专科-血液常用检查二-2

1、血液常用检查二第一页，共一百二十五页。主要内容白细胞计数白细胞分类计数白细胞形态学检查血小板计数血小板形态检查第二页，共一百二十五页。白细胞计数(white blood cell count，WBC)： 指测定单位容积的外周血各种白细胞的总数。检测原理 显微镜计数法 用白细胞计数稀释液(稀乙酸)，将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞和固定白细胞 充入改进牛鲍(Neubauer)计数板， 在显微镜下计数一定范围内的白细胞数 经换算求得每升血液中各种白细胞的总数。一、白细胞计数第三页，共一百二十五页。第四页，共一百二十五页。第五页，共一百二十五页。【质量保证】1计数误差 (1)技术误差：标准、熟练的

2、操作，仪器的校正、 试剂的标准化和操作人责任心。 1)器材：清洁、枯燥，校准，合格试剂。 2)标本要求：血液分析仪检测的标本要求及质量保证见表225。第六页，共一百二十五页。第七页，共一百二十五页。3)加盖玻片影响：WHO推荐采用“推式法，此法较“盖式法更能保证充液体积的高度为0.10mm。 4)充池影响： 充池前充分混匀白细胞悬液，防止气泡。 充池应防止充液过多、过少、断续，防止气泡及充液后移动盖玻片。 技术误差第八页，共一百二十五页。5)计数原那么：计数压线细胞时， 数上不数下, 数左不数右。 6)计数室内细胞分布要均匀：白细胞总数在正常范围内时，各大方格间的细胞数不得相差8个以上。2次重

3、复计数误差不超过l0。7)有核红细胞影响：外周血出现有核红细胞，可使白细胞计数结果偏高，须校正。技术误差第九页，共一百二十五页。(2)固有误差：主要是指计数域误差(field error)。 是由于每次充池后血细胞在计数室内分布不同 计数域误差变异系数(CV)可随计数的细胞数量增多而减小。 白细胞数量太少时(15X109L) 稀释 固有误差还应包括计数室和吸管的使用次数，即计数池误差(chambererror)和吸管误差 计数误差第十页，共一百二十五页。3)生理状态影响： 运动、劳动、冷热水浴、酷热、严寒等常出现一过性白细胞增高；一日之内白细胞数最高值与最低值可相差1倍。另外，吸烟者白细胞总数

4、平均较非吸烟者高30。最好在固定检查时间。计数误差第十一页，共一百二十五页。 2质量考核与评价 (1)经验控制 (1)与红细胞数相比照较：正常范围下，红细胞数白细胞数约为500：1。 (2)判断白细胞计数与显微镜白细胞分布密度一致性(表24)：由于手工制备血涂片难以标准化，因此也只能粗略估计，有矛盾者再复查。第十二页，共一百二十五页。表24 血涂片上WBC密度与WBC数量关系 血涂片上WBC数：HP WBC(109L) 24 4 7 4 6 79 6 10 10 12 10 12 13 18第十三页，共一百二十五页。(2). 两差比值评价法(3). 双份计数标准差评价法 2质量考核与评价第十四

5、页，共一百二十五页。成人： (410) 109L 新生儿： (15 20) 109L 6月2岁： ( 11 12) 109L参考值第十五页，共一百二十五页。10109L称白细胞增多(1eukocytosis)，4109L称白细胞减低(1eukopenia)。白细胞数在生理或病理情况下均可有变异。 由于中性粒细胞占白细胞总数的5070，其增高和减低直接影响白细胞总数的变化，中性粒细胞增减的意义与白细胞总数的增减的意义根本上是一致的。 有时两者的数量关系也有不一致的情况，要具体情况具体分析。临床意义第十六页，共一百二十五页。 白细胞分类计数(differential count，DC)是将血液制成

6、涂片，经染色后在油镜下观察白细胞的形态并进行分类，求得各种类型白细胞的比值(百分率) 。分析白细胞分类变化意义时，必须计算各类型白细胞的绝对值(各类型白细胞绝对值白细胞计数值白细胞分类计数百分率)，才有诊断参考价值。 白细胞分类计数的方法有两种： 一种是传统显微镜分类法， 一种是血液分析仪分类计数法。二、白细胞分类计数第十七页，共一百二十五页。 检测原理 (显微镜分类法) 将血液涂成薄膜， 经Wright染色后， 于显微镜下，按白细胞形态学特征逐个分别计数，得出各种白细胞百分率。 结合白细胞计数结果，可间接求出每升血液中各种白细胞的绝对值。第十八页，共一百二十五页。第十九页，共一百二十五页。第

