Agilent1260高效液相色谱仪操作规程(2021年整理)

1、第 页共10页Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）的内容能够给您的工作和学习带来便利。同时也真诚的希望收到您的建议和反馈，这将是我们进步的源泉，前进的动力。本文可编辑可修改，如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅，最后祝您生活愉快业绩进步，以下为Agilent

2、1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）的全部内容。Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）第 页共10页作业指导书Agilent1260高效液相色谱仪操作规程文件编号ZAJC-3T001批准人批准日期编制人编制日期目的正确使用仪器，确保化验结果的准确度、精密度，延长仪器使用寿命2。范适用于Agilent1260高效液相色谱仪及色谱数据工作站的操作。3。职责3.1操作人员：按照本操作规程操作仪器，对仪器进行自检，作使用登记。3。2负责人:负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行定期自检、仪器综合管理。4。要求4。1开机4.1.1溶剂准备按要求准备所需流

3、动相，每瓶均超声10min排气，将原来浸泡在甲醇中的滤头取出对应放在各个流动相中（A:二次蒸馏水；D:缓冲溶液;B:色谱纯甲醇C：色谱纯乙腈）。4。1.2开启工作站4。1.2。1启动计算机打开计算机电源，登陆windows操作系统.Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）4.1。2.2启动工作站打开Agilent1260各模块电源,待Agilent1260各模块自检完成后（各模块右上角指示灯为黄色或者无色），点击屏幕桌面图标“HPLC1260（联机）”，则进入工作界面。模块右上角状态灯颜色说明:无色：未开电源或者模块准备就绪;黄色：模块未准备就；绿色：正在进样分析；

4、红色：模块出错;所有模块红色：仪器有漏液工作站图形颜色说明：绿色：模块准备就绪；黄色:模块未准备就绪；蓝色：正在进样分析;红色：出错或者不能联机；灰色：此模块没启用。将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏，系统会自动显示未就绪或出错的原因。4。1。3冲洗流动相管路反时针旋开泵模块上的溶液排空阀，右键单击泵视图的空白处,选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。将实验中需要的各个通道分别设置“溶剂”为100%,点击确定开始冲洗，每个通道冲洗3-5分钟，若冲洗通道时压力显示超过10bar第4页共10页Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）则可换过滤白头.4。1.4平衡

5、柱子冲洗完柱子，按要求调整流动相速率及流动相比例,顺时针旋转排空阀，关闭溶液排空阀（确认泵流量为1ml/min），然后右键点击需用检测器模块视图的空白处，选择“方法”进入检测器的参数设置界面,按要求设置参数（停止时间与泵一致），后点击右键，选择“控制”，在弹出的窗口选择打开，开始平衡柱子，监视信号基线和压力，等待平稳后即可进样（若用缓冲溶液和有机相作为流动相,先用水和有机相平衡30min,比例与所要求的缓冲溶液和有机相比例一致），待基线平稳后换用所要求的缓冲溶液和有机相按比例混合平衡柱子30min）。4.1。5保存方法将编辑好的方法保存起来。4.2进样分析在每个样品进样前，从“运行控制菜单中点

6、击“样品信息”,编辑好数据的保存路径。进样时，逆时针旋动进样器六通阀旋钮,进样完毕立即顺时针旋回该旋钮,并拔出进样针，妥善放置。4。3数据分析方法编辑点击屏幕桌面图标“HPLC1260（脱机）”。从“文件菜单中选择“调用信号”选项,选中您的数据文件名，点击确定，数据被调出。从“图形菜单中选择“信号选项”,设置信号包括的信息，从“范围”中选择“满量程或“自动量程”及合适的显示时间或选择“自定义量程”手动输入X、Y坐标范围进行调整，点击“确定”.反复进行,直到图的显示比例合适为止。第5页共10页Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）4。4积分4.4.1自动积分方法从“

7、积分”菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度”,“峰宽”,“最小峰面积”,“最小峰高。从“积分”菜单中选择“积分”选项,则数据被积分。如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止.后将积分参数存入方法,最后，选择“方法-保存方法/方法另存为”或直接保存数据分析方法.4。4.2手动积分方法选择“积分积分事件”，选择“手动积分事件”，如需更改，更改自动积分方法后,保存并关闭“积分事件”.选择“积分更新方法中的手动积分事件”，保存手动积分方法；选择“积分-应用方法中的手动积分事件，将手动积分方法应用到当前谱图中；选择“积分删除方法中的手动积分事件”,将从当前方法中删除手动积分事件

8、。最后，选择“方法保存方法/方法另存为”或者直接保存数据分析方法.4.5校正为“标准样品建立校正曲线（工作曲线/标准曲线），在色谱图正确积分后才可进行校正设置。4。5。1校正设置从“文件菜单中选择“调用信号”选项，选中您的标样数据文件名，点击确定，数据被调出。选择“校正-校正设置”设置校正参数.参考峰/其他峰-分钟栏留空，修改“”以改变确认保留时间范围内的峰都被认为是参考/其他峰含量单位-填写样品含量单位选择缺省校正曲线方法，“确定退出。第6页共10页Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）第 页共10页4。5。2建立校正表选择“校正-新建校正表”。出现“新建校正表

