紫外可见光谱分析法

1、关于紫外可见光谱分析法第一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第一节 概述紫外-可见光谱分析法是基于物质分子对波长为200-780nm区域内光辐射的吸收而建立起来的分析方法。由于200-780nm光辐射的能量主要与物质中原子的价电子的能级跃迁相适应，所以紫外-可见分光光度法又称电子光谱法。第二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月一、紫外-可见分光光度法分类利用比较待测溶液本身的颜色或加入试剂后呈现的颜色的深浅来测定溶液中待测物质的浓度的方法就称为比色分析法。比色分析中根据所用检测器的不同分为目视比色法和光电比色法。应用分光光度计，根据物质对不同波长的单色光的吸收程度不同而对物质进行

2、定性和定量分析的方法称分光光度法（又称吸光光度法）。第三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月目视比色法用眼睛观察、比较溶液颜色深度以确定物质含量的方法。标准系列未知样品第四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月光电比色法(分光光度法）通过滤光片得一窄范围的光(几十nm)光电比色计结构示意图第五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月二、紫外-可见分光光度法的特点1.具有较高的灵敏度和一定的准确度，适用于微量组分的测定。第六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2.适用范围广近年来，由于分光光度法的选择性和灵敏度都有所提高，几乎所有的无机物质和许多有机物质的微量成分都能用此法进行

3、测定。3.手续简便，分析速度快，适用于控制分析分光光度法的操作过程，主要包括试样的溶解，待测组分的显色等内容，操作简便，完成吸光光度分析的全过程一般只需几十分钟，甚至可在几分钟内完成，适合于控制分析。4.仪器简单，容易掌握但吸光光度分析也有一定的局限性，对超纯物质的分析，灵敏度达不到要求，相对误差较大，不利于高含量组分的测定。第七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第二节 物质对光的选择性吸收一、光的基本性质光是一种电磁波，具有波粒二象性。光既是一种波，因而它具有波长（）和频率（），光也是一种粒子，它具有能量（E）。它们之间的关系为：式中：E能量，eV(电子伏特）； h普朗克常数，6.6

4、2610-34JS; 频率，Hz; C光速，31010cms-1; 波长，nm。 第八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月二、光的种类1、单色光和复合光具有同一种波长的光，称为单色光。激光接近单色光。含有多种波长的光称为复合光，例如日光、白炽灯光等。2、可见光和互补光凡是能被肉眼感觉到的光称为可见光，其波长范围为400780 nm。 第十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月如果把适当颜色的两种光按一定强度比例混合，也可成为白光，这两种颜色的光称为互补色光。 红橙黄绿青青蓝蓝紫白第十二张，P

5、PT共六十九页，创作于2022年6月三、溶液颜色的产生溶液颜色是基于物质对光有选择性吸收的结果。表观现象示意完全吸收完全透过吸收黄色光光谱示意第十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月四、溶液的吸收光谱曲线吸收光谱曲线是通过实验获得的，具体方法是：将不同波长的光依次通过某一固定浓度和厚度的有色溶液，分别测出它们对各种波长光的吸收程度（用吸光度表示），以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，画出曲线，此曲线即称为该物质的光吸收曲线（或吸收光谱曲线），它描述了物质对不同波长光的吸收程度。 第十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月高锰酸钾的光吸收曲线 （1）KMnO4溶液对不同波长的光的

6、吸收程度不同，对绿色光区中 525nm的光吸收程度最大（此波长称为最大吸收波长，以max表示），所以吸收曲线上有一高峰。在进行光度测定时，通常都选择在max处来测量，这时可得到最大的灵敏度。（2）不同浓度的 KMnO4溶液吸收曲线相似，max不变。所不同的是吸收峰峰高随浓度的增加而增高。这个特性可作为物质定量分析的依据。（3）不同物质的吸收曲线，其形状和最大吸收波长都各不相同。因此，可利用吸收曲线来作为物质定性分析的依据。 第十五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月四、有机化合物紫外-可见吸收光谱1、紫外-可见吸收光谱有机化合物的紫外-可见吸收光谱是由化合物分子中三种不同类型的价电子，在

7、各种不同能级上跃迁产生的。这三种不同类型的价电子是：形成单键的电子、形成双键的电子和氧或氮、硫、卤素等含未成键的电子。当它们吸收一定能量E后，这些价电子将跃迁到较高的能级（激发态），此时电子所占的轨道称为反键轨道，而这种特定的跃迁是同分子内部结构有着密切关系的。 第十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（1）跃迁所需能量最大。表示键电子的反键轨道，饱和碳氢化合物只有键电子，它吸收远紫外线（10-200nm）后，由基态跃迁至反键轨道。 （2）n跃迁所需能量较大。饱和碳氢化合物中氢被氧、氮、硫、卤素等取代后（单键），其孤对电子 n较键电子易于激发，使电子跃迁所需能量减低，吸收波长较长，一般