7、二十页，共一百二十五页。质量控制分析前质量控制分析中质量控制 血涂片制备 染色 镜检部位 镜检白细胞数量分析后质量控制第二十一页，共一百二十五页。成人白细胞分类参考值 百分率() 绝对值(109L)中性杆状核粒细胞 1 5 0.04 0.5中性分叶核粒细胞 50 70 2 7嗜酸性粒细胞 0.5 5 0.05 0.5嗜碱性粒细胞 0 1 0 1淋巴细胞 20 40 0.8 4单核细胞 3 8 0.12 0.8参考值第二十二页，共一百二十五页。正常情况下，中性杆状核粒细胞占1一5，中性分叶核粒细胞占50一70， 2叶核细胞为1030， 3叶核为4050， 4叶核为10一20， 5叶核小于3。 正

8、常时，外周血中性粒细胞核以3叶的居多，杆状核与分叶核之间的正常比值为 l ：13。参考值第二十三页，共一百二十五页。1.中性粒细胞增多 白细胞总数与中性粒细胞(neutrophil，N) 白细胞总数与中性粒细胞数量增多及减少的定义见表. 在外周血中，由于中性粒细胞占白细胞总数的50一70，临床意义根本一致。 淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等数量上的改变也会引起白细胞总数的变化。因此，还应具体分析。临床意义第二十四页，共一百二十五页。1)中性粒细胞生理性增多：常不伴有白细胞质量的改变。 年龄：临床意义第二十五页，共一百二十五页。1)生理性增多： 日间变化：一日之间最高值与最低值之间可相差1倍。 运动、疼

9、痛和情绪的影响：如剧烈运动可使短时间内白细胞高达35X109L，以中性粒细胞为主。当运动结束后迅即恢复原有水平。 妊娠与分娩：分娩后2 5d内恢复正常。 其他：吸烟者白细胞的生理波动很大，30%以内波动多无意义，只有通过定时和反复观察才有意义。第二十六页，共一百二十五页。2)病理性增多：外周血白细胞10X109L 反响性增多，可见于： A、 急性感染或炎症：为引起白细胞总数和中性粒细胞增多最常见的原因。 球菌、杆菌、真菌、放线菌、病毒、 立克次体、螺旋体、寄生虫等。 增高程度与病原体种类、感染部位和程度以及机体的反响性等有关 第二十七页，共一百二十五页。B、类白血病反响：指机体在有明确病因的刺

10、激下，出现白细胞数中度增高(50Xl09L)，多以成熟中性粒细胞增多为主，原始、早幼粒细胞增多少见(10)，常伴较明显的中性粒细胞中毒性改变，其他细胞均无明显变化。第二十八页，共一百二十五页。C. 广泛组织损伤或坏死： 严重外伤、手术创伤、大面积烧伤、冻伤以及血管栓塞(如心肌梗死、肺梗死)所致局部缺血性坏死等使组织严重损伤者，在1236h内常见白细胞增高，以中性分叶核粒细胞增多为主。 有无术后感染，与心绞痛鉴别。 第二十九页，共一百二十五页。 D、 急性溶血：缺氧及分解产物刺激 E、 急性失血： 消化道大量出血、内脏破裂如脾破裂或输卵管妊娠破裂等，白细胞总数常在12h内迅速增高，可达(10 2

11、0)X109L，但此时的红细胞数和血红蛋白量仍可暂时保持正常范围，待组织间液吸收回血液或补充循环血容量后，才出现红细胞和血红蛋白减低。早期诊断内出血的参考指标。第三十页，共一百二十五页。F、急性中毒：a、外源性中毒：化学物质或药物如汞、铅、安眠药急性中毒，生物毒素如昆虫毒、蛇毒以及植物毒素如毒蕈中毒。b、内源性中毒：如尿毒症、糖尿病酮症酸中毒、子痫、内分泌疾病危象等。第三十一页，共一百二十五页。G、恶性肿瘤： 非造血系统恶性肿瘤可出现持续性白细胞增高，以中性分叶核粒细胞增多为主。其机制可能为： 肿瘤坏死分解产物刺激 肿瘤细胞(如肝癌、胃癌等) 促粒细胞生成因子。 恶性肿瘤骨髓转移，破坏骨髓调控

12、作用等H、其他原因： 见于类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、痛风及严重缺氧 应用皮质激素、肾上腺素、氯化锂等。 第三十二页，共一百二十五页。 异常增生性增多 A、 白血病：第三十三页，共一百二十五页。B、骨髓增殖性疾病： 包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和骨髓纤维化症(也可包括慢性粒细胞白血病)等。 本组疾病均系多能干细胞的病变引起，具有潜在演变为急性白血病的趋势。 其特点为除了一种血细胞成分的主要增多外，常伴有其他一种或两种血细胞的增生，故常有中性粒细胞增多，白细胞数常在(1030)X109L。 第三十四页，共一百二十五页。 (2)中性粒细胞减低(neutropenia)： 白细

