定量光导荧光技术评价含氟牙膏抑制早期龋损的效果

1、定量光导荧光技能评价含氟牙膏按捺早期龋损的结果【摘要】目的通过在体形状成牙釉质平滑面早期龋损的恒化器龋病模子,评价定量光导荧光技能反响平滑面早期龋损矿物质含量变革的结果。要领将30个牙釉质块开窗后分为3组,别离利用氟含量1450g/L的氟化钠牙膏、单氟磷酸钠牙膏和无氟牙膏的处置惩罚液处置惩罚,并在体外恒化器龋病模子中举行脱矿循环,定量光导荧光技能(QLF)阐发病损脱矿后的面积、荧光丧失和总荧光丧失量,激光扫描共聚焦显微镜(LS)阐发脱矿后矿物质含量变革。结果在体外恒化器龋病模子中,无氟组形成的病损面积较大,荧光丧失量较高,总荧光丧失量以10为底的对数值较大(P0.05),氟化钠组和单氟磷酸钠组

2、的差异无统计学意义(P0.05);激光共聚焦显微镜不雅察表现,脱矿循环中无氟组形成的病损在荧光面积、均匀荧光量和总荧光量3个参数上都显着高于其他两组,差异有统计学意义(P0.05)。QLF阐发与LS结果具有较好的相干性(r0.70)。结论2种氟浓度1450g/L的牙膏与无氟牙膏比力,具有显着的按捺牙釉质平滑面早期龋损脱矿的作用。QLF阐发结果可以或许客不雅的反响脱矿病损区矿物质含量的变革。【关键词】氟;牙膏;龋齿;牙釉质;荧光;显微镜查抄,共焦KEYRDS:fluride;tthpaste;dentalaries;dentalenael;fluresene;irpy,nfal含氟牙膏是如今天下

3、上利用最普及也是最重要的局部用氟防龋的要领。如今我国市售的含氟牙膏中利用的氟化物一样平常为氟化钠(NaF)和单氟磷酸钠(FP)。笔者通过在恒化器龋病模子中形成平滑面早期龋损,利用2种含差异氟化物的牙膏对其脱矿历程举行干预,并接纳定量光导荧光技能(QLF)和激光扫描共聚焦显微镜(LS)不雅察,评价QLF技能用于阐发早期龋损矿物质含量变革的本领。1质料与要领1.1质料变形链球菌(Streptusutans)AT25175,由华西口腔医学院口腔生物医学工程重点实行室提供。八通道蠕动泵及分派器(BT00-600型,保定兰格恒流泵);循环水浴箱(HX-1050型,北京博医康技能公司);磁力加热搅拌器(J

4、J-781型,江苏金坛振兴仪器厂);硬构造切片机(丹麦Struers公司);LS(TS-SP2型,德国LEia公司);QLF体系(荷兰Inspektr公司)。人工唾液:接纳人工唾液配方为生物膜改进造就基B-51:2.50g/L型猪胃黏卵白(Type,美国Siga公司);2.00g/L肽胨、1.00g/L胰酶剖析的酪卵白胨(美国Fluka公司);1.00g/L酵母提取物(英国xid公司);0.10g/L半胱氨酸盐酸盐(美国Siga公司);2.50g/L氯化钾;0.50g/L葡萄糖;0.114g/L磷酸氢二钾;0.20g/L磷酸二氢钾;8.5g/L蔗糖。以1l/LNaH溶液调解pH值至7.5,12

5、1,15Pa压力下灭菌15in。含氟牙膏处置惩罚液:无氟、含NaF、含FP的牙膏(氟含量均为1450g/L)别离与去离子水按14混淆匀称。1.2要领网络奇怪拔除的人类无龋双尖牙15颗,在体视显微镜下不雅察无龋损、裂纹、缺损和釉质白斑。分散冠根,去除牙冠外貌约莫100的表层釉质,并使之成为平滑的平面。用硬构造切片机将准备好的牙冠分为颊、舌两部门。在每个牙体构造块的釉质外貌用指甲油开窗,面积33。将上述构造块随机分为3组,每组10个样本,在龋病恒化器模子中别离接纳无氟、含NaF和含FP的处置惩罚液举行干预。将构造块置于含定量实行菌株的一连造就体系中,维持造就室内必然的循环流速模拟口内唾液的冲刷作用

