文件局历史培训27.1.quality control stratefy and setting specification

1、单抗产品质量控制策略和标准设立Monoclonal Antibody Product Quality Control Strategy and Setting SpecificationsConnie Lu,.DRoche, Global Biologic Quality ControlJuly 2, 2015大纲控制什么单克隆抗体结构和变异体抗体质量属性如何确定关键质量属性(CQA)在哪里控制总体控制策略案例如何设置控制限临床开发阶段的质量标准产品质量标准2-Do Not Copy or Distribute Without Authorization单克隆抗体结构轻链重链 二硫键Q = 谷

2、氨酸盐K = 赖氨酸没有转译后修饰没有降解KK3-Do Not Copy or Distribute Without Authorization单克隆抗体变异体常见的转译后修饰C端赖氨酸被羧肽酶切除N端形成谷氨酸盐= G0, G1, G2, SA, G0-F等的糖基化GGGGG= 糖化常见降解途径D= 脱酰胺= 氧化SA聚合裂解DDDDK4-Do Not Copy or Distribute Without AuthorizationYYY抗体产品质量属性5-Do Not Copy or Distribute Without Authorization产品相关属性工艺相关属性分子变异体电荷变异

3、体巯基/二硫醚变异体糖化变异体氧化变异体大小变异体序列变异体工艺相关杂质宿主细 白宿主细胞DNA脱落蛋白A细胞培养相关杂质(如：胰岛素, 甲氨蝶呤，聚丙二醇与环氧乙烷加聚物，消泡剂）组份辅料 / 渗透压蛋白浓度外观微粒含水量 (冻干制剂)环境和外来因子细菌污染真菌污染支原体 内毒素关键质量属性关键质量属性 (CQAs)?为了确保达到所需的产品质量，而应当在合适的限度、范围、分布内的物理、化学、生物学或微生物学性质或特性。”ICH Q8 R1如何确定关键质量属性?表征和确认知识风险评估: 严重性 = 影响 x 不确定性- 如果某个质量属性的严重性分数 12, 那么该属性为CQA (方法).的6-

4、Do Not Copy or Distribute Without AuthorizationCQA评估工具：影响度表PK：浓度/时间曲线下面积的药代动力学评估。如果不能获得某一变异体的PK数据，则使用相对FcRn结合测定法PD：如果有生物标记物，则进行药效学评估-Do Not Copy or Distribute Without Authorization影响&等级生物活性PK / PD增加的免疫原性风险安全性极高(20)变化100%PK有40%变化可检出抗药抗体（ATA），致使安全性受到限制不可逆的不良事件（AE）高(16)40%-100%变化20%-40%变化、对PD有影响可检出ATA，

5、致使有效性受到限制可逆的AE中等(12)20%-40%变化20%-40%变化、对PD没有影响可检出ATA、但影响是可控的易控制的AE低(4)变化20%变化20%、对PD没有影响可检出ATA 、产生极小影响次要、一过性AE无(2)无变化对PK 或PD均没有影响没有检出抗药抗体、或检出抗体但无相关体内效应无不良事件不确定性表-Do Not Copy or Distribute Without Authorization等级不确定性产品变异体与工艺杂质7极高不了解（新变异体或属性）5高有关相关分子变异体或属性的参考文献3中等此分子的非临床或体外研究数据。相似类别分子的非临床、体外研究或临床研究数据2

6、低变异体已存在于临床试验物质中。1极低此分子特殊变异体的影响已在临床试验中确立根据严重性分数确定CQA影响 X不确定性 = 严重性低不确定性高高低严重性分数表关键质量属性非CQA-Do Not Copy or Distribute Without Authorization12357202040601008011212122436608444812202822461014分子排阻色谱 (SEC)MainHMWS: 高分子量类型T=4T=0ks at 40CLMWS:低分子量类型HMWSLMWS00Time (min)10-Do Not Copy or Distribute Without Au

7、thorizationUV at 280 nmSEC用于检测单抗分子量分布，并且能检测出 HMWS和 LMWS由于高温而发生的变化 - 具有稳定性指针。实例：高分子量产物（HMWS）由于影响生物活性，通过SEC测得的HMWS为CQA另外，HMWS经常被认为具有免疫原性-Do Not Copy or Distribute Without AuthorizationPK影响分数很低（4），根据FcRn测定（73/80 = 91%）根据体外研究数据表明，不确定性分数（3）为中等，复合：严重性分数为12 (= 非CQA)影响分数很高（16），因为生物活性降低 (46/103 = 45%)根据体外研究数

8、据，不确定性分数（3）为中等，复合：严重性分数为48 (= CQA)样品效价FcRn结合SEC 分离前样品10380主峰10487HMWS4673大纲在哪里控制总体控制策略案例12-Do Not Copy or Distribute Without Authorization总体控制策略通过检验来控制“质量”CQA工艺控制质量属性CQA评估“一致性”非CQA* PALM ：批准后生命周期管理计划-Do Not Copy or Distribute Without Authorization扩展表征、可比性评估、 PALM 计划（如：C端赖氨酸变异体）工艺表征、工艺验证、 PALM 计划（如：宿

