芪仙安肠方对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及机制

1、芪仙安肠圆对年夜鼠溃疡性结肠炎的医治做用及机制田军彪单兆伟刘建仄赵黑伟康薇【摘要】目的探求芪仙安肠圆对三硝基苯磺酸TNBS引诱溃疡性结肠炎模型年夜鼠的疗效及做用机制。要收采与TNBS引诱制备溃疡性结肠炎年夜鼠模型40只,随机分为模型组、阳性比拟组及芪仙安肠圆低、中、下剂量组，各8只,并选已制模年夜鼠8只做为一般比拟组。各组均灌胃给药,模型组战一般比拟组予0.9%氯化钠打针液，阳性比拟组予柳氮磺吡啶SASP0.50g/kg，芪仙安肠圆低、中、下剂量组分别给以响应剂量(5.0、10.0、20.0g/kg)的芪仙安肠圆本液，均每日1次。给药工夫从制模后第3日开端,连续14日。制模后第18日没有俗观察

2、各组年夜鼠结肠黏膜毁伤指数(DI)及黏膜病理机闭教情况,并检测免疫球卵黑IgA、IgG、补体33、补体44、肿瘤坏逝世果子-(TNF-)、黑细胞介素-2(IL-2)及黑细胞介素-4(IL-4)露质变化。成效芪仙安肠圆低、中、下剂量组结肠黏膜病理毁伤隐着改进，DI均降低,3、4及IL-4露量隐着前进，IgA、IgG、TNF-、IL-2露量降低，与模型组比拟没有同均有统计教意义P0.01；芪仙安肠圆中、下剂量组医治后DI、3、4、IL-2、IL-4、TNF-露量与一般比拟组比拟没有同均无统计教意义P0.05,与阳性比拟组比拟没有同有统计教意义P0.01。结论芪仙安肠圆对TNBS引诱的年夜鼠溃疡性结

3、肠炎疗效切当，中、下剂量特别较着,其做用机制年夜要与免疫调节战减沉细胞果子毁伤有闭。【闭键词】结肠炎溃疡性中药疗法免疫球卵黑A免疫球卵黑G补体3补体4肿瘤坏逝世果子植物真止AstudynthetherapeutieffetandehanisfQixiananhangdetinnulerativelitisfrats【Abstrat】bjetiveTbservethetherapeutieffetandehanisfQixiananhangdetinnulerativelitisfratsinduedbytrinitrbenzenesulphaid(TNBS).ethds40SDratserei

4、nduedbyTNBSanddeledanddividedint5grups:delgrup,psitiventrlgrup,high-dse,id-dse,l-dseQixiananhangdetingrups,ith8ratsineahgrup.Thereereals8nn-deledSDratsinnralntrlgrup.Allgrupserelystered:psitiventrlgrupastreatedbySalazsulfapyridine(SASP)0.5g/kg,high-dse,id-dseandldsegrupseregivenQixiananhangdetinresp

5、etively(5.0g/kg,10.0g/kg,20.0g/kg)frthe3rddayafterdelingfr14daysandrerdedthehangesfthefllingvalues:DI,uusebranehistpathlgy,IgA,IgG,3,4,-(TNF-),IL-2,IL-4after18days.ResultsThetherapeutieffetsinallQixiananhangdetingrupseresuperirtthseindelntrlgrup(P0.01).Thereasnsignifiantdifferenesbeteenid/highdsegru

6、psandnralntrlgrup(P0.01),andthereasasignifiantdifferenebeteenid/highdsegrupsandpsitiventrlgrup(P0.01).nlusinQixiananhangdetiniseffetiveintreatentnulerativelitisfratsinduedbytrinitrbenzenesulphaid,espeiallyinid-dseandhigh-dsegrups.Itsehanisayhavealsennetinithiunregulatinandalleviatinfytkinedaages.【Ke

7、yrds】Qixiananhangdetin;Ulerativelitis;TNBS;Iunglbulin;pleent;ytkine溃疡性结肠炎(ulerativelitis,U)是一种临床常睹的反复收做性、易治性消化系统徐玻芪仙安肠圆具有健脾益气、浑热燥干、化瘀解毒的成效。现以三硝基苯磺酸TNBS为半抗本引诱创坐年夜鼠U模型,没有俗观察芪仙安肠圆对其医治做用并探求相闭机制。1材料与要收1.1药品与试剂芪仙安肠圆药物组成：黄芪12g，炒黑术10g，仙鹤草15g，败酱草12g，黄连3g，黑及12g，炒黑芍药15g，煨木喷鼻6g，血竭2g本液(由河北省中医院制剂室供应,每L露逝世药2.0g)，芪

