大创中期汇报没谱

1、1245001 张佳瑶1246223 于浪天1245726 吴雅蓉1345028 张敏杰 1346212 高 雅海桐皮生物碱类化学成分及其抗肿瘤活性初步研究1.工作进度 阶段成果2.下阶段工作计划4.预期成果3.经费使用情况 一.工作进度及阶段成果 1.提取分离纯化95%和50%乙醇提取分别用石油醚、氯仿萃取硅胶柱、凝胶柱层析 一.工作进度及阶段成果 2.阶段成果氯仿部位经硅胶柱、凝胶柱反复分离、纯化，初步得单体化合物，经核磁波谱鉴定得到，两个甾醇类化合物（链甾醇、sitosteryl-9,10-dihydroxystearate）、三个三萜类化合物（羽扇豆醇、羽扇豆酮、白桦脂酸）、两个木脂素

2、类化合物（Cleomiscosin A、()-lyoniresinol）、一个酰胺类化合物（(2S,3S,4R,10E)-2- (2R)-2-Hydroxytetracosanoylamino-10-octadecene-1,3,4-triol）、一个不饱和脂肪酸（hexadec-4Z-enoic）及一个简单芳香族化合物（香草酸）。其中木脂素类化合物cleomiscosin A及()-lyoniresinol量较大，参考木脂素活性文献报道，推测氯仿部位的抗肿瘤活性可能是部分由于木脂素类化合物。EV-7EV-10 一.工作进度及阶段成果 3.EV-7及EV-10的柱层析过程EV-2-5的分离（E

3、V柱-25）（1） 柱洗脱 上样量约1.5g，200300 目硅胶100g 装柱，分别以氯仿-甲醇（130:1, 50:1, 20:1）洗脱， 每250ml收集一流份。（2） TLC点板（3） 结晶分析 流份13、14、15、16有结晶析出，以甲醇洗涤34次，得白色无定 型粉末。点板推断为单点，为 EV-7。 紫外254nm下有暗斑 365nm下有紫色荧光浓硫酸-香草醛反应不显色 一.工作进度及阶段成果 3.EV-7及EV-10的柱层析过程EV-31-322的分离（EV柱-38）（1） 柱洗脱 上样量约2.0g，200300 目硅胶120g 装柱，分别以氯仿-甲醇（ 100:1, 80:1,

4、50:1, 20:1 ）洗脱， 每250ml收集一流份。（2） TLC点板（3） 结晶分析 流份7683有结晶析出，以甲醇洗涤34次，得白色无定型粉末。 点板推断为单点，为 EV-10。 紫外254nm下有暗斑 浓硫酸-香草醛反应显绿色，后变红色。 一.工作进度及阶段成果 4.结构鉴定化合物EV-7结构鉴定性状与分子量白色无定型粉末；紫外254nm下有暗斑，365nm下有紫色荧光，浓硫酸-香草醛反应不显色。氢谱与碳谱1H NMR (300MHz, C5D5N) 显示化合物中含有6个芳香氢信号H 7.71 (1H, d, J=9.6 Hz, H-4), 7.39 (1H, s, H-2), 7.

5、33 (1H, d, J=8.1 Hz, H-6), 7.26 (1H, d, J=8.1 Hz, H-5), 6.70 (1H, s, H-5), 6.41 (1H, d, J=9.6 Hz, H-3)；4个脂肪氢信号H 5.55 (1H, d, J=7.8 Hz, H-7), 3.77-4.44(3H, m, H-8, 9)；2个甲氧基氢信号H 3.77 (3H, s, OMe), 3.69 (3H, s, OMe)。13C NMR (75MHz, C5D5N) 显示化合物共有个碳原子，15个sp2杂化烯碳信号C 161.0 (C-2), 149.3 (C-4), 149.0 (C-3),

6、 146.6 (C-6), 144.5 (C-4), 139.6 (C-9), 138.6 (C-7), 133.3 (C-8), 127.8 (C-1), 121.9 (C-6), 116.8 (C-3), 114.0 (C-5), 112.5 (C-10), 112.1 (C-2), 101.3 (C-5)；5个连氧的sp3杂化碳信号C 80.4 (C-7), 77.3 (C-8), 61.2 (C-9), 56.2 (3-OMe), 56.0 (6-OMe)。 1H, 13C NMR数据见Table 5。以上1H, 13C NMR数据与文献报道的Cleomiscosin A 4一致，故鉴

7、定化合物EV-7为Cleomiscosin A。 一.工作进度及阶段成果 4.结构鉴定化合物EV-10结构鉴定 性状与分子量 化合物EV-10，白色无定型粉末；紫外254nm下有暗斑，浓硫酸-香草醛反应显绿色，后变红色。 氢谱与碳谱 1H NMR (300MHz, CD3OD) 显示化合物中含有3个芳香氢信号H 6.61 (1H, s, H-2), 6.40 (2H, s, H-2, 6)；9个脂肪氢信号H 4.33 (1H, d, J=5.4 Hz, H-7), 3.61 (2H, m, H-9a, 9a), 3.51 (2H, m, H-9b, 9b), 2.72 (1H, dd, J=1

8、5.0, 4.8 Hz, H-7a), 2.59 (1H, dd, J=15.0, 11.4 Hz, H-7b), 1.99 (1H, s, H-8), 1.64 (1H, s, H-8)；4个甲氧基氢信号H 3.88 (3H, s, 3-OMe), 3.76 (6H, s, 3,5-OMe), 3.40 (3H, s, 5-OMe)。13C NMR (75MHz, CD3OD) 显示化合物共有22个碳原子，12个sp2杂化烯碳信号C 147.6 (C-3, 5), 147.3 (C-3), 146.3 (C-5), 139.2 (C-1), 137.9 (C-4), 133.2 (C-4),

9、 128.8 (C-1), 124.9 (C-6), 106.4 (C-2), 105.6 (C-2, 6)；6个连氧的sp3杂化碳信号C 65.4(C-9), 62.9 (C-9), 58.8 (5-OMe), 55.4 (3, 5-OMe), 55.2 (3-OMe)；高场区4个sp3杂化碳信号C 46.7 (C-8), 40.1 (C-7), 39.5 (C-8), 32.1 (C-7)。1H, 13C NMR数据见Table 6。以上1H, 13C NMR数据与文献报道的 ()-lyoniresinol 5一致，故鉴定化合物EV-10为 ()-lyoniresinol。 二.下阶段工作计划 2015.102015.112015.112016.1各粗分部位以层析法与制备HPLC进一步分离，单体化合物送检。2016.22016.5整理实验结果， 完成结题论文。单体化合物解谱，并进行抗肿瘤活性测试 三.经费使用情况类别金额（元）试剂及耗材费 2200购买药材及差旅费 650总计2850 四.预期成果ADD TEXTADD TEXTADD TEXT1.结题时提交研究原始记录。预计在国内核心期刊上参与发表1篇文章或参与专利申请。2.熟练掌握海桐皮生物碱类化合物的