食品饮料中维生素测定

1、关于食品饮料中维生素的测定第一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第一节 维生素的测定概述 维生素是调节人体各种新陈代谢过程必不可少的重要营养素。人体如从膳食中摄入维生素的量不足或者机体由于某种原因吸收或合成发生障碍时，就会引起各种维生素缺乏症。近几年已经查明仅有少数几种维生素可以在体内合成，大多数维生素都必须由食物供给。因此，维生素作为强化剂已在食品工业的某些产品中开始使用，测定食品中的维生素含量，不仅可评价食品的营养价值，同时还起到监督维生素强化食品的剂量，以防摄入过多的维生素而引起中毒，所以，测定食品中维生素在营养分析方面具有重要的意义。第二张，PPT共六十九页，创作于2022年6

2、月脂溶性微生物素（如A、D、E、K等）；水溶性维生素（如B1、B2、B6、C、B12等）。维生素A：是人体必需营养素，能促进人体发育，防止眼膜 炎、夜盲症等疾病。维生素B1：也叫硫胺素，对人体的功能主要是防脚气病、神经 炎，帮助消化，促进发育。维生素B2：对人体功能防口角炎、皮肤炎，防止怕光现象。维生素C：防坏血病，促进外伤愈合，使机体增强抵抗力。维生素D：调节体内矿物盐的平衡，特别是对人体内钙、磷的 代谢，并能防止软骨病。目前已发现的维生素约有二、三十种，按维生素溶解性能可将它们分成两大类：第三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月维生素的命名 1、 多根据发现的时间顺序以英文字母排序，

3、如维生素A、维生素B1、B2，维 生 素C， 维生素E等。 2、 也有根据特定生理功能，如抗干眼病因子、抗坏血酸、生育酚等， 3、 按照其化学结构如视黄醇、硫胺素、烟酸、叶酸等。第四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月脂溶性维生素的理化性质1、结构决定性质，大都具有UV吸收的特性！2、溶解性：脂溶性维生素不溶于水，易溶于苯、 乙醚、 丙酮、三氯甲烷、乙醇等有机溶剂。 3、耐酸碱性：维生素A、D对酸（ACID）不稳定，对碱稳定；维生素E在无氧情况下，对热、酸、碱稳定。维生素K 对酸、碱都不稳定。 4、耐热：维生素A、D、E、K耐热性都好， 5、耐光、耐氧化性： 维生素D性质稳定，不易被氧化

4、。维生素A易被氧化，光和热会促进其氧化。 维生素E容易被氧化，对可见光稳定但易被紫外线破坏。维生素K对热稳定，但容易被光、氧化剂及醇破坏。（这样在提取时，要求尽量避光、并加入抗氧化剂） 第五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月分析方法维生素的分析方法可分为以下几种：（1）涉及人体和动物的生物分析方法。（2）利用原生动物、细菌和酵母的微生物分析方法（3）分光光度法、荧光法、色谱、酶法和免疫等物理化学分析方法。第六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月脂溶性维生素测定样品预处理 样品 皂化脱脂 脱脂样品 有机溶剂提取脂溶性维生素 有机溶剂提取

5、液 浓缩测定第二节 脂溶性维生素的测定第八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月一、维生素A目前维生素A都是合成的，来源：（1）从动物脂肪中，主要在肝脏，鱼肝油，蛋类，乳类存在；（2）从维生素前体而得到（维生素前体：主要指类胡萝卜素，主要是-胡萝卜素,存在于深色果蔬中。） 维生素A的测定常用的方法有三氯化锑比色法、紫外分光光度法、荧光分析法、液相色谱法。第九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 对于三氯化锑比色法适用于样品中含VA高的样品，方法简便、快速、结果准确，但是对维生素A含量低的样品，如每克样品中含510g维生素A时，这时样品由于受其脂溶性物质的干扰，不应用比色法测定。 对于

6、紫外分光光度法不必加显色剂显色，可直接测定维生素A的含量，对样品中含VA低的也可以测出可信结果，操作简便、快速。第十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月1、维生素A的性质 因有许多不饱和链，故见光易分解； 在缺氧情况下，对热较稳定，对光特别敏感。如测强化奶粉时，速度要快，一般要求测定时间短，因为时间长，见光时间长，见光分解，故测出的比出厂的含量要少； 对碱稳定；第十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2. 测定方法2.1 三氯化锑光度法P1972.1.1 测定原理 在氯仿溶液中，维生素A与三氯化锑作用可生成蓝色可溶性络合物，在620nm波长处有最大吸收峰，其蓝色的深浅与维生素A的