8、在150-250nm范围内。 第十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（3）跃迁所需能量较小。含有电子的基团如烯类、炔类都能发生跃迁，非共轭的跃迁所吸收的波长较短。具有共轭双键的化合物，相间的键与键形成大键，由于大键各能级间距离较近，电子容易激发，吸收波长向长波长方向移动。（4）n跃迁所需能量最低。凡有机化合物中含有杂原子氮、氧、硫等同时又具有双键，吸收紫外光后产生n跃迁，吸收带在200-400nm之间，为弱吸收，在10-100之间。第十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月上述四种类型的电子跃迁，按照所需能量的大小进行排列，其次序为： n n第十九张，PPT共六十九页，创作于2

9、022年6月2、紫外吸收光谱中常用的术语1、生色团（或发色团）分子中含有不饱和键，能吸收外来辐射时并引起n-*和-*跃迁，可产生此类跃迁或吸收的结构单元，称为生色团。如乙烯基、羰基、亚硝基、偶氮基NN、乙炔基、腈基CN。2、助色团 含有未成键n电子，本身不产生吸收峰，但与生色团相连时，能使生色团吸收峰向长波方向移动并提高吸收强度的一些官能团，称之为助色团。 如OH、OR、NH、NHR、X等 第二十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月3、红移与蓝移有机化合物的吸收谱带常常因引入取代基或改变溶剂使最大吸收波长max和吸收强度发生变化:max向长波方向移动称为红移，向短波方向移动称为蓝移。吸收

10、强度即摩尔吸光系数增大或减小的现象分别称为增色效应或减色效应，如图所示。第二十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月4、溶剂效应由于溶剂的极性不同引起某些化合物的吸收峰的波长、强度及形状产生变化，这种现象称为溶剂效应。一般溶剂效应有以下规则：当溶剂由非极性变为极性时，对于n跃迁类型化合物，吸收产生蓝移，并且吸收强度增大，对于跃迁类型的化合物，吸收产生红移，并且吸收强度减弱。第二十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第三节 光的吸收定律一、朗伯-比耳定律1、透光度和吸光度当一束辐射强度为I0的平行单色光垂直照射到一定浓度的均匀透明溶液时，由于溶液的吸收，透过光的辐射强度变为It,则

11、It与I0之比称为透光度，用T表示：物质对光的吸收程度可用吸光度A表示，吸光度与光强度、透光度之间的关系为：入射光 I0透射光It第二十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2、朗伯定律即当一束平行光照射到一固定浓度的溶液时，其吸光度与光通过的液层厚度成正比，这就是朗伯定律，其数学表达式为：A=k1b式中：b液层厚度； k1比例系数。第二十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月3、比耳定律当单色光通过液层厚度一定的有色溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度成正比，这个关系称为比耳定律，用下式表示：A=k2c式中：c溶液浓度，g/L或mol/L； k2比例系数。第二十五张，PPT共六十九页

12、，创作于2022年6月4、朗伯-比耳定律当一束平行单色光通过单一均匀的、非散射的吸光物质溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比，这就是朗伯-比耳定律。这个定律是各类吸光光度法定量分析的基础。当溶液的浓度为质量浓度单位g/L时，其数学表达式为A=abc式中：a为质量吸光系数，L/(gcm)，相当于浓度为1g/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。当溶液的浓度单位为mol/L时，其数学表达式为A=bc式中：为摩尔吸光系数，L/(molcm)，相当于浓度为1mol/L,液层厚度1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。 第二十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月5、吸光系

13、数吸光系数是吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数。吸光系数的特点（1）不随浓度和液层厚度的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，吸光系数仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关，可作为定性鉴定的参数。（2）同一吸收物质在不同波长下的值是不同的，在最大吸收波长max处的摩尔吸光系数，常以max表示。max表明了该物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。（3）max越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。max6104L/(molcm)属于高灵敏度；max在11046104 L/(molcm)属于中等灵敏度，max1104L/(molcm

