体外诊断试剂临床试验- 胰岛素检测试剂盒（胶乳凝集比浊法）-研究者手册

1、胰岛素检测试剂盒（胶乳凝集比浊法） 2015年9月9日 第一版申办方：xx医疗科技（中国）有限公司研究者手册产品名称：胰岛素检测试剂盒（胶乳凝集比浊法）申 办 者：xx医疗科技（中国）有限公司版本及日期：第一版 2015 年 9 月 17 日目录 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc430596698 1. 产品基本信息 PAGEREF _Toc430596698 h 1 HYPERLINK l _Toc430596699 1.1 糖尿病的背景 PAGEREF _Toc430596699 h 1 HYPERLINK l _Toc430596700 1.2 糖尿病的诊

2、断标准 PAGEREF _Toc430596700 h 2 HYPERLINK l _Toc430596701 根据WHO最新糖尿病诊断标准: PAGEREF _Toc430596701 h 2 HYPERLINK l _Toc430596702 1.3 胰岛素检测在糖尿病诊断中的定位 PAGEREF _Toc430596702 h 3 HYPERLINK l _Toc430596703 2. 胰岛素检测试剂盒概述 PAGEREF _Toc430596703 h 3 HYPERLINK l _Toc430596704 2.1 测定原理 PAGEREF _Toc430596704 h 3 HYP

3、ERLINK l _Toc430596705 2.2 介绍 PAGEREF _Toc430596705 h 3 HYPERLINK l _Toc430596706 2.3 主要成分 PAGEREF _Toc430596706 h 3 HYPERLINK l _Toc430596707 2.4 检测原理 PAGEREF _Toc430596707 h 3 HYPERLINK l _Toc430596708 2.5 试验参考范围 PAGEREF _Toc430596708 h 4 HYPERLINK l _Toc430596709 2.6 适用机型 PAGEREF _Toc430596709 h

4、4 HYPERLINK l _Toc430596710 3. 产品使用概要 PAGEREF _Toc430596710 h 4 HYPERLINK l _Toc430596711 3.1.1 测定样本 PAGEREF _Toc430596711 h 4 HYPERLINK l _Toc430596712 3.1.2 干扰物质 PAGEREF _Toc430596712 h 4 HYPERLINK l _Toc430596713 3.1.3 其他 PAGEREF _Toc430596713 h 5 HYPERLINK l _Toc430596714 3.1.4 试剂配制 PAGEREF _Toc

5、430596714 h 5 HYPERLINK l _Toc430596715 3.2 测定结果的判断方法 PAGEREF _Toc430596715 h 5 HYPERLINK l _Toc430596716 3.2.1 参考范围 PAGEREF _Toc430596716 h 5 HYPERLINK l _Toc430596717 3.2.2 评判注意事项 PAGEREF _Toc430596717 h 5 HYPERLINK l _Toc430596718 3.3 性能 PAGEREF _Toc430596718 h 5 HYPERLINK l _Toc430596719 3.3.1 灵

6、敏度 PAGEREF _Toc430596719 h 5 HYPERLINK l _Toc430596720 3.3.2 准确度 PAGEREF _Toc430596720 h 5 HYPERLINK l _Toc430596721 3.3.3 重复性 PAGEREF _Toc430596721 h 5 HYPERLINK l _Toc430596722 3.3.4 线性范围 PAGEREF _Toc430596722 h 6 HYPERLINK l _Toc430596723 3.3.5 相关性 PAGEREF _Toc430596723 h 6 HYPERLINK l _Toc430596

7、724 3.3.6 校准用基准物质 PAGEREF _Toc430596724 h 6 HYPERLINK l _Toc430596725 4. 产品风险分析 PAGEREF _Toc430596725 h 6 HYPERLINK l _Toc430596726 4.1 操作上(防止危险)的注意事项 PAGEREF _Toc430596726 h 6 HYPERLINK l _Toc430596727 4.2 使用上的注意事项 PAGEREF _Toc430596727 h 6 HYPERLINK l _Toc430596728 4.3 废物处理上的注意事项 PAGEREF _Toc43059

8、6728 h 7 HYPERLINK l _Toc430596729 4.4 其他的注意事项 PAGEREF _Toc430596729 h 7 HYPERLINK l _Toc430596730 5. 本试验的质量管理 PAGEREF _Toc430596730 h 7 HYPERLINK l _Toc430596731 6. 本实验数据管理要求 PAGEREF _Toc430596731 h 8 HYPERLINK l _Toc430596732 7. 不良反应预测及应当采取的措施 PAGEREF _Toc430596732 h 8 HYPERLINK l _Toc430596733 8.