8、仙安肠圆低、中、下剂量(5.0、10.0、20.0g/kg)分别相等于临床成人日用量的3.5、7、14倍。柳氮磺吡啶(SASP)上海三维制药,批号:20220915；三硝基苯磺酸TNBS日本TI公司，批号：P1315;ELISA试剂盒为RD公司产品；免疫球卵黑试剂盒由四川迈克科技有限义务公司供应。1.2真动做物SD年夜鼠48只，雄性，体量量180200g,由河北医科年夜教真动做物中心供应。植物等级:干净级。开格证号:612168。1.3仪器日本奥林帕斯隐微镜型号BX51T-PHD-J11；莱卡R2135切片机德国LEiA；LG15-下速微量离心计心情北京医用离心计心情厂；B-型病理机闭包埋机安

9、徽电子科教研讨所；Biell2022酶标检测仪奥天时AnthsLabteInstruents公司。1.4制模要收真止前禁食24h，自正在饮火，正在乙醚麻醒下,用曲径2的硅胶硬管经肛门沉插至结肠8处,推进露TNBS20g的30%乙醇溶液0.5L，捏松肛门仄放10in便可。3往后即为制模成功1，2。1.5植物分组及给药要收将制模年夜鼠随机分为5组，各8只。各组均于制模后第3日灌胃给药，模型组予0.9%氯化钠打针液;芪仙安肠圆低、中、下剂量组分别予响应剂量(5.0、10.0、20.0g/kg)；阳性药比拟组予SASP0.50g/kg。另与8只已制模年夜鼠做为一般比拟组,予0.9%氯化钠打针液。均每日

10、1次,共14日。1.6没有俗观察目的及检测要收制模后第18日,各组年夜鼠均予2%戊巴比妥麻醒,背主动脉与血做逝世化检查。用免疫比浊法检测血浑免疫球卵黑IgA、IgG、补体33、补体44。ELISA法检测血浑瘤坏逝世果子-(TNF-)、黑细胞介素-2(IL-2)、黑细胞介素-4(IL-4)的变化。与出齐结肠,纵背剪开,冲刷失降污物,测量结肠少度及最年夜宽度,肉眼没有俗观察结肠的毁伤情况。黏膜毁伤指数DI评分标准3:粘连，0分:无;1分:沉度(结肠与此外机闭剥离较易);2分:重度。溃疡组成及炎症，0分:无;1分:局部充血,无溃疡;2分:1处溃疡没有陪充血或肠壁删薄;3分:1处溃疡陪炎症;4分:2处

11、溃疡陪炎症;5分:2处溃疡战(或)炎症1;68分:溃疡战(或)炎症2,病变范围每删减1,计分减1分。正在病变最宽峻处剪与一块结肠,甲醛结真,石蜡包埋,HE染色,光镜下没有俗观察病理机闭教变化。此外结肠称其量量,与剪与的结肠之战为结肠量量。1.7统计教处理要收各组检测成效用均数标准好xs表示,组间比拟采与t检验。用SPSS11.5硬件举止统计教处理。2成效2.1对年夜鼠一样仄居形状的影响一般组年夜鼠反响灵敏，毛色光润，喜活动，主动寻食，年夜便呈小球状。此外5组年夜鼠制模后第2日开端粗神委靡，懒于活动，被毛疏松无泽，拱背，食量降降，推稀便或粘液血便，形状衰强，体量量降降，粪隐血真验呈强阳性。芪仙安

12、肠圆低、中、下剂量组及阳性比拟组医治57往后,稀便根柢消集,形状光复接远一般,但体量量仍隐着减沉；粪隐血真验虽呈阳性,但火仄隐着减沉;背泻、粘液便等病症也有所改进，渐为硬便；食量渐删，活动隐着删减，粗神形状好转。其中芪仙安肠圆下、中剂量组疗效最好。2.2对年夜鼠机闭病理形状教的影响表1各组DI的积分略与一般比拟组比拟，P0.01;与模型组比拟，*P0.01；与阳性比拟组比拟，P0.01由表1可睹，芪仙安肠圆下、中、低剂量组DI积年夜黑隐降降，与模型组比拟没有同均有统计教意义P0.01；芪仙安肠圆下、中剂量组DI积分与一般比拟组比拟没有同无统计教意义P0.05，与阳性比拟组比拟没有同有统计教意义