14、)属于低灵敏度。第二十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月例1：已知含Fe3+浓度为500gL-1的溶液用KCNS显色，在波长480nm处用2cm吸收池测得A0.197，计算摩尔吸光系数，铁的相对原子质量为55.85g/mol。第二十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月例2：铁（）浓度为2.510-4g/L的溶液，与邻菲罗啉反应，生成橙红色络合物。该络合物在波长508nm，比色皿厚度为2cm时，测得 A=0.15。计算邻菲罗啉亚铁的 a及,铁的相对原子质量为55.85g/mol。第二十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月6、吸光度的加和性当溶液中有多种组分对光产生吸收时

15、，且各组分之间不存在相互作用时，测该溶液在某一确定波长下的总吸光度等于各吸光度之和，即吸光度具有加和性。可用下式表示：A总=A1+A2+An=(1c1+2c2+ncn)b式中下角标指吸收组分1，2，n。吸光度的加和性主要用于多组分同时测定。第三十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月二、影响光吸收定律的主要因素根据吸收定律，在理论上，吸光度对溶液浓度作图所得的直线的截距为零，斜率为b。实际上吸光度与浓度关系有时是非线性的，或者不通过零点，这种现象称为偏离光吸收定律。如果溶液的实际吸光度比理论值大，则为正偏离吸收定律；吸光度比理论值小，为负偏离吸收定律。 第三十一张，PPT共六十九页，创作于

16、2022年6月1、入射光非单色性引起偏离 吸收定律成立的前提是入射光是单色光。但实际上，一般单色器所提供的入射光并非是纯单色光，而是由波长范围较窄的光带组成的复合光。而物质对不同波长的吸收程度不同（即吸光系数不同），因而导致了对吸光定律的偏离。第三十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2、溶液的化学因素引起偏离 溶液中的吸光物质因离解、缔合，形成新的化合物而改变了吸光物质的浓度，导致偏离吸收定律。因此，测量前的化学预处理工作十分重要，如控制好显色反应条件，控制溶液的化学平衡等，以防止产生偏离。第三十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月3、比尔定律的局限性引起偏离 严格地说，比尔

17、定律是一个有限定律，它只适用于浓度小于0.01mol/L的稀溶液。因为浓度高时，吸光粒子间平均距离减小，以致每个粒子都会影响其邻近粒子的电荷分布。这种相互作用使它们的摩尔吸光系数发生改变，因而导致偏离比尔定律。为此，在实际工作中，待测溶液的浓度应控制在0.01mol/L以下。第三十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第四节 紫外-可见分光光度计0.575光源单色器吸收池检测器信号显示系统I0参比It样品第三十五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月1.光源光源的作用是供给符合要求的入射光。分光光度计对光源的要求是：在使用波长范围内提供连续的光谱，光强应足够大，有良好的稳定性，使用寿

18、命长。在可见区常用的光源为钨灯或卤钨灯，可用的波长范围为3201000nm；在紫外区常用的光源为氢灯和氘灯，它们发射的连续光波长范围为185375nm，其中氘灯的辐射强度大、稳定性好、使用寿命长。第三十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2.单色器单色器是将光源辐射的复合光分成单色光的光学装置。入射狭缝：光源的光由此进入单色器；准光装置：透镜或凹面反射镜使入射光成为平行光束； 色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；出射狭缝。第三十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月3.吸收池吸收池又叫比色皿，是用于盛放待测液和

19、决定透光液层厚度的器件。吸收池一般为长方体，其底及两侧为毛玻璃，另两面为光学透光面。根据光学透光面的材质，吸收池有玻璃吸收池和石英吸收池两种。玻璃吸收池用于可见光光区测定。若在紫外光区测定，则必须使用石英吸收池。 第三十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第三十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月吸收池使用注意事项第一，拿取吸收池时，只能用手指接触两侧的毛玻璃，不可接触光学面。第二，不能将光学面与硬物或脏物接触，只能用擦镜纸或丝绸擦拭光学面。第三，凡含有腐蚀玻璃的物质（如F-、SnCl2、H3PO4 等）的溶液，不得长时间盛放在吸收池中。第四，吸收池使用后应立即用水冲洗干净。有

20、色物污染可以用3mol/LHCl和等体积乙醇的混合液浸泡洗涤。第五，不得在火焰或电炉上进行加热或烘烤吸收池。第四十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月4、检测器检测器又称接受器，其作用是对透过吸收池的光做出响应，并把它转变成电信号输出，其输出电信号大小与透过光的强度成正比。常用的检测器有光电池、光电管及光电倍增管等，它们都是基于光电效应原理制成的。第四十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月5、信号显示系统由检测器产生的电信号，经放大等处理后，用一定方式显示出来，以便于计算和记录。信号显示器有多种，如指针式的检流计或微安表，也有可以直接读出数据的数字显示器和自动记录型装置。第四十二

