全自动固相萃取

1、全自动固相萃取-GC-MS/MS检测蔬菜中的 拟除虫菊酯类农药作者：赵军溪来源：现代食品2019年第17期赵军溪(淄博市疾病预防控制中心，山东？淄博?255026)Zhao Junxi(Zibo Center for Disease Control and Prevention, Zibo?255026, China)摘?要：采用全自动固相萃取-气相色谱-三重四极杆质谱联用(GC-MS/MS )检测技术，建立 蔬菜中拟除虫菊酯类农药的测定方法。利用超声波辅助乙腈萃取，经过全自动固相萃取净化， 气相色谱-三重四极杆质谱检测。结果表明：实验浓度范围内，目标物浓度与峰面积线性关系良 好，相关系数在0

2、.999 20.999 6，检出限为1.5X10-36.0X10-3 mgkg-1； 7种拟除虫 菊酯组分的回收率在78.3%111.7%。该方法自动化程度高，灵敏度高，准确度高，适用于大 批量样品中拟除虫菊酯类农药的检测。关键词：拟除虫菊酯；蔬菜；GC-MS/MS；全自动固相萃取Abstract： To establish a method for the determination of pyrethroid pesticides in vegetables by automatic solid phase extraction-gas chromatography-triple quad

3、rupole mass spectrometry (GC-MS/MS). Ultrasonic-assisted acetonitrile extraction was carried out and purified by automatic solid phase extraction and gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry. Within the experimental concentration range, the linear relationship between target concentrat

4、ion and peak area was good. The correlation coefficient was between 0.999 2 and 0.999 6, and the detection limit was 1.5X10-36.0X10-3 mgkg-1.The recovery rate of the pyrethroid component is between 78.3% and 111.7%. This method has high degree of automation, high sensitivity and high accuracy, and i

5、s suitable for the detection of pyrethroid pesticides in large samples.Key words: Pyrethroid pesticides; Vegetable; GC-MS/MS; Automatic solid phase extraction中图分类号：TS255.7食品安全关乎社会稳定和每个人的健康。随着经济的发展，蔬菜水果等食品的消耗量逐渐 增加。种植户为了提高产量，存在过量使用农药的现象，控制蔬菜水果中农药的残留量十分必 要。目前，农药残留的检测方法包括气相色谱法1、液相色谱法2、气相色谱质谱法3及液 相色谱质谱法

6、4等。气相色谱-三重四极杆质谱具有高灵敏度、高选择性和好的抗干扰能力等 特点5，已成为农药残留研究中强有力的分析技术。农药检测过程中，尤其在固相萃取净化时， 操作人员暴露在有机溶剂环境中，对健康的危害很大。全自动固相萃取仪可以代替试验人员完 成净化过程，并能保证实验的平行性和准确性。本实验用全自动固相萃取平台，净化蔬菜中拟除虫菊酯类农药，优化了提取溶剂、超声提取时间，建立了全自动固相萃取-气相色谱-三重四 极杆质谱联用检测蔬菜中拟除虫菊酯类农药的方法。1?材料与方法1.1?实验仪器与试剂（1）仪器。Agilent 7010气相色谱三重四级杆串联质谱（美国Agilent Technologies

7、）； HP-5 MS 石英毛细管柱（30 mX250 nmX0.25 um,美国 Agilent Technologies）； KQ-250B 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；ST16R型高速离心机（美国ThermoFisher）；全Reeko Auto SPE-06C自动固相萃取仪（睿科集团股份有限公司）；CARB/NH2 （83.33 mgmLT ）固相萃取小柱。（2）试剂。色谱纯试剂：丙酮、乙腈；纯水；联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯 氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和漠氰菊酯浓度均为100 UgmLT，标准溶液定值单位均为农 业部环境保护科研检测所。1.2?色谱条件载气（He

8、）流速：1.0 mLmin-1 ；隔垫吹扫流量：3 mLmin-1 ；不分流进样；气化室温 度：280 C；离子源温度：230 C；传输线温度：280 C；进样量：1 uL；程序升温：初始 60 C,保持1 min ；以40 Cmin-1速度升至120 C保持0 min；再以5 Cmin-1速度升至280 C,保持0 min。1.3?质谱条件子离子选择：在子离子扫描（Daughter scan）模式下，扫描母离子碰撞后的子离子峰，选 取最强的作为该母离子的子离子。碰撞能量的优化：在多反应监测（Multiple reaction monitoring，MRM）模式下，保持其他实验条件不变，分别为