7、含量在一定范围内成正比，故可通过吸光度测定维生素A的含量。 第十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月原理图示维生素A+三氯化锑氯仿溶液中兰色可溶性配合物620nm波长比色第十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月试剂无水硫酸钠、乙酸酐无水乙醚（不含过氧化物）无水乙醇（不含醛类物质）三氯甲烷（不含分解物和水）250g/L三氯化锑三氯甲烷溶液1+1氢氧化钠溶液、0.5mol/L氢氧化钾第十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月样品预处理样品测定样品预处理含有维生素A的样品大多需首先除去脂肪，把维生素A从脂肪中分离出来。常规的去脂方法是采用皂化法和研磨法。2.1.2 测定步骤第十

8、五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月A脂类的皂化P197 (1) 脂类含有维生素和脂肪这两部分，通过皂化（50%KOH、无水C2H5OH、热回流）把它们分开，得到一部分皂化物和一部分不皂化物。第十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月适用范围适用于维生素A含量不高的样品，但全部试验过程费时，且易导致维生素A的损失。第十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月目前皂化有三种情况：低碱 = 脂肪KOH为12.5的关系 另外在皂化时加抗氧化剂与不加抗氧化剂回收率不一样，加抗氧化剂的回收率高于不加抗氧化剂的回收率。 低温（室温）中温（702）高温（10015min）低碱低碱低碱回收率

9、不完全回收率46%回收率70%第十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 （3）提取 将皂化液移入分液漏斗，先用50ml水分两次冲洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗。再用 100ml乙醚分两次冲洗皂化瓶，所有洗液并入分液漏斗，振摇2min，提取不皂化部分。静止分层后，水层放入第二分液漏斗。皂化瓶再用 30ml乙醚分两次冲洗，洗液倾入第二分液漏斗，振摇后静止分层，将水层放入第三分液漏斗，醚层并入第一分液漏斗。如此重复操作，直至水层不再使三氯化锑一三氯甲烷溶液呈蓝色为止。合并乙醚层后，先用水洗提后，再用0.5mol/LKOH溶液洗涤除去醚溶性酸皂，再用水洗涤醚层，直到洗涤水不呈碱性（用酚酞指示剂指示

10、）为止。第十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（4）浓缩 将醚层液经过无水硫酸钠滤入三角瓶中，再用约15ml乙醚冲洗分液漏斗和硫酸钠两次，洗液并入三角瓶内。用55度水浴蒸馏，回收乙醚。待瓶中剩约5ml乙醚时取下。减压抽干，立即准确加入一定量三氯甲烷（约5ml左右），使溶液中维生素A含量在适宜浓度范围内(35g）。第二十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2.1.3 计算SbCl3比色法 维生素ACHCl3 SbCl3CHCl3形成兰色物质在620nm有最大吸光峰 这种兰色物质不稳定，很快褪色或变成其它物质，所以在分析时最好在暗室中进行，并且做标准曲线。计算：每百克样品含VA的量

11、= C（V1/V2）（100/W） C ：从标准曲线上查得VA的量 V1 ： CHCl3定容的量 V2 ： 测定所取样液体积第二十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月B、研磨法 适用于每克样品维生素A的含量大于510g样品的测定，如猪肝的分析。步骤简单、省时，结果准确。研磨 精确称取25g样品，放入盛有35 倍样品质量的无水硫酸钠研钵中，研磨至样品中水分完全被吸收，并均质化。第二十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月提取 小心地将全部均质化的样品移入带盖的三角瓶内，准确加入50100ml乙醚。紧压盖子，用力振摇2min；静置澄清（大约需12 h），或离心澄清（保持低温）。浓缩

12、取澄清提取乙醚液25m1，放入比色管中，在7080水浴上抽气蒸干；然后立即加入lml三氯甲烷溶解残渣，供比色用。第二十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月标准曲线的绘制6个3cm比色管编号 1 2 3 4 5 6加各种浓度VA标液1ml 10 20 30 40 50 60 ug/ml乙酸酐（滴） 1 1 1 1 1 1于620nm波长处，以 10ml三氯甲烷加1滴乙酸酐调节吸光度至零点；然后将标准比色系列按顺序移入光路前，迅速加入9ml三氯化锑一三氯甲烷溶液，于6s内测定吸光度（每支比色管都在临测前加入显色剂）。以维生素A含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制曲线。第二十四张，PPT共六十