13、胞减低主要是中性粒细胞减低。粒细胞减低症(granulocytopenia)： 中性粒细胞绝对值成人 2.0X109L, 儿童1.5X109L粒细胞缺乏症(agranulocytosis) ： 外周血白细胞2.0X109L, 中性粒细胞绝对值0.05109L)的一种征象第三十八页，共一百二十五页。 第三十九页，共一百二十五页。(2)嗜碱性粒细胞减少(basopenia)： 多无临床意义。减少可见于过敏性休克、促肾上腺皮质激素或糖皮质激素应用过量以及应激反响等。 第四十页，共一百二十五页。3淋巴细胞(lymphocyte，L) (1)淋巴细胞增多(lymphocytosis)：指外周血淋巴细胞绝

14、对值增高成人 4.0109L；儿童：4岁以上7.2109L、 4岁以下9.0109L。 第四十一页，共一百二十五页。(1)淋巴细胞增多：第四十二页，共一百二十五页。(2)淋巴细胞减少(1ymphopenia)： 指外周血淋巴细胞绝对值减低(成人5%),表示感染程度较轻,机体抵抗力较强。 中度左移：白细胞总数及中性粒细胞百分数均增高，杆状核粒细胞10%并伴有少数晚幼粒细胞及中毒性改变,表示有严重感染。重度左移：白细胞总数及中性粒细胞百分数明显增高，杆状核粒细胞25%并出现更幼稚的粒细胞，常见于粒细胞白血病或中性粒细胞型类白血病。 第八十六页，共一百二十五页。3中性粒细胞的核象变化(nuclear

15、 shift)(2)核右移(shifttotheright)：外周血中性分叶核粒细胞增多，并且5叶核以上的中性粒细胞3时称为核右移。核右移严重者常伴白细胞总数减少，反映造血功能衰退，与缺乏造血 物质、DNA合成障碍和骨髓造血功能减退有关。 第八十七页，共一百二十五页。第八十八页，共一百二十五页。异型淋巴细胞：在病毒或过敏原刺激下，可使淋巴细胞增生，并出现某些形态学变化，称为异型淋巴细胞。周围血中的异型淋巴细胞主要是T淋巴 异型淋巴细胞第八十九页，共一百二十五页。 I型(空泡型，浆细胞型)：最多见。胞体比正常淋巴细胞稍大，多为圆形、椭圆形或不规那么形。核圆形、肾形或分叶状，常偏位。染色质粗糙，呈

16、粗网状或小块状，排列不规那么。胞质丰富，染深蓝色，含空泡或呈泡沫状。第九十页，共一百二十五页。第九十一页，共一百二十五页。 型(不规那么型，单核细胞型)：胞体较大，外形常不规那么，可有多数伪足。核形状及结构与I型相同或更不规那么，染色质较粗糙致密。胞质丰富，染淡蓝或灰蓝色，有透明感，边缘处着色较深，一般无空泡，可有少数嗜天青颗粒。第九十二页，共一百二十五页。第九十三页，共一百二十五页。型(幼稚型)：胞体较大，核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列，可见12个核仁。胞质深蓝色，可有少数空泡。 第九十四页，共一百二十五页。第九十五页，共一百二十五页。卫星核淋巴细胞 理化因素对细胞的损伤，致畸、致突变

17、的客观指标之一第九十六页，共一百二十五页。巨多分叶核中性粒细胞：细胞直径达1625m ，核分叶常在5叶以上，甚至在10叶以上，核染色质疏松。常见于巨幼细胞贫血、抗代谢药物治疗后。中性粒细胞的核形态异常第九十七页，共一百二十五页。异常粒细胞形态第九十八页，共一百二十五页。棒状小体：在血涂片中，白细胞胞质中出现呈紫红色细杆状物质，长约16m，1条或数条不定，称为棒状小体。早幼粒细胞白血病(M3型) ,急性单核细胞白血病均可出现。而在急性淋巴细胞白血病中那么不出现。第九十九页，共一百二十五页。 2、棒状小体(Auer body)：在Wright或Giemsa染色的血涂片中，白细胞胞质中出现呈紫红色细

