周围环境微生物观察-导论实验

1、微生物分离与观察陈金春 麻彩萍清华大学微生物学实验室现代生物学导论实验1微生物无所不在虽然我们不能直接看到微生物，可是它在地球上几乎无处不有，无孔不入 . 微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各种微生物生长繁殖的大本营.空气里悬浮着无数细小的尘埃和水滴，它们是微生物在空气中的藏身之地。各种水域中也有无数的微生物。居民区附近的河水和浅井水容易受到各种污染，水中的微生物就比较多。大湖和海水中，微生物较少。 从人和动植物的表皮到人和动物的下消化道，也都经常生活着大量的微生物。2微生物无所不在厨房抹布(含有细菌、真菌菌丝和酵母菌)厨房砧板表面(含有杆菌、丝状菌和真菌)3实验目的和内容熟悉常用微生物培养基

2、;掌握微生物的分离,纯化;用平板划线法和稀释法分离微生物;认识微生物存在的普遍性.4实验仪器,材料和用具实验材料:菌源:土样10g培养基:牛肉膏蛋白胨培养基12个实验仪器:取液器:1000ul 、200ul各一支培养箱5实验仪器,材料和用具实验试剂:0.9% 无菌生理盐水 250ml三角瓶中装99ml生理盐水,每瓶加约20粒玻璃珠250ml三角瓶中99ml生理盐水,作100倍稀释用6实验仪器,材料和用具实验用具:平皿;涂棒;无菌200ul, 1000ul吸头;记号笔,酒精灯;7制作平板融化固体培养基，倒平板，每组10-12个。采用叠皿法制作平板。8实验步骤从土壤中分离微生物采土样:选择肥沃土壤

3、,去表层土,挖520cm深度的土壤数10g,装入烧杯,带回实验室;9实验步骤从土壤中分离微生物制备土壤稀释液;称取土样1.0g， 放入盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，用手振荡5min使土壤均匀分散成为土壤悬液（10-2）。用1ml的无菌吸头从中吸取1ml土壤悬液，注入事先分装有99ml无菌水的试管中，吹吸3次，振荡均匀（10-4）。10实验步骤从土壤中分离微生物涂布用一支的无菌吸头，吸取10-4浓度土壤稀释液100ul，较均匀地放入已写好稀释度的牛肉蛋白胨培养基平板上，用灭过菌的无菌玻璃涂棒涂匀。每个同学1个平板。11实验步骤从土壤中分离微生物培养将牛肉蛋白胨培养基平板倒置于350C温

4、箱中培养24h；统计所长出的菌落数；12实验步骤从土壤中分离微生物菌落计数 有较大片菌苔生长时,弃用,以无片菌苔生长的平皿计数; 若成片菌苔大小不到培养皿的一半,其余一半分布均匀,将此一半计数*2; 13实验步骤从土壤中分离微生物菌落计数土壤微生物含量=平板平均菌落数x105 14实验步骤周围环境中微生物的观察在牛肉蛋白胨平板上作如下实验：分别用未洗过的手指头,自来水洗过的手指头，用肥皂或洗手液洗过的手指头(不用毛巾擦)在平板是涂抹（用力一致）;洗手方式与我们平时一样或更仔细一些；最后用75%酒精棉球擦手指头消毒后涂抹在平板上。用正在使用的毛巾,旧纸币在培养基上拖动;放置一根头发，用无菌涂棒压紧在培养基表面上;或抖抖你的秀发，让灰尘掉到培养基上；用无菌接种环分别沾一环自来水和河水在平板 上划线；用无菌牙签取一点牙垢在培养基上划线；打开培养皿置实验台上（空气中）10min;按无菌操作要求在酒精灯火焰边打开皿盖1min.对着培养皿上的培养基咳嗽或打喷嚏。稍稍打开嘴唇压在培养基上，化验你的嘴唇上的细菌;取豆浆（0.1mL)涂平板以上用报纸包好倒置35-37培养箱里培养24小时观察结果;15结果16结果与讨论你所取的土壤中细菌