临床免疫学检验：第17章 补体检测及应用

1、第十七章 补体检测及应用(Chapter 17 Detection of complement and its application)临床免疫学检验第十七章 补体检测及应用第一节 补体的生物学特性及功能第二节 血清总补体活性测定第三节 补体结合试验第四节 单个补体成分测定第五节 补体测定的临床应用第一节 补体的生物学特性及功能一、补体的理化性质补体是存在于人和动物血清、组织液及某些细胞膜上的一组经激活后具有酶活性的蛋白质理化性质合成化学组成含量易灭活第一节 补体的生物学特性及功能二、补体的激活第一节 补体的生物学特性及功能三、补体的生物学功能溶解细胞、细菌和病毒调理作用清除免疫复合物第一节

2、补体的生物学特性及功能三、补体的生物学功能溶解细胞、细菌和病毒调理作用清除免疫复合物介导炎症反应免疫调节作用第二节 血清总补体活性测定一、CH50测定原理CH50(50% complement hemolysis): 50%溶血引起50%溶血所需要的最小补体量为一个CH50单位第二节 血清总补体活性测定二、CH50测定方法要点及结果判定调制绵羊红细胞悬液2%SRBC, 无溶血溶血素2U缓冲液pH7.2-7.4磷酸盐缓冲液或巴比妥缓冲液配置50%溶血标准管100%溶血管: 2%SRBC 0.5ml+蒸馏水 2.0ml 50%溶血标准管:100%溶血管+蒸馏水 2.5ml正式试验第二节 血清总补体

3、活性测定二、CH50测定方法要点及结果判定管号1:20稀释血清缓冲液溶血素2%SRBC50%溶血总补体值（U/ml）10.10 1.40 0.50 0.50 20020.15 1.35 0.50 0.50 13330.20 1.30 0.50 0.50 10040.25 1.25 0.50 0.50 8050.30 1.20 0.50 0.50 66.560.35 1.15 0.50 0.50 57.170.40 1.10 0.50 0.50 5080.45 1.05 0.50 0.50 44.490.50 1.00 0.50 0.50 40100.00 1.50 0.50 0.50 不溶血第

4、二节 血清总补体活性测定二、CH50测定方法要点及结果判定调制绵羊红细胞悬液溶血素缓冲液配置50%溶血标准管正式试验50%溶血总补体活性的计算CH50(U/ml)=(1/终点管稀释血清的用量)血清稀释度第二节 血清总补体活性测定三、方法评价和临床意义优点简便, 快速缺点敏感度低, 重复性差临床意义补体的缺陷自身免疫病肝脏疾病或营养不良第三节 补体结合试验一、试验原理反应系统已知抗原(或抗体), 待测抗体(或抗原)指示系统绵羊红细胞, 溶血素补体系统新鲜豚鼠血清第三节 补体结合试验一、试验原理反应系统已知抗原(或抗体), 待测抗体(或抗原)指示系统绵羊红细胞, 溶血素补体系统新鲜豚鼠血清第三节 补体结合试验二、结果判定阳性不溶血阴性溶血华氏反应第三节 补体结合试验三、方法评价优点敏感度高、特异性强、结果容易观察、可测范围广缺点难以标准化第四节 单个补体成分测定一、免疫溶血法二、免疫化学法C3、C4 、C1q 、B因子和C1抑制物自动化免疫比浊法第五节 补体测定的临床应用临床应用机体免疫系统的功能评价疾病的诊断与治疗流行病学调查HLA分型的补体依赖性细胞毒试验(complement-dependent celluar cytotoxicity, CDCC)总结掌握CH50测定的原理、方法