13、九页，创作于2022年6月2.1.3样品测定 取两个3cm比色管，其中一个加入10ml三氯甲烷（样品空白液）和1滴乙酸酐作为空白液；另一支加入lml样品溶液，再加1滴乙酸酐。其余步骤同标准曲线的制备。分别测定样品空白液和样品溶液的吸光度，从标准曲线中查出相应的维生素A含量。第二十五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2.1.4计算式中 -维生素A含量,单位mg/100g； c-由标准曲线上查得样品溶液中维生素A的含量，g/ml； c0-由标准曲线上查得样品空白液中维生素A的含量，g/ml； m-样品质量，g； V-样品提取后加入三氯甲烷定容之体积，ml； 100-以每100g样品计。第二

14、十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月说明及讨论（1）本法摘自GB12388-1990，适用于食品中维生素A的测定（2） SbCl3 具有腐蚀性，不能粘在手上。且与水生成白色沉淀，所以不能碰到水。（3） SbCl3 与维 生素A生成的蓝色物质很不稳定，要在6S内完成吸光度的测定，否则蓝色反应逐渐消失，使结果偏低。（4）维生素A 见光易分解，整个实验应在暗处进行（5）本法适用于维生素A 含量较高的样品。第二十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月紫外吸收光谱：分子价电子能级跃迁。波长范围：100-800 nm.(1) 远紫外光区: 100-200nm (2) 近紫外光区: 200-

15、400nm(3)可见光区:400-800nm 250 300 350 400nm1234e 可用于结构鉴定和定量分析。 电子跃迁的同时，伴随着振动转动能级的跃迁;带状光谱。2 测定方法2.2 紫外分光光度法紫外吸收光谱的产生第二十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月Lamber-Beer定律：吸收光谱法基本定律描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系假设一束平行单色光通过一个吸光物体 第二十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月紫外分光光度法测定维生素A E是吸收系数原理：VA为脂溶性的，测定VA时必须先将样品中的脂肪抽提出来进行皂化，萃取不皂化部分，在经柱层析除去杂

16、质等干扰物质，在紫外328nm下测定，求出含量。第三十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月方法 1） 提取及皂化 :称样10.00g 于烧杯中 加40ml水搅匀 移250ml分液漏斗中 加氨水5ml 加乙醇35ml 摇匀 用乙醚抽提（每次40ml抽提三次） 收集乙醚层 用10ml水洗乙醚层三次 水层再用30ml乙醚抽提一次 合并所用乙醚 用索氏法除乙醚 待瓶中乙醚除尽后 加30ml80%的KOH 40mlC2H5OH 加0.8g焦性没食子酸 83水浴30分钟（皂化脂肪） 冷却后移入250ml分液漏斗中 加60ml水 用40ml乙醚抽提三次 合并乙醚抽提液 用水洗至中性 用索氏法除乙醚 除

17、去后用5ml石油醚溶解瓶中内容物 然后移入刻度试管中 第三十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 2）层析 在层析柱内装8cm高度中性氧化铝 2cm高度碱性氧化铝及1cm无水硫酸钠 以石油醚浸透 装皂化后的样液慢慢于柱内 用12ml石油醚洗试管 洗液倒入柱内，活塞打开以每分钟为35滴左右的速度打开，当液面降到接近硫酸钠时 加5ml石油醚 随后用5ml洗脱液逐次洗涤。 层析柱上第一个黄色层析层，一般是-胡萝卜素，此带在12%洗脱液前后洗去，收集于10ml容量瓶中直到流出物不呈黄色为止，此层可测-胡萝卜素用，而VA一般在50%洗脱液洗出，用2ml刻度吸管收集1ml。吸约0.2ml于小试管中