9、拟除虫菊酯单体在多个通道设定具 有不同的碰撞能量，选择响应峰最高的碰撞能量为该单体最终的反应碰撞能量。优化后的拟除 虫菊酯的多反应监测参数见表1。表1麟虫菊黜多反应监赡臆懒|甘染时间.曲n阜虹,伐于H棉役吊|甲对哗的虬U1SIK飘.27 UDi酒如雅31J052O8.181（5）,成侄投昕, 127.0 -54.35鹿讷I i ID）,1担芍出167.】践1僧）.88.卯4D）政婀,93璀）1.4?样品处理样品提取：称取已粉碎蔬菜样品10.0 g左右，加入乙腈25 mL摇匀，超声萃取10 min。加入2 g NaCl和2 g无水MgSO4，涡旋10 s。取15 mL上清液在40 C水浴中氮吹至

10、近干，加入2 mL丙酮/二氯甲烷溶液复溶，待净化。全自动固相萃取仪净化：于固相萃取仪上固定好样品管、接收管和固相萃取小柱。用丙酮/ 二氯甲烷（1：1）5 mL以5 mL-min-1的速度淋洗萃取小柱。吸取样品上样，同时接收洗脱液。 用5 mL丙酮/二氯甲烷（1：1）清洗样品管，并清洗液过固相萃取柱；再用5 mL丙酮/二氯甲 烷（1：1）淋洗固相萃取柱，气推一次。洗脱液用氮气吹至近干，加正己烷定容至1.0 mL，取 1.0 UL进样测定。2?结果与讨论2.1?超声萃取时间的优化萃取时间同样对萃取效率会产生很大的影响。本研究同时考察了不同萃取时间对萃取效率 的影响，实验分别考察了 5、10、20、

11、30 min和40 min的超声萃取效果，提取时间大于10 min以后，回收率没有明显变化，而且由于提取时间的延长，提取液中杂质含量增加，样品重 现性受到影响。因此本实验选择提取时间为10 min，既能保证良好的提取效果和较少的杂质干 扰，又节省处理时间。2.2?标准曲线及检出限用丙酮为溶剂，配制拟除虫菊酯类农药标准系列溶液，按最佳分析条件测定标准溶液，标 准的总离子流图如图1所示。实验浓度范围内，目标物浓度与峰面积线性关系良好，相关系数 在0.999 20.999 6，试验数据见表2。以仪器3倍噪声值表示方法的检出限，按10.0 g取样 量计算最低检出浓度，检出限为1.5X10-36.0X1

12、0-3 mgkg-1，结果见表2。Bi或果做欢2.3?方法回收率和精密度以白菜空白样品为基质做加标回收实验，加标浓度为0.01 mgkgT和0.1 mgkgT。同 实验样品前处理和检测方法处理并计算回收率。每个加标做6个平行样，计算平均回收率及相 对标准偏差，其结果见表2。7种拟除虫菊酯组分的回收率在78.3%111.7%，满足分析要求； 平行样的相对偏差满足检测结果。E茂比晔麟*硒III MMM0 惭衍 IIWM.D mijftj if那 机WW 娜HI： U构 11脚山 IffllW 5J舟 1TJJI - U) 1991J涉我 Ji& II辿5 miJU 4JJtel H)11、IJ 0

13、JB13?结论本实验用全自动固相萃取平台，净化蔬菜中拟除虫菊酯类农药，优化了提取溶剂、超声提 取时间，建立了全自动固相萃取-气相色谱-三重四极杆质谱联用检测蔬菜中拟除虫菊酯类农药 的方法。实验浓度范围内，目标物浓度与峰面积线性关系良好，相关系数在0.999 20.999 6，检出限为 1.5X10-36.0X10-3 mgkg-1；7种拟除虫菊酯组分的回收率在78.3%111.7%。该方法自动化程度高，灵敏度高，准确度 高，适用于大批量样品中拟除虫菊酯类农药的检测。参考文献：李继革，王玉飞，范建中，等.固相萃取-双柱双检测器-气相色谱法测定蔬菜中55种有 机磷农药残留J.中国卫生检验，2010，20 (11)： 2711-2716.王?敏，李广益，宋丰江，等.高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药J.食品研 究与开发，2018，39 (1)： 122-126.邢?燕，曹楷华，刘玉栋，等