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文档简介

1、关于实验十人类染色体核型分析第一张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验目的: 1、了解人类外周血淋巴细胞的培养和染色 体标本的制备方法 2、了解人类染色体的形态和分组特征,学 习染色体组型分析方法实验内容与原理: 1、人类染色体标本制作简介 人类外周血淋巴细胞的培养及染色体标本制作技术 淋巴细胞G0期或G1期 1960年Nowell和Morhead 植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)第二张,PPT共十一页,创作于2022年6月 外周血淋巴细胞的培养和染色体标本制作的步骤: 培养液的分装: 培养液:RPMI1640或M199、小牛血清、PHA、 肝素、双抗(青霉素、

2、链霉素) 采血:静脉采血 培养:37培养6672h 秋水仙素处理:秋水仙素分裂阻止剂 低渗处理:使红细胞破碎,白细胞膨胀 离心:收集白细胞 固定:固定液甲醇:冰醋酸=3:1 离心、再固定: 再离心:弃上清,留白细胞 制片: 第三张,PPT共十一页,创作于2022年6月 染色:Giemsa染液 镜检: 封片: 显微摄影进行核型分析 2、人类染色体组型分析 *核型(karyotype) *组型 (idiogram) *染色体组型分析 (1)染色体的数目 人类染色体2n=46 核型:正常男性 46,XY 正常女性 46,XX 第四张,PPT共十一页,创作于2022年6月 人类染色体按其形态大小分7组

3、:A、B、 C(X)、D、 E、F、 G(Y),其主要特点和鉴别要求如下: 组 别编号 形态 大小 着 丝 粒 位 置 随体 鉴 别 要 求 A13最大1、3中部2近中无要求明确区分各号 B45次大近中无要求不与其他组相混 C612中等近中无要求6、7、8不与其他混 D1315中等近端有要求不与其他组相混 E1618较小16中17、18近中无要求明确区分各号 F1920小中部无要求不与其他组相混 G2122最小近端有要求21、22与Y区分第五张,PPT共十一页,创作于2022年6月第六张,PPT共十一页,创作于2022年6月第七张,PPT共十一页,创作于2022年6月 染色体的排列规则: 染色

4、体的大小,大小 着丝粒位置,中部端部 (2)染色体的长度及着丝粒位置 1 m:微型染色体 14 m :小型染色体 412 m :中型染色体 12 m :大型染色体 相对长度: 第八张,PPT共十一页,创作于2022年6月 臂率: 1.011.70 中部着丝粒染色体m 1.713.00 近中着丝粒染色体sm 3.017.00 近端着丝粒染色体st 7.01 端部着丝粒染色体t 着丝粒指数 (3)随体及次缢痕的有无第九张,PPT共十一页,创作于2022年6月实验材料与用具: *人类染色体照片(复印) *剪刀、胶水、组型分析报告纸实验步骤: 1、染色体分组编号 了解各染色体的特点 一个照片作对照,另一分组编号用 2、核对、调整、粘贴 着丝粒在横线上,p在上q

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