9、 受试者个人资料保密 PAGEREF _Toc430596733 h 8 HYPERLINK l _Toc430596734 8.1 受试者编号 PAGEREF _Toc430596734 h 8 HYPERLINK l _Toc430596735 8.2 试验资料保管 PAGEREF _Toc430596735 h 8 HYPERLINK l _Toc430596736 9. 伦理相关声明 PAGEREF _Toc430596736 h 8 HYPERLINK l _Toc430596737 10. 参考文献 PAGEREF _Toc430596737 h 8 保密声明本研究者手册中所包含的

10、所有信息的所有权归申办方，因此，仅提供给研究者、合作研究者、伦理委员会和监督管理部门等相关的医疗机构审阅。在未得到申办方书面的批准情况下，除了在与可能参加本研究的受试者签署知情同意书时，向其做必要的解释外，严禁将任何信息告知与本研究无关的第三方。产品基本信息糖尿病的背景糖尿病是由多种病因引起以慢性高血糖为特征的代谢紊乱。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物效应降低（胰岛素抵抗）所致。慢性高血糖将导致多种组织，特别是眼、肾脏、神经、心血管的长期损伤、功能缺陷和衰竭。显著高血糖的症状为多饮、多尿、多食和体重下降。世界卫生组织将糖尿病分为四种类型：1型糖尿病、2型糖尿病、其他类型糖尿病和妊娠期糖尿病

11、。不同类型的糖尿病都会导致胰腺中的细胞不能产生足量的胰岛素以降低血糖的浓度，导致高血糖症的发生。1型糖尿病一般是由于自体免疫系统破坏产生胰岛素的细胞导致的；2型糖尿病史由于组织细胞的胰岛素抵抗、细胞功能衰退或其他多种原因引起的；妊娠期糖尿病则与2型糖尿病相似，也是源于细胞的胰岛素抵抗，不过其胰岛素抵抗是由于妊娠期妇女分泌的激素所导致的。目前全球糖尿病患者已超过1.2亿人，我国患者人群居世界第二，1994年就已达2000万。据世界卫生组织预计，到2025年，全球成人糖尿病患者人数将增至3亿，而中国糖尿病患者人数将达到4000万，未来50年内糖尿病仍将是中国一个严重的公共卫生问题。胰岛素是一种由胰

12、脏内细胞分泌的蛋白质激素，是机体内唯一降低血糖的激素，同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。胰岛素合成的控制基因在第11对染色体短臂上。胰岛素的分子量5700，由两条氨基酸肽链组成。A链有21个氨基酸，B链有30个氨基酸。A-B链之间有两处二硫键连接。胰岛细胞中储存胰岛素约200U，每天分泌约40U。胰岛素的生物合成速度受血浆葡萄糖浓度的影响，当血糖浓度升高时，细胞中胰岛素原含量增加，胰岛素合成加速。胰岛素对于葡萄糖在细胞水平的转运和储存是至关重要的，它帮助调控血液中的葡萄糖水平，并且在脂类代谢中发挥作用。当餐后血糖水平上升，机体释放胰岛素促进葡萄糖进入组织细胞，尤其是用于能量合成的肌细胞和脂肪细胞

13、。胰岛素将在肝脏中储存过量的血糖转化为糖原（用于短期能量贮存）和/或用于生成脂肪酸。最终用于脂肪细胞合成甘油三酯进行更长期更高浓度的能量贮存。血胰岛素检查，可以判定糖尿病患者是1型患者还是2型患者。主要适合于没有使用胰岛素治疗的患者，可在空腹及餐后2小时抽血进行测定。空腹时，血浆胰岛素浓度是515U/mL。进餐后血浆胰岛素水平可增加510倍。如果胰岛素水平明显降低，就称之为绝对缺乏，可见于1型糖尿病；如果并没有明显减少，而表现为血糖升高，就称为相对缺乏，是因为胰岛素发挥作用的环节出现故障，常见于存在胰岛素抵抗的2型糖尿病患者。通过检测血清胰岛素水平，可以更清楚地了解糖尿病病情的严重程度，并有助

14、于判别预后，制定相应的治疗方案。 通常在葡萄糖检测异常之后，或者当病人出现急、慢性低血糖症的症状时，诸如出汗、心悸、饥饿、意识错乱、视力模糊、眩晕、晕厥和癫痫发作时，需要检测胰岛素水平。尽管这些症状伴随低血糖，但也可能由于其他情况造成。胰岛素水平升高出现于：胰岛素瘤、胰岛素耐受、肥胖症、肢端肥大症、柯兴氏综合征、果糖或者半乳糖不耐症和服用皮质激素、左旋多巴、口服避孕药等药物；胰岛素水平下降出现于：糖尿病、垂体机能减退症和胰脏疾病，例如慢性胰腺炎（包括纤维囊泡症）和胰腺癌等。血浆免疫反应性胰岛素（IRI：immunoreactive insulin）能够反映胰腺分泌胰岛素的机能与末梢组织胰岛素的

