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文档简介
1、课程名称:微生物学检验技术 授课专业:医学检验 学时:2学时实验五细菌的生长现象和代谢产物的观察一、实验目的掌握观察菌落的方法,细菌在固体、半固体、液体培养基上的生长现象及 意义;熟悉鉴别细菌常用的生化反应实验原理、方法和结果判断。二实验物品菌种:金葡、白葡、柠葡、大肠杆菌、枯草杆菌 Culture media :葡萄糖发酵管 乳糖发酵管 蛋白腺水试剂:靛基质试剂三、实验内容 细菌在固体培养基上的生长现象菌落:接种的细菌适当的分开,经一段时间培养后,由1个细菌生长繁殖而形成单一的肉眼可见的细菌集团。菌苔:当细菌在培养基表面密集生长时,多个菌落融合在一起。菌种大小形状突起边缘表面透明度颜色葡萄球
2、菌中等圆形凸起整齐光滑不透明白色枯草杆菌较大圆形扁平不整齐粗糙不透明灰白色菌落的描述:大小、形状、突起、边缘、表面、透明度、粘度葡萄球菌光滑型菌落(S)枯草杆菌粗糙型菌落(R)细菌在液体培养基中的生长现象葡萄球菌:混浊生长为兼性厌氧菌,细菌向四周均匀扩散,出现肉眼可见均匀的混浊生长。枯草杆菌:菌膜为专性需氧菌,多生长在液体的表面而形成菌膜。链球菌:沉淀链球菌在生长过程中结成链状而增加了细菌本身的重力,由于重力的作用下 沉而形成沉淀。 细菌在半固体培养基中的生长现象:可观察细菌的动力葡萄球菌:沿穿刺线生长(穿刺线清晰);动力阴性、无鞭毛,培养基清亮枯草杆菌:沿穿刺线扩散生长(穿刺线模糊);动力阳
3、性、有鞭毛,培养基混浊 细菌代谢产物的检查:鉴别细菌菌名匍萄糖发酵乳糖发酵靛基质试验硫化氢试验大肠杆菌+ O+ O+-伤寒杆菌+-+附:各种生化试验原理单糖发酵试验:细菌分解发酵单糖,可产生酸或气;酸使培养基中的酸性复红变成红色,为阳性。靛基质试验:有些细菌含有色氨酸酶,能分解蛋白腺水中的色氨酸,生成无 色的靛基质(又称吲哚),与滴加的靛基质试剂(对二甲基氨基苯甲醛)生成玫 瑰红化合物,为靛基质试验阳性。3 . H2S试验:有些细菌能分解培养基中含硫氨基酸生成H2S,遇到培养基中的亚铁离子,可生成黑色的沉淀,为H2S试验阳性。记录细菌的生长、生化反应结果;并说明生化反应的原理。五、实验准备葡萄糖发酵管:接种大肠杆菌12支;接种伤寒杆菌12支乳糖发酵管:接种大肠杆菌12支;接种伤寒杆菌12支硫化氢:阳性12支,阴性12支靛基质试剂:2瓶/教室六、实验总结:糖发酵管应做阴性对照管;靛基质实验可在肉膏
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