同济医院检验科ISO15189体系文件07血凝常规检测操作规程

1、同济大学附属同济医院检验科血液组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ107第2版标题：血凝常规检测操作规程第1章 第7节第 PAGE 4 页 共 NUMPAGES 4 页1 目的：保证血凝常规检测结果准确、可靠。2. 适用范围：PT、APTT、TT、FBG 项目名称：PT、APTT、TT、FBG 检测方法：血浆凝固法5. 检测原理：凝血酶原时间测定：在受检血浆中加入组织浸出液和适当钙离子，观察血浆凝固时间。如受检血浆中凝血酶原、因子X、VII、V、纤维蛋白原总任何一种物质缺乏或存在抗凝物质均可致凝固时间延长。活化部分凝血活酶时间测定：如果血浆中存在内源性凝血系统所需凝血因子加入适量的白陶土

2、脑磷脂悬液及钙离子，白陶土可激活因子XII，驱动内源凝血系统，脑磷脂代替血小板第3因子，通过钙离子作用可使血浆凝固。如果内源系统发生障碍，凝固时间延长。本实验是检测内源凝血系统较敏感筛选试验 凝血酶时间测定：在凝血酶作用，纤维蛋白原转为纤维蛋白。于血浆中加入标准化凝血酶溶液后，血浆凝固时间即为凝血酶时间。纤维蛋白原测定：根据因子I与凝血酶作用最终形成不溶性纤维蛋白的原理。以国际标准品为参比血浆制成标准曲线，用凝血酶来测定血浆凝固时间与血浆中纤维蛋白原浓度呈负相关，从而得到纤维蛋白原的含量。6. 试剂6.1 品牌： DADE公司6.2 货号：凝血酶原（冻干） OUHP49 白陶土脑磷脂混悬液 B

3、4218-2 25mmol/L CACL2溶液 自配 凝血酶（冻干） OWI-M13 纤维蛋白原 B4233-25 CLEAN I 清洗液 GSA500A6.3 包装规格：凝血酶原（冻干） 10瓶/盒 每瓶10mL蒸馏水溶解 白陶土脑磷脂混悬液 10瓶/盒 5mmol/L CACL2溶液 自配 凝血酶（冻干） 10瓶/盒 每瓶5mL稀释液溶解 纤维蛋白原（简装） 10瓶/盒 每瓶1mL蒸馏水溶解 纤维蛋白原（套装） 6瓶/盒 CLEAN I 清洗液 50mL/瓶 内含物： 凝血酶原试剂盒组成 ：凝血酶原冻干粉 10瓶 白陶土脑磷脂混悬液试剂盒： 白陶土脑磷脂混悬液 10瓶 凝血酶试剂盒：凝血酶

4、冻干粉 10瓶稀释液（25mL）1瓶 纤维蛋白原（简装）：纤维蛋白原冻干粉 10瓶 纤维蛋白原（套装）：纤维蛋白原冻干粉 6瓶 稀释液（15mL）3瓶 定标血浆冻干粉 1瓶（1mL蒸馏水溶解 ） 7. 仪器型号：SYSMEX CA15008. 操作步骤：8.1 标本：前缀为02的条形码真空管采集的血液标本。血液凝固后，3000rpm离心10分钟。8.2 质控品I、质控品II的稀释：每瓶加入蒸馏水1mL，轻轻混匀，放置室温10分钟后， 上机测试（见凝血分析仪操作规程）。8.3 正常人标本：在检测前的标本中，选取无凝血疾病障碍至少20位以上的血浆标本，制成混合血浆，作为正常人对照标本，结果输入血凝

5、分析仪（见凝血分析仪操作规程）。 SYSMEX CA1500凝血分析仪标本上机操作（见凝血分析仪操作规程）。注意：测定 标本前必须先测定质控品，未见失控才可测试标本，若有失控查找原因并记录。8.5 仪器测试完毕自动把结果传入电脑，接收数据见凝血分析仪电脑操作程序。9. 线形范围：纤维蛋白原浓度0.25g/L_ 10g/L10. 参考范围： PT: 9.7s12.7s APTT: 19.8s31.8s TT: 13.3s18.1s Fbg: 24.5g/l11. 临床意义11.1 PT延长： 见于先天凝血酶原、因子、和因子的单独和联合缺合或明显减低，以及低（无）纤维蛋白原血症；获得性见于DIC、

6、原发性纤溶症、维生素K缺乏症、血循环中有抗凝物质如口服抗凝剂、肝素和FDP存在。PT缩短：见于先天性因子V增多症、口服避孕药和血栓性疾病。11.2 APTT延长：见于因子VIII、IX、XI、VII缺乏症，且见于严重因子V、X，凝血酶原缺乏。血循环中有抗凝物质时本试验也可延长。缩短见于因子VII和因子V活性增高，DIC高凝期、血栓形成性疾病。11.3 TT延长：见于血循环中FDP增高，血浆中肝素或肝素物质增高，前置胎盘，羊塞，肿瘤播散，严重感染及DIC。11.4 Fbg含量增高见于纤溶性减低如高凝状态，血栓栓塞性疾病。Fbg含量减低，表明纤溶活性增高，见于原发性纤溶亢进，重症肝炎，肝硬化，肝移植，外科手术，前置胎盘，羊水栓塞，肿瘤播散，严重感染及DIC。12. 病人准备、标本要求：0.109mol/L或0.129mol/枸橼酸钠作抗凝剂，抗凝剂与血液比1：9体积比，标本以3000rpm，离心10分钟13. 注意事项：13.1 严格按抗凝剂与血液比为1：9。13.2 血