6、,在体外环境下模拟平滑面早期龋损的形成2。变形链球菌经清醒、传代、生化断定后接种到恒化器模子,由蠕动泵分派进入一连造就室中,同时按菌液与奇怪造就基19(v/v)比例赐与奇怪的人工唾液。24h后制止接种细菌,继承赐与奇怪人工唾液。细菌生长到达不变后,将含NaF、FP和无氟的处置惩罚液别离中断参加一连造就室中,天天3次,每次1h,由蠕动泵操纵,一连5d至实行停顿。体外恒化器模子见图1。样本经丙酮洗濯,丙烯酸树脂包埋,暴露开窗区。0.55Pa压缩气氛吹干标本30s,拍摄标本的荧光图像,储存于电脑,QLF200g软件阐发图像,阐发历程接纳盲法,设置Q(荧光丧失量)值变革5%为病损阈值。硬构造切片机将牙

7、齿标本切成约300厚的牙片,37、奇怪配制的罗丹明B(0.1l/L)染色1h,吹干,中性甘油封固,LS不雅察牙体构造的荧光引发环境。1.3统计学处置惩罚阐发QLF200g软件和Laserpix软件得出3组病损的荧光面积、荧光丧失和总荧光丧失量的差异,盘算QLF阐发结果与LS参数的相干性,评价QLF的诊断效能。设查验水准0.05。由于Q的漫衍呈显着的偏态漫衍,统计时将其举行以10为底的对数转换。2结果2.1肉眼不雅察无氟组釉质外貌的开窗区失去光芒,出现白垩色病变,涂布指甲油地区釉质外貌有光芒,未见颜色或形态的改变;别的两组样本釉质外貌开窗区和涂布指甲油的地区釉质未见显着的颜色或形态改变。2.2Q

8、LF荧光照片及结果阐发一连造就5d后,3组牙釉质块外貌在体外恒化器龋病模子中均形成差异程度的脱矿病损,在QLF荧光照片中表示为病损区荧光强度的丧失(图2)。无氟组牙釉质外貌形成的病损面积较大,荧光丧失较严峻。在体外恒化器龋病模子中,3组标本外貌均形成了差异程度的早期龋病损。此中无氟组病损与其他两组比力,病损面积较大,荧光丧失值较高,总荧光丧失量的对数值较大。3组差异有统计学意义,但NaF和FP组差异无统计学意义(P0.05,表1)。表13组病损面积、均匀荧光丧失和LgQ值略2.3LS不雅察及软件阐发NaF组和FP组在体外模子中形成的病损经罗丹明B染色后引发的荧光强度较无氟组显着较弱,荧光范畴也

9、显着较无氟组小(图3)。无氟组形成病损在荧光面积、均匀荧光量和总荧光量3个参数上都显着高于其他2组,差异有统计学意义,而NaF组和FP组在荧光面积、均匀荧光量和总荧光量3个方面的差异无统计学意义(P0.05,表2)。表23组在模子中形成的脱矿病损的LS丈量参数略2.4QLF与LS结果的相干性阐发3讨论3.1恒化器龋病模子的长处恒化器模子能在体形状成一种与体内近似的口腔生态环境,调控细菌的生长代谢条件,使之既具有与天然环境的同等性,又具有尺度化和可调控性的明显长处3，不但可用于研究种种致龋因素的作用和龋病病变的特性,还可用于断定防龋药物的效能。黄正蔚等利用与本实行雷同的恒化器模子在体外环境中形成

10、了相似于天然釉质龋损的病变,并充实证实白该模子的不变性和重复性4。3.2QLF及其上风QLF是比年来国际上研究开拓的一种诊断早期龋损的便携式技能装备,其技能底子源于荧光技能。牙体构造在单色光的照耀下可以或许被引发出差异光谱的荧光,而正常牙体构造和早期脱矿牙体构造在诱导荧光强度方面存在着较大的差异5。在QLF荧光照片中,正常的釉质表示为高亮度的黄绿色荧光,而包罗龋损区在内的脱矿地区那么表示为显着的暗区。牙体脱矿越显着,那么该区发出的荧光强度越弱,其相干系数r=0.730.866。如今可以或许对平滑面早期龋损矿物质含量举行定量或半定量的要拥有偏光显微镜法、显微硬度法、激光扫描共聚焦显微镜法和横断显

11、微放射照相技能等7-8。固然这些要领都可以较为正确的对矿物质的丧失量举行定量,但是都要求制备标本,然后用特别的仪器举行不雅察,因此只能在体外试验大概原位实行中才气实现。对付口腔内的天然病损来说,那么必要象QLF这种无创并可以或许对病损区矿物质含量举行纵向监测的技能。3.3QLF用于评价含氟牙膏按捺早期龋的结果在本研究中,3组牙釉质块开窗区在体外恒化器模子中均形成必然程度的平滑面早期龋损,但3个处置惩罚组形成病损的严峻程度不一。在QLF,LS的荧光图像中均表示为无氟牙膏组形成的病损显着较含氟牙膏组形成的病损严峻,说明氟含量为1450g/L的含氟牙膏的干预有较为显着的按捺模子中平滑面早期龋损形成的作用。而含差异氟化物