9、”菜单，“确定”即可。出现“校正表”表格，在图谱中选择需要校正的色谱峰,后在表格中“化合物”中填写化合物名称，“含量”中填写色谱峰对应物质含量。右侧“校正曲线”即可实时更新校正曲线图，并标注RSD和相关系数。“确定保存退出。最后，选择“方法保存方法/方法另存为”或者直接保存数据分析方法。4.5.3添加校正级别调用新的标样数据文件后，选择“校正添加级别，点击“确定”，在校正表中输入相应的标样浓度，点击“确定，右侧校正曲线窗口则会自动更新。4.5.4打印带校正表的报告选择“报告设定报告”，在“定量设置”中的计算模式一栏选定“外标法”，“报告设置为“完整报告”后,打印报告即可在“视图-信号选项”中选

10、择“化合物名称”即可将命名的化合物名称添加到打印的色谱图中.4.6打印报告选择“报告设定报告”选项,点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法，其它选项不变。选择“类型”，点击“确定”。从“报告”菜单中选择“打印”，则报告结果将打印到屏幕上。如想输出到打印机上，则在上图中左下角“目标”处，将打印机选上。若要生成其他格式的报告，则选定“文件，然后选择相应的格式即可。在方法菜单中，选择“运行时选项表”,确认“数据分析选项”也被选中，点击“确定。点击“保存按钮，存储修改的方法。此方法包含校准表,建立完毕。Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）4.7关机4。7

11、。1关闭检测器的灯关闭紫外检测器，关闭检测器的灯后冲洗系统,可以延长检测器灯的寿命。4.7。2冲洗系统没有盐缓冲溶液的流动相，（反相系统）用85%90%有机相+15%10%水相冲洗系统和反相色谱柱或者适宜的流动相冲洗系统和反相色谱柱;有盐缓冲溶液的流动相,（反相系统）用85%90%水相+15%10%有机相冲洗系统和反相色谱柱（反相系统）30min,除去反相色谱柱与系统中的盐溶液，然后用85%90%有机相+15%10%水相冲洗系统和反相色谱柱30min。4。7.3封存色谱柱（反相系统）用90%95%有机相+10%5%水相封存反相色谱柱，两端封死.（如长时间存放可将柱子完全浸泡有机相内,以防用纯有

12、机相封存反相色谱柱，如果长期保存有机相会挥发）。4。7.4关闭电脑将泵流速逐步降至0ml/min,单击“关闭”按钮关闭所有模块，退出化学工作站,关闭电脑。4.7.5关闭模块关闭所有模块电源。4.7.6冲洗六通阀上下反复旋动六通阀旋钮,用注射器注射去离子水进行反复冲洗,冲洗完毕后将旋钮旋至分析（inject）标志处，用空闲针头堵住进样口并盖上红色保护盖。第8页共10页维护5.1日常维护5.1。1运行环境为了仪器的合理运转及延长其使用寿命,应该将仪器放置在平稳固定的台面上,要求台面无振动,周围无辐射和磁场。另外,因为流动相大多数是有机溶剂，还要保持室内有一些排风扇等通风换气的设备.5.1.2开机维

13、护首先检查检测使用的流动相以及色谱柱是否准确无误，然后再打开仪器的稳定电源，然后再开输液泵，柱箱。设置好色谱柱的最大保护柱压,进行排气工作，并确保流路时不会有气泡。而流速不可操之过急，应该从小到大一点点地加速，这样是为了更好地保护色谱柱。5。1.3柱前维护注意不要把溶剂瓶放在光线强烈的地方，尽量使用琥珀色的溶剂瓶放置。还可以在色谱柱前加上保护柱，从而避免色谱柱的污染,进而延长色谱柱的使用寿命。5。1.4关机维护5。1.4。1实验完成后，首先关闭检测器，保证灯的有效使用年限。5.1.4。2没有盐缓冲溶液的流动相，（反相系统）用85%90%有机相+15%10%水相冲洗系统和反相色谱柱。5.1。4。3有盐缓冲溶液的流动相，（反相系统）用85%90%水相+15%10%有机相冲洗系统和反相色谱柱（反相系统）30min,除去反相色谱柱与系统中的盐溶液，然后用85%90%有机相+15%10%水相冲洗系统和反相色谱柱30min。第9页共10页Agilent1260高效液相色谱仪操作规程（word版可编辑修改）第 页共10页5。1.4。4泵的流速应慢速减小到0时，才可以关闭泵和稳压器。反相系统用9095%有机相+10%5%水相封存反相色谱柱。5.1.5其他维护流动相使用前必须过滤，不要使