18、杆状物质，长约16m，1条或数条不定，称为棒状小体。 这种棒状小体只出现在白血病细胞中，故见到棒状小体就可确诊为急性白血病。急性粒细胞白血病呈粗短棒状，急性单核细胞白血病呈细而长的棒状小体。急性淋巴细胞白血病中不出现棒状小体。第一百页，共一百二十五页。异常粒细胞形态第一百零一页，共一百二十五页。血小板假性减低：如血小板冷凝集、异常蛋白血症、巨血小板、血小板卫星现象、高脂血症、乙二胺四乙酸诱导的血小板聚集。假性血小板增高：可来自白细胞和红细胞的碎片、小红细胞，冷球蛋白血症、疟疾等。正常血小板具有异质性 ：正常血小板大小、形态之间变异较大。第一百零二页，共一百二十五页。一、血小板计数 血小板计数(

19、plateletcount，PLT)是测定全血中血小板的浓度，是止血凝血检查最常用的试验之一。血小板功能：维持血管内皮完整性和黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩。检测原理 PLT的测定原理与血液红(白)细胞计数相似(见表2-54)。 第三节 血小板检查第一百零三页，共一百二十五页。检测原理第一百零四页，共一百二十五页。普通光学显微镜直接计数法的方法学评价第一百零五页，共一百二十五页。第一百零六页，共一百二十五页。血小板体积小，其形态的识别，特别容易受其他杂物的干扰。血小板在体外易于粘附、聚集和变性破坏。血小板计数的质量控制原那么是：防止血小板的激活和破坏，防止杂物污染。质量控制第一百零七页，共一

20、百二十五页。 1.必须注意整个实验前、中、后各个环节 2.由经验丰富的检验人员复查核对血小板 计数结果 3.排除非技术因素的干扰第一百零八页，共一百二十五页。 方法学评价3相差显微镜直接计数法 易于识别，还可照相后核对计数结果，作为手工法血小板计数的参考方法。 4普通光学显微镜直接计数法草酸铵稀释液：破坏红细胞能力强，血小板形态清晰易辨，为首选稀释液法；复方尿素稀释液：使血小板胀大后易识别，但尿素易分解，不能完全破坏红细胞；高铁氰化钾稀释液：不能完全破坏红细胞 。第一百零九页，共一百二十五页。参考值 (100300)X109L。 临床意义 生理性变化午后略高于早晨；春季较冬季低；平原居民较高原

21、居民低；月经前减低，月经后增高；妊娠中晚期增高，分娩后减低；运动、饱餐后增高，休息后恢复；静脉血血小板计数比毛细血管高10第一百一十页，共一百二十五页。病理性变化：血小板减低是引起出血常见原因。血小板在(2050)X109L时可，可有轻度出血或手术后出血；低于20X109L，可有较严重的出血；低于5X109L时，可导致严重出血。血小板计数超过400X109L为血小板增多。 病理性血小板减少和增多的原因及意义见表255。第一百一十一页，共一百二十五页。第一百一十二页，共一百二十五页。二、血小板形态检查(一)正常血小板形态 正常血小板(normalplatelet)呈两面微凸的圆盘状，直径约153

22、pm，新生血小板体积大，成熟者体积小。在血涂片上往往散在或成簇分布，其形态多数为圆形、椭圆形或略欠规那么；胞质呈淡蓝或淡红色，中心部位有细小、分布均匀而相聚或分散于胞质中的的紫红色颗粒。第一百一十三页，共一百二十五页。正常血小板形态 第一百一十四页，共一百二十五页。 (二)异常血小板形态 1、大小异常 大血小板：常为7-20m,胞浆中嗜天青颗粒细小或融合为大颗粒,主要见于特发性血小板减少性紫癜,粒细胞白血病、血小板无力症。小血小板：直径小于1.5m,主要见于缺铁性贫血、再生障碍性贫血等。第一百一十五页，共一百二十五页。2形态异常 血小板可以出现杆状、逗点状、蝌蚪状、蛇形和丝状突起等不规那么和畸形血小板，正常人偶见。影响血小板形状改变因素很多，各种形态异常又无特异性，因此不规那么和畸形的血小板比值超过10时才有临床意义。第一百一十六页，共一百二十五页。(1)血小板颗粒减少：血小板胞质内嗜天青颗粒减少或无颗粒，胞质灰蓝或淡蓝色。见于骨髓增生或骨髓增生异常综合征。血小板颗粒减少也可偶见于EDTA抗凝血血涂片中。 (2)血小板卫星现象：血小板黏附、围绕于中性粒细胞(或偶尔黏附于单核细胞)的现象(见以下图),有时可见血小板吞噬现象。血小板卫星现象是血液分析仪血小板计数假性减少的原因之一(血小板被误计为白细胞数)。第一百一十七页，共一百二十五页。