21、张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第五节 分光光度法测量条件的选择一、入射光波长的选择1、无干扰选用最大吸收波长作为入射光波长。2、有干扰可以选择吸收曲线中其他波长进行测定 （应选曲线较平坦处对应的波长），以消除干扰。 AA第四十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月二、吸光度范围的选择任何类型的分光光度计都有一定的测量误差，测量时读出的吸光度过高或过低，误差都很大，一般适宜的吸光度范围是0.20.8。在实际工作中，可以通过调节被测溶液的浓度、使用厚度不同的吸收池来调整待测溶液的吸光度，使其在适宜的吸光度范围内。第四十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月三、反应条件1、显

22、色反应将待测组分转变成有色化合物的反应称为显色反应；与待测组分形成有色化合物的试剂称为显色剂。 第四十五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月常用的显色剂可分为无机显色剂和有机显色剂两大类。（1）无机显色剂许多无机试剂能与金属离子发生显色反应，但由于灵敏度和选择性都不高，具有实际应用价值的品种很有限。常用的无机显色剂主要有：硫氰酸盐、钼酸铵、氨水及过氧化氢。（2）有机显色剂有机显色剂与金属离子形成的配合物其稳定性、灵敏度和选择性都比较高，而且有机显色剂的种类较多，实际应用广。第四十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月显色剂选用原则 选择性好。一种显色剂最好只与一种被测组分起显色反应

23、，或显色剂与共存组分生成的化合物的吸收峰与被测组分的吸收峰相距比较远，干扰少。 灵敏度高。要求反应生成的有色化合物的摩尔吸光系数大。一般要求104L/(molcm)。 生成的有色化合物组成恒定、化学性质稳定，测量过程中应保持吸光度基本不变，否则将影响吸光度测定准确度及再现性。 如果显色剂有色，则要求有色化合物与显色剂之间的颜色差别要大，提高测定的准确度。通常把两种有色物质最大吸收波长之差称为 “对比度”。一般要求显色剂与有色化合物的对比度在60nm以上。 显色条件要易于控制，以保证其有较好的再现性。第四十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月加入过量的显色剂可使显色反应趋于完全，但显色剂

24、浓度过大，有可能改变化合物的组成，使溶液的颜色发生变化。显色剂的用量对显色反应可以通过实验确定，作吸光度随显色剂浓度变化曲线，选恒定吸光度值时的显色剂用量。2、显色剂用量第四十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月3、溶液的酸度 许多显色剂都是有机弱酸或有机弱碱，溶液的酸度会直接影响显色剂的解离程度。 对某些能形成逐级配合物的显色反应，产物的组成会随介质酸度的改变而改变，从而影响溶液的颜色。 溶液酸度变化，显色剂的颜色可能发生变化。 溶液酸度过低可能引起被测金属离子水解，因而破坏了有色配合物，使溶液颜色发生变化，甚至无法测定。第四十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月显色反应适宜

25、的酸度必须通过实验来确定。确定方法是：固定待测组分及显色剂浓度，改变溶液pH，制得数个显色液。在相同测定条件下分别测定其相应的吸光度，作出A-pH关系曲线。选择曲线平坦部分对应的pH作为应该控制的pH范围。 ApH第五十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月4、显色温度显色反应一般在室温下进行，有的反应则需要加热，以加速显色反应进行完全，有的有色物质当温度偏高时又容易分解。为此，对不同的反应，应通过实验找出各自适宜的温度范围。由于温度对光的吸收及颜色的深浅都有影响，因此在绘制工作曲线和进行样品测定时应该使溶液温度保持一致。第五十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月5、显色时间有的显

26、色反应，瞬间完成且在较长时间内保持不变；有的虽瞬间完成反应，但褪色也快；有的反应完成较缓慢，颜色要经一段时间后才稳定。因此，也需通过实验，作出吸光度时间关系曲线，最后选定合适的显色时间。确定适宜时间的方法：配制一份显色溶液，从加入显色剂开始，每隔一定时间测吸光度一次，绘制吸光度-时间关系曲线。曲线平坦部分对应的时间就是测定吸光度的最适宜时间。At第五十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月6、溶剂溶剂选择原则：不与被测组分发生化学反应，所选溶剂在测定波长范围内无明显吸收，对被测组分有较好的溶解能力。水作为溶剂简便无毒，所以一般尽量采用水作为溶剂。若水不能满足要求，则使用有机溶剂来提高反应

