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1、同济大学附属同济医院检验科血液组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ127第2版标题: (a-NAE) a-醋酸萘酚酯酶染色第1章 第27节第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1 目的；保证a-醋酸萘酚酯酶染色检测结果准确、可靠。2. 适用范围：a-醋酸萘酚酯酶染色检测3. 项目名称：a-醋酸萘酚酯酶染色4. 检测方法：化学染色法5. 原理：血细胞内的a-醋酸萘酚酯酶将基质液中的a-萘酚酯酶水解,产生a-萘酚,萘酚在与坚牢蓝B偶联形成不溶解有色沉淀,定位于酶活性所至之处。6. 试剂6.1 品牌： 丙酮 上海试剂三厂 37%甲醛 上海试剂三厂磷酸氢二钠 上海新华化工厂磷酸二氢钾

2、 上海试剂二厂a-醋酸萘酚 SIGMANN-二甲基甲酰胺溶液 上海华工试剂厂坚牢蓝B SIGMA氟化钠 上海试剂三厂6.2 货号： 丙酮 13-20102365II 37%甲醛 13-20102569II磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 13-001-0802-113IIa-醋酸萘酚 212-599NN-二甲基甲酰胺溶液 坚牢蓝B 223-430氟化钠 13-2010279188II6.3 包装规格： 丙酮 500ml 37%甲醛 500ml 磷酸氢二钠 500g 磷酸二氢钾 500g a-醋酸萘酚 25g NN-二甲基甲酰胺溶液 500ml 坚牢蓝BB 25g 氟化钠 500g6.4 内含物： 6.4

3、.1 固定液:甲醛-丙酮溶液 丙酮 45ml37%甲醛 25ml6.4.2 0.067mol/L磷酸盐缓冲液PH7.6Na2HPO4 20mlKH2PO4 100ml蒸馏水 30ml6.4.3 基质液6.4.3.1称取40mg a-醋酸萘酚,加入0.6mlNN-二甲基甲酰胺溶液.6.4.3.2称取20mg坚牢蓝BB,先加0.6mlPH7.6缓冲液溶液,再加入18.8ml缓冲液溶液.6.4.3.3 NaF:10ml上述溶液+15mgNaF7 仪器：显微镜8 操作步骤：8.1 新鲜涂片冷固定液固定30秒.8.2 水洗待干.8.3 浸入基质液,在37摄氏度水温箱内孵育1小时.8.4 流水冲洗干净.8

4、.5 用苏木素复染1-2分钟9 线性范围：无10 参考范围：油镜观察,细胞浆内棕色颗粒为阳性反应。11 临床意义：正常血细胞的染色反应111 单核细胞系统:原始单核细胞为阴性反应或弱阳性反应,幼单核细胞和单核细胞为阳性反应,这种反应可被氟化钠抑制.11.2 粒细胞系统:各阶段粒细胞为阴性反应,有时少数细胞也呈弱阳性反应,次反应不被氟化钠抑制.11.3 巨核细胞和血小板为阳性反应.11.4 其他细胞:幼红细胞和淋巴细胞一般为阴性反应,有时少数细胞也可呈弱阳性反应,此反应不被氟化钠抑制.浆细胞为阴性反应.12 病人准备标本要求：采取病人骨髓液涂片13 注意事项：13.1 标本新鲜13.2 染色时间要充分。13.3

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