分蘖葱头水溶性总黄酮含量测定方法的研究

1、分蘖葱头水溶性总黄酮含量测定方法的研究【摘要】目的采用比色法测定东北特产分蘖葱头中水溶性总黄酮的含量。方法以槲皮素为对照品，以三氯化铝为显色剂，检测波长为431n。结果线性范围为1.06812.816gl-1(r=0.9998)，平均回收率为99.8%，相对标准偏向为0.8%(n=9)。结论该法测定分蘖葱头中水溶性总黄酮的含量简便可行，准确度高。【关键词】分蘖葱头;水溶性总黄酮;槲皮素1材料与仪器1.1材料槲皮素对照品(99.54%，吉林大学药学院药物化学教研室提供);95%医用酒精(吉林金鑫公司);其余试剂均为分析纯。分蘖葱头购于长春市郊区，经吉林大学药学院生药学教研室主任王广树教授鉴定为百

2、合科葱属植物分蘖葱头AlliuepaL.var.agrgatuDn.。1.2仪器FZ75型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器)，SHB-III顺循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸)，RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)，JT1001电子天平(上海精天电子天平仪器)，AR1140电子分析天平(奥豪斯国际贸易)，KQ3200DE医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器)，HH-2恒温数显水浴锅(常州国华电器)，101-1A电热鼓风枯燥箱(天津市泰斯仪器)。2方法与结果2.1分蘖葱头总黄酮样品的制备精细称取100g分蘖葱头枯燥鳞茎，用3倍量70%乙醇加热回流3次，1h/次，将3次溶液合并，减压回

3、收得流浸膏，加水溶解，过滤，滤液备用。2.2最大吸收波长确实定分别准确称取枯燥至恒重的槲皮素对照品和总黄酮样品适量，分置50l容量瓶中，用无水乙醇溶解并配制成每毫升含槲皮素(或总黄酮)54g的溶液，分别精细量取此溶液4.0l，分置25l量瓶中，精细参加5%三氯化铝8.0l，加无水乙醇溶液至刻度，摇匀放置10in。另取一25l量瓶，精细参加5%三氯化铝8.0l，加无水乙醇溶液至刻度，以此为空白，在波长300500n之间进展扫描，确定槲皮素对照品和总黄酮样品溶液的最大吸收波长均为431n，以此波长为测定波长。转贴于论文联盟.ll.2.3槲皮素标准曲线的制定精细称取枯燥至恒重的槲皮素标准品适量，用无

4、水乙醇溶解并配制成每毫升含槲皮素54g的溶液，精细汲取该溶液的0.50，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0l，分置25l容量瓶中，各精细参加5%三氯化铝的乙醇溶液8.0l，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀放置10in，另取一个25l容量瓶，精细参加5%三氯化铝的乙醇溶液8.0l，用无水乙醇稀释至刻度，以此为空白。在431n处测定吸光度。测定结果见表1。表1槲皮素标准曲线的测定由此可见，槲皮素浓度在1.06812.816gl-1范围内线性关系良好。2.4提取物中总黄酮的含量测定以水溶性黄酮的含量为考察指标，将乙醇浸膏加水溶解，测量总体积后以槲皮素为代表成分测定溶液中总黄酮的含量。劝2.1项下样品，

5、加水溶解后过滤，滤液定容于50l置量瓶中，从中精细汲取5l于100l烧瓶中，加7.5%的硫酸10l，水浴加热回流40in，取出冷却后滤过，滤渣及滤纸洗至中性，剪碎后放入100l圆底烧瓶中加无水乙醇回流2次，各加无水乙醇25和15l，分别回流30和15in，取出滤液，定容在50l量瓶中，精细量取8l溶液2份，分置25l量瓶中，1份加无水乙醇至刻度作对照，另一份精细参加5%三氯化铝乙醇溶液8.0l，再用无水乙醇定容至刻度，在431n处测定吸收度，根据标准曲线线性方程计算总黄酮含量。2.5精细度实验按“2.1项下方法制备供试品溶液6份，按“2.4项进展测定。结果见表2。表2精细度实验结果结果标明RS

6、D为1.1%，证明该含量测定方法精细度良好。2.6稳定性实验按“2.1项下方法制备供试品溶液1份，按“2.4项分别在0，10，20，30，40，50和60in进展测定，结果见表3。表3稳定性实验结果RSD为0.6%，标明供试品溶液在1h内测定稳定。2.7加样回收率考察将3份不同浓度的乙醇浸膏加水溶解后过滤，滤液定容于50l容量瓶中，从中精细汲取5l溶液于100l烧瓶中，分别精细参加槲皮素对照品，按“2.4项制备样品进展测定，计算回收率。结果见表4。平均回收率为99.8%，RSD为0.8%，可见该方法准确度较好。2.83批样品中总黄酮的含量测定按“2.4项下测定3批样品中分蘖葱头的总黄酮含量，平均每克枯燥分蘖葱头鳞茎中含有水溶性总黄酮为0.64g。表4加样回收率实验结果3讨论分蘖葱头营养价值较高，在我国资源丰富，尤其在东北地区种植量很大，生长快，本钱较低。有关分蘖葱头的药学研究在国内外作者未见文献报道，本实验采用了比色法进展测定其水溶性总黄酮的含量，操作简便，结果准确可靠，重复性好，为东北特产分蘖葱头的质量控制提供了科学根据。【参考文献】1XiahngYang,KazuyukiHri.,ikihikKbayashi,etal.FlavnidsislatedfrAlliuepaL.V