27、的灵敏度及加快反应速度，满足测量要求。第五十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月7、显色反应中干扰及消除（1）干扰离子的影响 共存离子本身具有颜色。 共存离子与显色剂或被测组分反应，生成更稳定的配合物或发生氧化还原反应，使显色剂或被测组分的浓度降低，妨碍显色反应的完成，导致测量结果偏低。 共存离子与显色剂反应生成有色化合物或沉淀，导致测量结果偏高。第五十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（2）干扰的消除方法 控制溶液的酸度。控制酸度使待测离子显色，而干扰离子不生成有色化合物。 加入掩蔽剂，掩蔽干扰离子。该方法要求加入的掩蔽剂不与被测离子反应，掩蔽剂和掩蔽产物的颜色必须不干扰测

28、定。 第五十五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 改变干扰离子的价态以消除干扰。利用氧化还原反应改变干扰离子价态，使干扰离子不与显色剂反应，以达到目的。 选择适当的入射光波长消除干扰。 分离干扰离子。当没有适当掩蔽剂或无合适方法消除干扰时，应采用适当的分离方法 （如电解法、沉淀法、溶剂萃取及离子交换法等），将被测组分与干扰离子分离，然后再进行测定。选择合适的参比溶液可以消除显色剂和某些有色共存离子干扰。第五十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月四、参比溶液的选择（1）溶剂参比当试样溶液的组成比较简单，共存的其他组分及外加试剂对测定波长的光几乎没有吸收，可采用溶剂作参比溶液，这样

29、可以消除溶剂、吸收池等因素的影响。（2）试剂参比如果显色剂或其他外加试剂在测定波长有吸收，但试样溶液的其他共存组分对测定波长的光几乎没有吸收，此时应采用试剂参比溶液，即空白液为参比溶液，这种参比溶液可消除外加试剂中的组分产生的影响。第五十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（）试液参比如果试样中其他共存组分有吸收，但不与显色剂反应，且外加试剂在测定波长无吸收时，可用试样溶液作参比溶液。这种参比溶液可以消除试样中其他共存组分的影响。（4）退色参比如果外加试剂及试样中其他共存组分有吸收，这时可以在显色液中加入某种退色剂，选择性地与被测离子配位 （或改变其价态），生成稳定无色的配合物，使已显

30、色的产物退色，用此溶液作参比溶液，称为退色参比溶液。第五十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第五节 紫外-可见光分光光度法的应用一、定性分析1、化合物的鉴定利用标准样品或标准谱图对未知化合物进行鉴定时，可采用吸收光谱对照法，即在相同的测量条件下，测定未知化合物的吸收光谱和标准样品的吸收光谱，或将未知化合物的吸收光谱与文献上提供的标准吸收光谱进行对照。如果两者吸收光谱的形状、吸收峰的数目、最大吸收波长以及吸收带强度等完全一致，则可初步确定在它们的分子结构中，存在相同的生色团。第五十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2.化合物的纯度检查如果一化合物在紫外区没有吸收峰，而杂质有较

31、强吸收，就可方便地检出该化合物中的痕量杂质。例如，要检定甲醇或乙醇中的杂质苯，可利用苯在256nm处的吸收，而甲醇或乙醇在此波长处几乎没有吸收。第六十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月二、定量方法1、单组分样品的分析被测试样溶液中只含一种组分，或者在混合物溶液中被测组分的吸收峰与共存物质的吸收峰无重叠，均视为单一组分试样。（1）标准曲线法（工作曲线法）配制标准系列溶液：配制四份以上浓度不同的待测组分的标准溶液。测定吸光度：在相同条件下显色并稀释至相同体积，以空白溶液为参比溶液，在选定的波长下，分别测定各标准溶液的吸光度。作图：以吸光度为横坐标，标准溶液浓度为纵坐标，在坐标纸上绘制曲线，

32、此曲线即标准曲线。按与配制标准溶液相同的方法配制待测试液，在相同测量条件下测量试液的吸光度，然后在标准曲线上查出待测试液浓度。第六十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月用邻二氮菲法测定Fe2+得下列实验数据，请确定标准曲线的直线回归方程，并计算相关系数。计算器操作要点MODEREGLIN（吸光度，浓度）M+（吸光度，浓度）M+ SHIFT2选A=截距 SHIFT2选B=斜率 SHIFT2选r=相关系数 吸光值SHIFT2选Y=Y值清除统计记忆：SHIFTCLR1= 标准溶液浓度g/mL102030406080吸光度A0.1140.2190.3350.4340.6550.868第六十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（2）标准对照法 （比较法）若试样中只有被测组分在max处有吸收