结核病与生物安全课件

1、 结核病与生物安全 微生物 余婷岚Do you know?Pulmonary tuberculosis : Do you know?TB : Do you know?Biosafety : Do you know?结核病 ？原发症状症状应该怎样做？并发人群结核病现状“双绿丝带” Do you know?形象宣传大使结核分枝杆菌（Tubecle bacilli ）定义由结核分枝杆菌（或牛型分枝杆菌或非典型分枝杆菌）引起的细菌性疾病。可累及全身各个器官，除了头发与指甲以外的任何组织，其中以肺结核最为常见。传染性强、散播面广。病原学结核分枝杆菌基本形态基本形态杆菌型：菌体直或稍弯曲、两端钝圆的杆菌。

2、滤过型：球状微粒体，可通过细菌滤膜。颗粒型：冷性脓肿、浆液性渗出液、淋巴结等脓液中观察到的革兰染色阳性颗粒。球型菌：菌体内外受到物理、化学、免疫因素的影响，细胞壁缺失，产生缺陷。染色特性萋尼氏染色为红色，非抗酸性细菌呈蓝色。抗酸性取决于分枝菌酸残基和固有层的完整性。生长特性专性需氧菌，营养要求高，生长缓慢。生长形态抵抗力分枝杆菌细胞壁中含有脂质，可防止水分丢失，故对干燥的抵抗力特别强。结核杆菌在湿润或干燥的痰中可存活数周或数月，尘埃中10天仍保持传染性。有研究发现，在南极洲-900C的环境下，仍发现结核杆菌的存在。对乙醇敏感，在70%乙醇中2分钟死亡。对湿热敏感，在液体中加热62-630C 1

3、5分钟或煮沸即被杀死。对紫外线敏感。一线抗结核药物敏感，如：异烟肼（INH）、利福平（RFP）、链霉素（SM）、乙胺丁醇（EMB）.实验室中的结核杆菌结核分枝杆菌属3级实验室危害微生物，应在BSL-3级实验室内进行操作。实验室工作人员在分枝杆菌检验过程中，会接触到各种潜在感染源标本，特别是操作产生的气溶胶。存在地点：各种临床标本，被污染的操作台，收集的分枝杆菌菌株、实验室的部分区域。实验室级别要求BSL-1对有效灭活后不含活菌材料的分子生物学、免疫学试验BSL-2临床结核杆菌分离培养、药敏、鉴定、生化、免疫学试验，PCR提取、涂片、显微镜检查BSL-3大量活菌培养、离心、冻干等易产生气溶胶的试

4、验；活菌感染的动物试验活动危险性结核杆菌涂片：用于显微镜观察，痰等样品在涂片、固定和染色时可产生气溶胶。结核抗体检测：血液、胸水等样品离心、倾倒、混匀时可产生气溶胶。个人防护措施技术原因导致污染接种：应使用铂丝无弹力接种环。混匀：吸管吸吹菌液时易产生气泡，应沿容器壁排出研磨：最好使用组织研磨器，避免产生气溶胶。研磨：最好使用组织研磨器，避免产生气溶。离心：使用匹配的管、套、盖。生物安全要求无生物安全BSL-3级的实验室，一定要在设有缓冲间的无菌室、并设有生物安全柜的实验室操作。工作前后要开启紫外灯。操作台面要铺湿消毒巾。按病原微生物的危险等级和感染途径做好个人防护。操作台附近常备消毒液与密闭容

5、器。有皮肤破损和疾患的工作人员不得操作。生物安全保障建设保障：生物安全3级实验室设备保障：生物安全柜、高压灭菌器技术保障：双人原则，培训考核上岗性能检测国家设备质量监督检验中心定期对每一台生物安全柜进行整体性能检测。必须符合国家及国际的性能标准。检测包括物理学检测和生物学检测，根据检测性质可分为首次检测、后续检测。生物安全柜的常规检测外，如安装后、移动后、检修后、更换过滤器后，也必须进行现场生物安全柜检测。安全级别按照中华人民共和国医药行业标生物安全柜准YY0569-2005生物安全柜中的规定，二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4 个级别：A1 型，A2 型，B1 型和B

6、2 型。二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护。 * A1 型安全柜：气流至少为0.38m/s。70%气体通过HEPA 再循环，30%的气体排出。 * A2 型安全柜：气流至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA 再循环至工作区，30%的气体排出。生物安全水平根据需要微生物试验品的致命性、传播媒介等因素，可划分为一至四级生物安全水平(BSL)： 生物安全水平 致命性媒介可治愈性范例BSL-1无或极低 液体可以 Bacillus subtilis (草芽孢杆菌) BSL-2一般液体可以HIVBSL-3高空气可以TBBSL-4极高空气不可Ebola（埃博拉病毒）操作标准严禁用口吸移液管

7、制定尖锐器具的安全操作规程严格按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要立即消毒。所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行高压灭活，灭活物品须放在专用密闭容器内。安全管理实验室制订和采用生物安全管理计划以及实验室安全手册与操作规程。实验室应当保证提供常规的实验室安全培训，并建立培训制度。所有实验室人员必须经过培训，了解所从事工作的危险性，掌握有关的管理规定和操作程序，通过考核后方可从事相关实验室工作。意外事故防范、处理菌液外溢在台面、地表、其他表面时： 处理人员应戴手套，穿防护服，必要时进行脸和眼睛的防护。用布或纸巾覆盖并吸出溢出物，向纸巾上倒适

8、当的消毒剂，并覆盖周围的区域，通常用5%的漂白剂溶液。使用消毒剂时，从溢出区域的周围开始向中心处理，作用适当的时间后，将所有物质清理掉。如含有破碎的玻璃及锐器，则使用硬物收集处理，并置于利器盒中待处理。对溢出区域再次清洁消毒，并做好处理记录通知主管部门清洁工作已完成。意外事故处理措施针刺或切割损伤：应立即用肥皂水和大量流水冲洗，挤出损伤处血液，用消毒酒精消毒伤口，或视情况隔离观察。皮肤污染：用肥皂水冲洗污染部位，并适当的用消毒剂浸泡。粘膜污染：用大量流水或生理盐水冲洗污染部位。衣物污染：尽快脱掉污染衣物，进行消毒处理。污物喷溅：若小范围污物喷溅，应立即进行消除处理和清洗。发生大面积污物喷溅事故时，应立即通知实验室部门主管和安全负责人到场，查清情况，制定消毒程序。空气污染：可采用低温蒸汽甲醛进行空气消毒，但甲醛致癌，