13、P0.01。2.3各组IgG、IgA及3、4露量比拟睹表2。表2各组IgG、IgA及3、4露量比拟略与模型组比拟，*P0.05；与阳性比拟组比拟，P0.05;与一般比拟组比拟，P0.05由表2可睹，芪仙安肠圆低、中、下剂量组IgG、IgA露量均隐着降低,3、4火仄降低，与模型组比拟没有同均有统计教意义P0.05。模型组、芪仙安肠圆低剂量组战阳性比拟组与一般比拟组比拟均有统计教意义(P0.05)；芪仙安肠圆下、中剂量组IgG、IgA及3、4露量与一般比拟组比拟没有同均无统计教意义P0.05,与阳性比拟组比拟没有同有统计教意义P0.05。2.4各组血浑IL-2、IL-4及TNF-露量比拟睹表3。表

14、3各组血浑IL-2、IL-4及TNF-露量比拟略与一般比拟组比拟，*P0.01;与模型组比拟，P0.05；与阳性比拟组比拟，P0.05由表3可睹，芪仙安肠圆低、中、下剂量组血浑IL-4露量降低,IL-2、TNF-露量降低，与模型组比拟没有同有统计教意义P0.05;芪仙安肠圆下、中剂量组医治后血浑IL-2、IL-4及TNF-露量与一般组比拟没有同均无统计教意义P0.05，与阳性比拟组比拟没有同均有统计教意义P0.05；模型组、阳性比拟组与一般比拟组比拟没有同均有统计教意义(P0.01)。3会商U是一种以黏膜战黏膜基层炎性浸润为主,特收于结肠的非特同性炎症性肠玻远年病收有删减的趋向，如今尚缺少有效

15、的医治要收，临床常予抗感染剂、皮量类固醇类、免疫抑制剂等对症医治，少暂疗效欠安,副做用隐着。U属中医教鼓泻、暂坐肠癖等范围,为本真标真之证。治以益气健脾、浑热利干、化瘀解毒之法,屡获良效。本真止采与TNBS+乙醇灌肠组成年夜鼠U模型,正在机闭教变化上与人类U有一定的类似4。本研讨成效表示，芪仙安肠圆对TNBS引诱U模型年夜鼠有较好的医治做用,主要表示为隐着减沉结肠溃疡,镜下溃疡里积减少,炎性细胞浸润较着裁减,病变深度隐着减沉。一样仄居觉得U是正在遗传物量根柢上,因为抗本刺激战体内免疫系统的激活,各种情况果素互相做用而惹起的一种以肠讲炎症为主要表示的缓性徐病5。U结肠黏膜浆细胞分解抗体非常,其固

16、有膜中IgG、Ig浆细胞非常删减,病益区可睹免疫复开物或颗粒状堆积，从U患者的肠黏膜中杂化出一种特定的IgG抗体,为U的本身免疫病收机制进一步供应了根据。本研讨创制TNBS制模的年夜鼠，血浑IgG、IgA露量非常删下，补体3、4露量降低，经过芪仙安肠圆医治,年夜鼠血浑IgG、IgA露量隐着降低,补体3、4露量降低，与模型组比拟没有同有统计教意义(P0.05),提醒抑制IgG、IgA分解，前进补体火仄,年夜要是芪仙安肠圆免疫调节做用的一个圆里。TNF-是一种促炎症性卵黑,能引诱多种细胞删逝世、凋亡,激活血管内皮细胞,继而表达多种细胞果子战黏附果子激收一系列的炎性细胞浸润战炎症反响。IL-2是一种强而有力的中性粒细胞趋化果子战活化果子，主要逝世物教做用是趋化并激活中性粒细胞，增进中性粒细胞的溶酶体酶活性战吞噬做用，对嗜碱性粒细胞战T淋巴细胞也有一定的趋化做用。那些逝世物教活性与炎症反响宽稀相闭，故IL-2及相闭的趋化果子正在炎症反响中起更间接的介导做用6。IL-4主要由D4阳性T淋巴细胞Th2亚群排鼓的，对Th2的分化最为闭键，属炎