反相高效液相色谱法测定当归调经冲剂中阿魏酸的含量

1、反相高效液相色谱法测定当归调经冲剂中阿魏酸的含量【摘要】目的：建立以反相高效液相色谱法测定当归调经冲剂中阿魏酸含量的方法。方法：色谱柱为AgillentDS18柱4.6250，5，流动相为甲醇-0.1%磷酸37:63，检测波长为316n，柱温为25，流速为1.0l/in。结果：阿魏酸进样量在0.02320.2552g内线性关系良好r=0.9999，平均加样回收率为99.40%RSD=1.60%,n=5。结论：本法简便、准确、专属性强，重现性好，可用于该制剂的质量控制。【关键词】当归调经冲剂阿魏酸反相高效液相色谱DeterinatinfFeruliaidinDangguitiajingGranu

2、lesbyRP-HPL【Abstrat】bjetive:TestablishaRP-HPLethdfrdeterinatinfferuliaidinDangguitiajinggranules.ethds:HPLAgillentDS18(4.6250,5)asusedandethl-0.1%H3P4(37:63)asbliephase.Thedetetiveavelengthassetat316n,thelunteperatureasat25,andtheflrateas1.0l/in.Results:Feruliaidshedagdlinearityintherangef0.02320.25

3、52g(r=0.9999).Theaveragereveryas99.40%,RSDas1.60%(n=5).nlusin:Thissiple,aurateandspeifiethdanbeusedfrqualityntrlfDangguitiajinggranules.【Keyrds】DangguitiajingGranules;feruliaid;RP-HPL当归调经冲剂由当归、熟地黄、川芎、党参等七味中药组成，补血助气，调经。用于贫血衰弱，病后、产后血虚以及月经不调、痛经，为妇科临床常用中成药。卫生部药品标准中药成方制剂第十册S3-B-1925-95中仅有针对挥发油的理化鉴别工程，无定性

4、及含量测定工程1，且目前也尚无此方面的文献报道，为进步原制剂的质量标准，笔者采用反相高效液相色谱法对当归调经冲剂中的阿魏酸进展了含量测定，建立了可靠、准确、专属性强的质量控制方法。1仪器和试药1.1仪器HP1100高效液相色谱仪，HPheStatin色谱工作站；赛多利斯万分之一电子天平德国；超声波清洗机江苏昆山超声仪器。1.2试药阿魏酸对照品供含量测定用，由中国药品生物制品检定所提供，批号：0773-9910，当归调经冲剂及阴性对照样品本院制剂室提供，批号070105、070111、070119。甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其余化学试剂均为分析纯。2方法与结果242.1色谱条件与系统适应性试验色

5、谱柱：Agillent184.6250，5；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液37:63；检测波长：316n；柱温：25；流速：1.0l/in，理论塔板数按阿魏酸峰计算应不低于3000。结果阿魏酸峰与其它化合物峰别离良好，色谱图见图1。2.2对照品溶液的制备精细称取枯燥至恒重的阿魏酸对照品适量，加70%甲醇溶解制成浓度为23.2g/l的溶液，即得。2.3供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，研细，取约1.0g，精细称定，置锥形瓶中，精细加70%甲醇溶液20l，密塞，摇匀，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜0.45滤过，取续滤液，即得。2.4阴性样品

6、溶液的制备按处方工艺制备不含当归和川芎的阴性样品，按2.3项一样方法制成阴性样品溶液，即得。2.5空白干扰试验按2.1项下的色谱条件，精细汲取上述对照品、供试品、阴性样品溶液各10l进样测定，结果阴性样品在与供试品和阿魏酸对照品一样保存时间处，无干扰峰出现，故可以确定处方中其他药材成分对阿魏酸的含量测定不产生干扰，色谱图详见图1。2.6线性关系及标准曲线精细汲取对照品溶液1、3、5、7、9、11l，按2.1项下色谱条件测定峰面积，以峰面积A对进样量Xg进展线性回归，Y=6146.14x5.72，r=0.9999；阿魏酸在0.02320.2552g内线性关系良好。转贴于论文联盟.ll.2.7精细

7、度试验精细汲取对照品溶液10l重复进样6次，按2.1项下色谱条件测定峰面积，结果RSD=0.56%，说明本法精细度良好。2.8稳定性试验精细汲取供试品溶液10l，分别于0、2、4、8、12小时按2.1项下色谱条件测定5次，结果RSD=1.64%，说明供试品溶液于12小时内根本稳定。2.9重现性试验取同一批样品批号：0701055份，按2.3项下方法制备供试品溶液，进样10l，并按2.1项下色谱条件测定，结果平均含量为0.3462g/g，RSD=1.12%，说明本法重现性良好。2.10加样加收试验取含量的当归调经冲剂粉末约0.5g批号：070105，精细称定，分别精细参加一定量的阿魏酸对照品，进

8、样10l，按2.3项下方法处理，并按2.1项下色谱条件测定，结果详见表1。表1加样回收率试验略2.11样品中阿魏酸含量测定取3批样品，按2.3项下方法制备供试品溶液，并按2.1项下的色谱方法对三批样品的阿魏酸含量进展测定，结果见表2表2样品中阿魏酸的含量测定结果略3讨论方中当归为君药，川芎为臣药，而阿魏酸为当归和川芎的主要有效成分，现代药理研究说明，阿魏酸具有稳定红细胞膜，抑制补体3bab与红细胞膜的结合，降低补体及H等引起的溶血作用；参与巨噬细胞、淋巴细胞的激活，从而分泌较高活性的红系造血调控因子，促进红系造血。与当归调经冲剂的成效相一致，故将阿魏酸作为该制剂的质量控制指标科学、合理。阿魏酸

9、可溶于甲醇、乙醇等，故对不同提取溶媒甲醇、无水乙醇、70%甲醇进展了考察，结果采用70%甲醇提取效率最高，同时对阿魏酸提取方法索氏提娶超声提取及回流提取及提取时间等影响因素进展了考察，发现对该制剂来说，药典所采用的回流法4提取效果不如超声法，且仅需20分钟即可超声提取完全，极大地简化了操作步骤。本品药味较多，成分复杂，主要有效成分阿魏酸呈酸性，在中性流动相中易发生离解，使含量偏低且拖尾严重，故须采用离子抑制技术。通过在流动相中参加一定量的酸来抑制拖尾，曾尝试对不同配比的甲醇-磷酸溶液以及甲醇-乙酸溶液洗脱系统进展了考察，经发复优化，结果阿魏酸在本色谱条件下别离效果较好，且空白无干扰，重现性良好。【参考文献】1国家药典委员会，编卫生部药品标准中药成方制剂第十册北京：化学工业出版社，2001：552赵建平，张玲，张美玲HPL测定风湿宁胶囊中阿魏酸的含量J中成药，2022，2612：10803谢秉湘，陈静高