15、敏感性，因此被广泛用于测定糖代谢异常（糖尿病、低血糖）疾病的诊断与病情的把握。糖尿病的诊断标准根据WHO最新糖尿病诊断标准:类别血浆全血静脉毛细血管静脉毛细血管（糖尿病）空腹=7.0=7.0=6.1=6.1餐后2小时=11.0=12.2=10.0=11.1（糖耐量损伤）空腹6.1-6.96.1-6.95.6-6.05.6-6.0餐后2小时7.8-11.08.9-12.16.7-9.97.8-11.0有典型糖尿病症状(多尿、多饮和不能解释的体重下降)者，任意血糖11.1mmol/L或空腹血糖(FPG)7.0mmol/L，为 HYPERLINK /changshi/6.html 糖尿病患者。空腹血

16、糖(FPG)6.11mmol/L并且餐后2h血糖(2hPG)7.77mmol/L，为正常。餐后2h血糖(2hPG)7.77mmol/L,但11.1mmol/L时为糖耐量损伤(IGT)， HYPERLINK /xuetang/32.html 空腹血糖(FPG)6.11mmol/L,但6.99mmo/L时为空腹血糖损伤(IFG)胰岛素检测在糖尿病诊断中的定位在新的 HYPERLINK /zhenduan/29.html 糖尿病诊断标准中降低了空腹 HYPERLINK /xuetang/10.html 血糖的指标，并提出了 HYPERLINK /xuetang/31.html 空腹血糖损伤（IFG）

17、概念。降低空腹血糖标准是美国糖尿病协会1997年提出的，他们发现空腹血糖 7.8mmol/L时，餐后2小时血糖多在12.813.9mmol/L之间,与原来餐后2小时的血糖标准（11.1mmol/L）不能吻合。修改后的 血糖标准使空腹和餐后2小时得到了统一。同时也有利于及时发现糖尿病。这里特别说明的是IFG和 HYPERLINK /xuetang/31.html 糖耐量损伤(IGT)都是介于糖尿病人和正常人之间的一种状况。在我国医生在作出诊断时往往要结合临床症状加以考虑，如果有症状只要有一次空腹或餐后血糖达到上述糖尿病诊断标准，就可以判定为糖尿病。如果完全沒有糖尿病症状，就需要空腹和餐后血糖同时

18、达到上述标准，才可以判为糖尿病。胰岛素检测试剂盒概述测定原理在本试验中，使用的是基于胶乳免疫比浊法原理的KL-6。样本中的胰岛素与鼠抗人胰岛素单克隆抗体致敏胶乳颗粒发生抗原抗体反应，产生凝集。对此凝集物质的吸光度进行测定，通过测定吸光度的变化可以求出标本中胰岛素的浓度。本试剂是使用生化自动分析仪可测定人血清或血浆中的胰岛素水平的液状试剂。不需要调制试剂或样本稀释等检测前准备。测定仅需10分钟左右。介绍xx医疗株式会社生产的胰岛素检测试剂盒（胶乳凝集比浊法）为液体双试剂，采用胶乳凝集比浊法定量检测血清中的胰岛素浓度。主要成分胰岛素缓冲液：MES缓冲液、Tris缓冲液、DMSO溶剂胰岛素胶乳液：鼠

19、抗人胰岛素单克隆抗体致敏胶乳颗粒检测原理 标本中的胰岛素与鼠抗人胰岛素单克隆抗体致敏胶乳颗粒发生抗原抗体反应，产生凝集。对此凝集物质的吸光度进行测定，通过测定吸光度的变化可以求出标本中胰岛素的浓度。 本品为无需调制的液态试剂，采用胶乳凝集比浊法，不需要调制试剂或样本稀释等检测前准备，可以在全自动生化分析装置上直接使用，测定仅需10min左右；试剂稳定性良好，有效期1年，210保存。试验参考范围空腹时为510U/mL 适用机型本产品应用于定量检测血清或血浆中胰岛素的浓度，适用于各种全自动生化分析装置：包括日立高新科学系统 7700、7180、7170S、7170、LABOSPECT008型（罗氏

20、模块）、东芝医疗系统 TBA-120FR型（雅培ARCHITECT C8000）、贝克曼库尔特 AU-640型、JEOL BM6070、BM6050、BM9130、BM1650(BM9030)型全自动生化分析仪。产品使用概要 = 3.1 * Arabic = 3.1 3.1标本的性质、标本采集法测定样本1. 标本的性质、标本采集法1) 可以使用血清或血浆（肝磷脂血浆、EDTA血浆、NaF-EDTA血浆）标本。2) 血清（浆）分离后，请于当日测定，如当日无法测定，则需冷冻保存。测定时，请将标本恢复至室温（1530）后再进行测定。2周以内测定的情况下，请在-30下冷冻保存。标本反复冻融2次，对检测