9、主细白）质量标准：过程、 放行、 稳定性在哪里需要检测CQA?主要考虑:哪些工艺步骤影响这个 CQA?这个CQA 在期间发生改变吗?14-Do Not Copy or Distribute Without Authorization制剂放行制剂稳定性原液放行原液稳定性过程控制案例1 : HMWS的控制策略思考:哪些工艺步骤会影响HMWS?原液工艺的多个步骤制剂工艺步骤HMWS 在期间会发生变化吗?是的, HMWS在调件和强制降解条件都会增加15-Do Not Copy or Distribute Without Authorization在原液和制剂的放行和稳定性检验中都检测HMWS案例2 :

10、 宿主细白残留的控制策略思考:白?哪些工艺步骤会影响宿主细细胞培养条件会影响宿主细白水平DS生产的纯化工艺会影响宿主细白残留水平制剂过程不会影响宿主细白残留水平期间会发生变化吗？宿主细白残留水平在不会16-Do Not Copy or Distribute Without Authorization在原液生产过程中需要测试宿主细白残留在制剂放行和稳定性中不需要测试宿主细白残留案例2 : 宿主细白残留的控制策略哪些步骤对检测出HCP有最高的敏感性?HCP (ng/mg)8000004000200在超滤后测试HCP20101017-Do Not Copy or Distribute Without

11、 Authorization原液(150mg/mL)辅料超滤 (180mg/mL)ChP 2015:如验证结果证明工艺相关杂质已得到有效的控制或去除，并达到可接受的水平，相关残留物的检定项目可不列入成品的常规放行检定中柱3柱 2柱 1细胞培养收获超滤物有最高的蛋白浓度在超滤步骤后宿主蛋白残留不会在下降后加的辅料可能会影响宿主蛋白残留的测定案例3: 冻干产品的装量均一性 (i.e. 重量差异)哪些步骤会影响装量均一性?- 根据ChP 2010 Vol. III 附录IA测量5瓶的冻干干饼的最大重量差异固体: 活性药品和辅料来源: 灌装来源: 灌装控制: 冻干控制: 灌装量18-Do Not Co

12、py or Distribute Without Authorization液体: 水在冻干的干饼中?案例3: 冻干产品的装量均一性 (i.e. 重量差异)过程中装量会发生变化吗?在药品19-Do Not Copy or Distribute Without Authorization在过程中没有任何变化没有东西进出无菌, 密封容器案例3: 冻干制品的装量均一性 (即：重量差异)无菌灌装及加塞最终的成品冻干无菌药液灌入除热源的瓶子中并半加塞轧盖并2-8C在冻干并全压塞QC 放行检验过程控制装量检测每15分钟人工检测一次装量直至灌装到约2,000瓶, 然后每30分钟检测一次。 最终的检测包括灌装

13、的最后一瓶含水量20-Do Not Copy or Distribute Without Authorization解冻冻存原液解冻并在2-8C灌装前除菌过滤的原液除菌过滤到灌装储罐中大纲如何设置控制限21-Do Not Copy or Distribute Without AuthorizationQ6B：质量标准：生物技术产品/生物制品的检查方法和限度（ICH，1999）质量标准是指一系列检查、分析方法参考以及适当限度，该限度包括所述检查的数值限度、范围或其他标准。质量标准对原料药、制剂或其他生产阶段的原料制定了一套标准，只有符合这些标准才可以认为其适用于预期用途。II. 质量标准制定中考

14、虑的原则（2.0）A.B.C.D.E.F.鉴定（2.1）.分析考虑（2.2）方法及其准确性工艺控制（2.3）工艺条件和限度药典标准（2.4）日最大摄入量放行限度与有效期限度（2.5）贮藏期间的稳定性统计学概念（2.6）数据分析-Do Not Copy or Distribute Without Authorization关键质量属性质量标准和限度质量标准类型：中间控制质量标准原料药和制剂的放行质量标准 原料药和制剂的有效期质量标准质量标准限度：为了获得批准，放行和有效期质量标准必须包含限度。如果需要收集数据以探索关键质量属性（CQA）和限度，则可能需要“”。如果未制定有效期标准，则放行标准适用

15、于整个有效期。有效期标准必须包含预期在生产、贮藏、准的执行需要获得充分的稳定性数据。和处理期间发生的变化。有效期标-Do Not Copy or Distribute Without Authorization大纲如何设置控制限临床开发阶段的质量标准24-Do Not Copy or Distribute Without Authorization临床开发阶段的质量标准I期研究阶段的质量标准必须确保安全性基于假定的关键质量属性（pCQA）pCQA 可能是CQA。oopCQA 。通过控制系统检查或鉴定检查基于临床前数据，“目标值”通常是指毒理学研究批次的数值。基于要求基于知识如果聚糖不参与药物的

