实验3 毛细管柱

1、实验3毛细管柱-气相色谱法测定食品中脱氢乙酸脱氢乙酸(DHA)是广谱防腐剂，特别对霉菌和酵母的抑菌能力强, 为苯甲酸钠的210倍。我国的食品添加剂使用卫生标准GB2760-2007中规定脱氢乙酸及其钠盐在酱菜、发酵的豆制品等中最大 使用量为0.3 g - kg-i,在糕点、馅料等中最大使用量为0.5 gkg-i。我 国市场上很多食品中发现有脱氢乙酸，而且有过量使用和超范围使用 的现象。目前我国对脱氢乙酸的标准检测方法为气相色谱法和液相 色谱法等。采用苯甲酸作为分析保护剂，用毛细管柱-气相色谱法测定食品 中脱氢乙酸的含量。加入保护剂提高了方法的灵敏度和重复性。方 法操作简单、检出限低、重复性好,

2、节省有机溶剂，具有良好的应用前 景，同时分析保护剂的使用也为极性物质进行气相色谱分析提供了参 考。脱氢乙酸分子能够发生式(1)所示的烯醇式重排而显弱酸性，不加 保护剂时,脱氢乙酸很容易在气相色谱系统中被吸附，甚至20 mg L-i 标准溶液也不出峰或严重拖尾。1试验部分1.1仪器与试剂HP 6890气相色谱仪,配火焰离子化检测器。脱氢乙酸标准储备 溶液:称取脱氢乙酸(纯度不低于98.0%) 0.250 0 g,置于10 mL容量瓶 中，用乙腊定容至刻度，配成质量浓度为25 g L-1标准储备溶液,4C下 保存。脱氢乙酸标准溶液:取标准储备溶液2.0 mL置于50 mL容量瓶 中，用乙腊定容至刻

3、度，配成1 000 mg L-1标准溶液。脱氢乙酸标准工作溶液:使用前用脱氢乙酸标准溶液稀释配制， 溶液中含苯甲酸溶液2 g L-1, 2%(体积分数,下同)乙酸溶液。苯甲酸溶液:称取苯甲酸0.500 g置于带磨口的10 mL刻度管中, 用乙腊定容至10 mL,配成50 g L-1苯甲酸溶液。乙腊为色谱纯，其他试剂均为分析纯。无水硫酸镁在使用前于 550C烘4 h;试验用水为超纯水。实验样品：添加了脱氢乙酸及其钠盐的酱菜或发酵的豆制品。1.2色谱条件色谱柱:HP-5弹性石英毛细管柱(0.32 mmX30 m,0.25 u m);载气 为氮气，流量为2.5 mL min-1,恒流模式;尾吹气为氮

4、气，流量为40 mL min-1;检测器温度为280C,空气流量为400 mL min-1,氢气流量 为40 mL min-1;进样口温度为230C,不分流进样,0.75 min后打开分 流阀，进样量为1u L;柱温升温程序:初始温度70C,以10C min-1速 率升至170C;后运行:270C保持5 min。采用外标法定量。在色谱条件下进行测定，脱氢乙酸的质量浓度在2.51000 mg L1 范围内与峰面积呈线性关系，方法的检出限(3S/N)为2.0 mg L1,方法的测定下限(10S/N)为 0.005 g kg-i。1.3 试验方法1.3.1标准曲线用乙腊配制 2.5, 5.0, 20

5、.0, 100.0, 500.0, 1 000 mg L-1 脱氢乙酸标 准溶液，使溶液中苯甲酸质量浓度为2 gL-1,乙酸体积分数为2 %。以 脱氢乙酸浓度或质量为横坐标，峰面积为纵坐标，做标准曲线，并 进行线性回归，求出线性回归方程和相关系数。含水较少的样品（糕点、馅料等）：称取样品5.000 g置于50 mL 塑料离心管中，加入用乙腊饱和的氯化钠溶液10 mL,氯化钠固体45 g,冰乙酸200 P L,乙腊5 mL,剧烈摇振12 min,以4 500 r min-1转 速离心3 min,取上层乙腊溶液2.00 mL置于10 mL离心管中，加入50 g L-1苯甲酸溶液80 PL和无水硫酸镁300 mg,涡旋30 s,以4 000 r min-1转速离心2 min,取上清液用0.45 Pm滤膜过滤，取滤液进行 测定。含水较多的样品（泡菜、果汁等）：称取样品10.000 g置于50 mL 塑料离心管中，加入冰乙酸250 PL,乙腊10 mL,混匀后加入无水硫酸 镁4 g和氯化钠1 g,立即剧烈摇振12 min,以4 500 r min-1转速离 心3 min,取上层乙腊溶液2.00 mL置于10 mL离心管中，加入50 g L-1苯甲酸溶液80 PL和无水硫酸镁30