21、结果无影响。二周以内测定时 冷藏（4）长期保存时 -80以下干扰物质1) 游离型胆红素20mg/dL为止，结合型胆红素20mg/dL为止，福尔马肼浊度2000度为止，风湿因子（RF）500IU/mL以下，对测定值没有影响。2) 红细胞中含有胰岛素分解酶，会导致测定值偏低，因此请勿使用溶血标本3）。3) 胃泌素10g/mL为止，胰高血糖素10g/mL为止，胰岛素原12.2ng/mL为止，胰液10g/mL为止，C肽3.9ng/mL为止，对测定值没有影响。其他1) 请将胰岛素胶乳液缓慢摇晃混合后使用，并确认在不起泡的情况下使用。2) 校准时，请使用本公司的胰岛素校准品。3) 标本的浓度超过检测范围时

22、，请用生理盐水稀释后重新测定。生理盐水的稀释倍率最高为3倍。试剂配制试剂：胰岛素缓冲液开瓶后即可使用，无需配制。试剂：胰岛素胶乳液开瓶后即可使用，无需配制。在使用本品前，请将胰岛素胶乳液缓慢颠倒混合后使用，并确认在不起泡的情况下使用。测定结果的判断方法 参考范围空腹时 : 510U/mL 评判注意事项 1. 由于标本不同，试剂会发生与标本中目的成分以外的物质反应或干扰反应的情况。若对测定值或测定结果有疑问，请进行重新测定或稀释后再测定，也可用其他测定方法进行确认。2. 标本中含有抗胰岛素抗体时，测定结果不能真实反映出血中胰岛素的浓度，因此在临床上需要基于测定结果，并结合其他检查结果进行综合判断

23、。性能 灵敏度(1)试剂空白 试剂空白吸光度在0.048以下(2)灵敏度 胰岛素在浓度10U/mL时的吸光度与试剂空白的差值为0.0140.050准确度 测定已知浓度的管理用标本，测定值为已知浓度的85115%。重复性 测定同一标本10次，变异系数（CV值）10%。线性范围1150U/mL r0.9900相关性 1) 血清N=85 r=0.991 y=1.07x+0.81 对照法：日本国已批准上市体外诊断试剂（胶乳凝集比浊法）2）血浆N=101 r=0.989 y=0.93x+0.63 对照法：根据本方法，与同时采集的血清做比较校准用基准物质 1st WHO reference standar

24、d 66/304（NIBSC）世界卫生组织参考标准产品风险分析操作上(防止危险)的注意事项1) 请把标本当作可能感染HIV、HBV、HCV等的危险物质处置。为了避免检测时感染的危险,请使用一次性手套,另外,请不要通过口来使用吸管进行移液。2) 本品含有作为防腐剂的Proclin300，对皮肤有刺激。若误接触到皮肤或衣物时，请迅速用水充分冲洗，如遇皮肤发炎时请接受医生治疗。使用上的注意事项1) 请按照本品的保存方法保存本品，避免冷冻。冻结后的试剂品质会劣化，导致无法得到准确结果，请勿使用。2) 为确保测定结果的准确性，请勿使用已过有效期的试剂。 3) 请避免中途添加试剂使用。4) 使用本品测定后

25、请密封后冷藏保存。5) 不同批号试剂不可以混合使用。6) 操作时请避免日光直射。7) 若胰岛素缓冲液或胰岛素胶乳液任何一个的批号发生变化时，请重新实施仪器校准。废物处理上的注意事项在废弃使用过的标本及标本容器前,请浸泡于0.1%浓度以上的次氯酸钠溶液中一小时以上,或者进行高温高压灭菌 (121、20分钟)处理。标本或含有标本的液体溅出时,请用0.1%浓度以上的次氯酸钠溶液等充分地擦拭。在废弃试剂及处理过的标本等时,请遵循有关废弃物的规定、作为医疗废弃物或工业废弃物等处理。在废弃试剂时,请注意水质污染防治法等规定。其他的注意事项请不要将试剂瓶等转用于其他目的。本试验的质量管理参与试验的每个中心都应具有本试验所需的良好的医疗设施、实验室设备及人员配备，以确保受试者的安全及实验室检查结果的准确可靠。各中心的主要研究者负责向参与本试验的该中心工作人员说明有关本试验的资料、规定和职责，确保有足够数量并且符合试验方案的受试者进入临床试验；各研究者在向受试者解释有关试验的详细情况并取得知情同意书后才开始试验；研究者应按本方案如实、认真填写与本试验相关的原始病历内容。原始病历中的所有内容均应反复核对，确保无误。各中心主要研究者对本中心完成的病例报告表的真实性及可靠性负责。本公司对临床试验进行监查，以保证试验过程、病例报告表填写以及其他所有的报告符合体外