16、作用机制，则不放入质量标准。效价测定法可以是结合测定法或基于细胞的测定法。由于稳定性数据，放行质量标准和有效期质量标准通常相同。25-Do Not Copy or Distribute Without Authorization临床开发阶段的质量标准II期研究阶段的质量标准根据下列方面，可能需要对I期研究阶段的质量标准作一些调整：I期研究和临床前研究数据的评价结果生产能力/生产经验的评价结果稳定性和鉴定数据生产工艺、处方或分析方法的任何计划变更o o oo26-Do Not Copy or Distribute Without Authorization临床开发阶段的质量标准II期研究阶段的制

17、剂质量标准变更举例：制剂由瓶装变更为预填充注射器：o增加注射器装置放行和稳定性检查方法制剂装量变更：oo改变内毒素限度改变容器内体积限度增加一种新方法控制CQA：o 在CoA中增加检查方法和限度27-Do Not Copy or Distribute Without Authorization临床开发阶段的质量标准III期研究阶段的质量标准必须接近质量标准应当最终确定检查方法，以用于上市后质量控制检查根据下列方面，予以完善II期研究阶段质量标准：o oo产品知识生产一致性和生产能力知识尽可能以“限度”代替 “”28-Do Not Copy or Distribute Without Autho

18、rizationIII期研究阶段原料药的SEC主峰质量标准举例II期研究阶段原料药的SEC质量标准设定为“主峰面积 95%”。工艺能力和方法变异性5次III期开发中试批次分析结果5次II期GMP生产批次分析结果3次I期GMP生产批次分析结果共有13个数据（K = 4.044），SEC主峰面积的平均值为99.0%，SD为0.2%。 SEC主峰面积的95/99容许区间下限（TI95/99 = 平均值 - K x SD）为98.2%。o o o oo拟定原料药放行标准为“主峰面积 97.0%”，以反映当前的产品特征、生产变异性和方法变异性。II期研究批次的稳定性研究SEC数据显示，制剂在-20oC的

19、条件下保存2年后，未发生降解。在制定原料药有效期质量标准时，拟定放行标准为“主峰面积 97.0%”。29-Do Not Copy or Distribute Without AuthorizationIII期研究阶段制剂的SEC主峰质量标准举例II期研究阶段制剂的放行和有效期SEC质量标准均设定为“主峰面积 95%”。III期研究阶段原料药的有效期质量标准将为“主峰面积 97.0%”。II期研究批次的稳定性研究SEC数据显示，制剂在5oC的条件下保存1年半后，主峰面积百分比（%）大约降低0.2%。稳定性研究SEC数据显示，在25oC/60%RH的加速贮藏条件下保存6个月后，主峰百分比大约降低0

20、.3%。拟定制剂的放行质量标准为“主峰面积 96.0%”。拟定制剂的有效期质量标准为“主峰面积 95.0%”。30-Do Not Copy or Distribute Without AuthorizationOutlineHow to Set Control LimitsSpecifications for BLA/MAA Filing31-Do Not Copy or Distribute Without Authorization大纲如何设置控制限产品的产品质量标准32-Do Not Copy or Distribute Without Authorization建立数据库数据库：临床前

21、和临床用批次产生的数据生产一致性证明所用批次产生的数据生产经验，包括生产地点和时间、规模、工艺版本及其在相应临床研究中的应用稳定性研究数据相关的研发数据相关的分析方法性能数据信息如果从毒理学研究到生物制品申请中间检查方法发生变更：使用经过验证的“商业化”方法重新检验相关批次的保留样品。-Do Not Copy or Distribute Without Authorization制定限度注：此图例证说明；具体时间、温度和降解速率均取决于具体分子。-Do Not Copy or Distribute Without Authorization检查结果时间（月）条件偏离，制剂在45下的降解制剂有效

22、期标准制剂放行标准室温贮藏期间，制剂在30 下的降解原料药有效期标准灌装/检查期间，原料药液体在25下的降解原料药放行标准加工期间，制剂在5下的降解在贮藏时-20下原料药的降解全过程有效期模型：HP-SEC单体%制定SEC限度举例原液生产经验：SEC分析方法变异性 ：SD = 0.1%毒理学研究批次（主峰99.0% ）最高剂量是目标值的3*倍含3% HMWS的产品安全含5% HMWS的产品安全知识*此数字会因产品而异。-Do Not Copy or Distribute Without Authorization原料药的SEC主峰面积（%）放行质量标准： 97.0%批次总数（毒理学研究+ I/II/III期研究 + 一致性研究）15SEC主峰面积（%）的平均值：98.9主峰面积（%）的标准偏差（SD）：0.22容许系数（K）：3.878SEC主峰面积（%）最小值：98.6SEC主峰面积（%）最大值：99.395/99 TI 下限（平均值 K x SD）：98.095/99 TI上限（平均值+ K x SD）：99.8制定