgrup,thenuberfplateletisdereasedinX,SandGgrups.parediththeXgrup,thenuberfplateletisinreasedinSandGgrups.nlusinZidianpresriptinextratedbytkindsfextratinpresshasanreedialeffetnITPuse.Thereisnsignifiantdifferenebeteenthetkindsfextratinpress.Keyrds:idipathithrbytpenipurpura;Zidianpresriptin

6、;extratinpress;pharadynaiatin特发性血小板减少性紫癜ITP是一种常见的出血性疾玻本文从药效学指标比拟两种制备方法提取的紫癜方治疗ITP的作用差异，从而明确紫癜方的制备方法对其效用的影响。材料与方法1材料1.1动物SPF级安康BALB/小鼠，体重为(1822)g，雌雄各半，动物答应证号：SXK京20020003，由北京维通利华实验技术提供。豚鼠，体重为(250350)g，普通级，46周龄，动物答应证号：SXK吉20220004，由吉林省实验动物质量检测中心提供。1.2药物方剂紫癜方：由黄芪25g,制大黄15g,生晒参10g,阿胶25g,桃仁10g,生地10g,白芍20

7、g,仙鹤草15g,当归10g,甘草10g组成。全部药材购自沈阳天益堂药房。制备方法一紫癜水提方：方中药物常规煎煮水提，加水1500l药量的10倍量，浸泡30in，煎煮时间为25in，搜集药液，取过滤后药物加水1200l药量的8倍量，按照前述方法再次煎煮，将两次煎煮后的药液混合浓缩成100%含生药1g/l备用。制备方法二紫癜工艺方：方中大黄、人参5g和白芍用240l药量的6倍量70%乙醇回流提取2次，每次2小时，回收乙醇至无醇味，形成药液一；药渣和黄芪、桃仁、生地、仙鹤草、当归和甘草加水1200l药量的10倍量，浸泡30in，煎煮时间为25in，搜集药液，取过滤后药物加水900l药量的8倍量，按

8、照前述方法再次煎煮，将两次煎煮后的药液混合为药液二，将药液一和药液二合并，浓缩成100%含生药1g/l的浓缩液；人参5g粉碎过100目筛兑入浓缩液；阿胶粉碎成粗粉加热兑入。醋酸泼尼松片由天津太平洋制药消费国药准字H12022809。将醋酸泼尼松片研成粉末，用生理盐水配成混悬液0.3g/L。血美安胶囊由贵州正鑫药业提供国药准字Z20224441。将血美安胶囊中颗粒状内容物用生理盐水配配成混悬液32g/L。1.3试剂1.4仪器全自动多物种五分类动物血液分析仪，由英国DRESientifiIn.消费型号：HEAVET950FS。转贴于论文联盟.ll.2方法2.1动物分组与处理BALB/小鼠随机分为6

9、组：正常组、模型组、醋酸泼尼松组D、血美安组X、紫癜水提组S和紫癜工艺组G，每组10只。除正常组外其余五组小鼠在实验的1、3、5、7、9、11、13天，将豚鼠抗小鼠血小板血清APS按100l/20g体重的剂量注射于腹腔。给药方法：各组小鼠从验第一天开场灌胃。其中S组小鼠按25g/(kgd)给予紫癜水提方灌胃；G组小鼠按25g/kgd给予紫癜工艺方灌胃；D组小鼠按5g/kgd给予醋酸泼尼松混悬液灌胃；X组小鼠按0.8g/kgd给予血美安混悬液灌胃；其余各组小鼠灌服等容积的生理盐水0.2l/20g体重。每日灌胃1次，连续灌胃14d。2.2指标测定2.2.1皮下紫癜情况观察实验完毕前按照文献2所述方

10、法记录小鼠出血程度。级：注射部位轻度出血，其他部位有散在出血点。级：注射部位明显出血，并见有其他部位瘀斑、瘀点。级：注射部位严重出血，皮肤大量瘀斑、瘀点，可见皮肤发黑或破溃。2.2.2体重检测于造模前、实验第7天和实验第14天分别测量各组小鼠体重。2.2.3血小板数检测于造模前和实验第14天各组小鼠眶静脉采血20l，滴入抗凝管中，用全自动多物种五分类动物血液分析仪检测血小板数。2.3数据的统计处理3结果3.1紫癜方对ITP模型小鼠皮下紫癜情况的影响实验完毕时各组小鼠皮下紫癜情况出血程度见表1。表1各组小鼠皮下紫癜情况略与正常组比拟，*P0.01，*P0.05；与模型组比拟，#P0.013.2紫

11、癜方对ITP模型小鼠不同时间点体重的影响造模前、实验第7天和实验第14天各组小鼠体重变化见图1。3.3紫癜方对ITP模型小鼠不同时间点血小板数的影响造模前和实验第14天各组小鼠血小板数的变化见表2。表2不同时间点各组小鼠血小板计数略与正常组比拟，*P0.01；与模型组比拟，#P0.01；与醋酸泼尼松组比拟，P0.01与血美安组比拟，P0.014讨论以ITP中医发病病机中关于“气虚血瘀血热的理论作为根底，并根据中医临床经历组成了治疗ITP的中医方剂紫癜方。该方由10味中药组成：黄芪、制大黄、人参、当归、桃仁、阿胶、白芍、生地、仙鹤草和甘草。全方配伍有补气养血，活血止血之功。本次研究比拟了两种制备方法提取的紫癜方对ITP模型小鼠的治疗作用。结果发现，实验完毕时紫癜水提组和紫癜工艺组小鼠血小板计数较血美安组小鼠明显升高，但是较醋酸泼尼松组小鼠明显降低，仍然没有恢复到正常程度；紫癜水提组和紫癜工艺组小鼠血小板计数比拟没有显著性差异。提示紫癜方的水提取物具有升高ITP模型小鼠血小