18、加0.3ml25%三氯化锑溶液如呈兰色表明有VA存在，故0.5ml用石油醚定容10ml。b. 方法第三十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月二、维生素D 1.维生素D的性质 维生素D是类固醇的衍生物，具有维生素D活性的物质约10余种，在功能上可以防治佝偻病。其中最主要的是维生素D2(麦角钙化醇)和维生素D3(胆钙醇)。是由维生素D原经紫外线照射形成的。 维生素D在鱼肝油和鸡蛋黄等食品中含量较多，一般成人不会缺VD，而婴儿容易缺乏。 维生素D2 药片吃多了中毒。第三十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2. 测定方法2.1 三氯化锑光度法 原理：在三氯甲烷溶液中，维生素D与三氯化

19、锑结合生成一种橙黄色化合物，并于500nm波长处有一个最大吸收，其呈色程度与维生素D含量成正比。 维生素DCHCl3 SbCl3CHCl3 形成橙黄色物质 500 nm下测定 第三十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月说明 食品中维生素D含量一般较低，而其他维生素及物质含量大于维生素D，对测定产生干扰，测定前必须经柱层析除去这些物质。 此法测定值为D2和D3的总量。第三十五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2.2 紫外分光光度法 VD乙醇 265 nm下测定第三十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2.3 高效液相色谱法（HPLC）基本原理：试样在焦性没食子酸的保护下皂

20、化，用石油醚萃取不皂化物，萃取物经正相色谱柱分离富集，再用反相色谱柱进一步分离，紫外检测器测定，与标准试样比较定量。第三十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月三、 -胡萝卜素的测定P198 （GB/T 5009.832003 ）第一方法是HPLC； 第二方法为纸层析法。胡萝卜素是一种广泛存在于有色蔬菜和水果中的天然色素，有多种异构体和衍生物，总称为类胡萝卜素，其中在分子结构中含有 一紫罗宁残基的类胡萝卜素，在人体内可转变为维生素A，故称为维生素A原。如、胡萝卜素，其中以胡萝卜素效价最高。第三十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 胡萝卜素原只存在于植物性食品中，但以含有胡萝卜为

21、食物的家禽、兽类、水产动物及其加工产品，以及为着色而添加胡萝卜素的食品，当然也含有胡萝卜素。第三十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 胡萝卜素对热及酸、碱比较稳定，但紫外线和空气中的氧可促进其氧化破坏。因系脂镕性维生素，故可用有机溶剂从食物中提取。 胡萝卜素本身是一种色素，在450 nm 波长处有最大吸收，故只要能完全分离，便可定性和定量。但在植物体内，胡萝卜素经常与叶绿素、叶黄素等共存，在提取 一胡萝卜素时，这些色素也能被有机溶剂提取，因此在测定前，必须将胡萝卜素与其它色素分开。常用的方法有纸层析、柱层析和薄层层析法。第四十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第三节 水溶性维

22、生素的测定一、维生素B1的测定VB1又叫硫胺素1、食品中VB1的存在形式 常以游离态存在；复合脂形式存在（磷蛋白）； 辅羧酶形式存在 VB1在酵母、米糠、麦胚、花生、黄豆以及绿色的蔬菜和牛乳、蛋黄中比较丰富，动物组织不如植物含量丰富。第四十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2、VB1的性质 VB1在中性、碱性下不稳定，易分解； VB1在酸性条件下稳定，即使加热酸性也稳定； VB1为白色结晶，微溶于C2H5OH，不溶于乙醚或CHCl3，易溶于水。第四十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月3、VB1的测定世界各国都用荧光比色法测定P202 原理：硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中，被氧化

23、成一种蓝色荧光物质，即为硫色素，在紫外光下，硫色素发出荧光。 第四十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 方法(a) 提取称取一定量的试样，加0.3mol/LHCl溶液使其溶解后置于103KPa压力锅中水解，冷却后中和至pH=4.5，用淀粉酶使淀粉水解，也可用磷酸酶使淀粉水解，于50恒温箱中12小时 ，使硫胺素游离出来。第四十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（b）纯化（采用柱层析提纯） 吸附剂采用的是人造浮石。人造浮石用25%KCl溶液分数次洗涤，主要是把VB1吸附上去，吸附上去后，再用热水淋洗，最后用25%KCl-HAC把VB1洗脱下来，这样就得到纯VB1，再根据上面的原

24、理在碱性下分析。（c)氧化分别取A,B两个Maizel-Gerson反应瓶，各加5mL试样净化液，A瓶加3mL15g/100mL氢氧化钠溶液（试剂空白），B瓶中加3mL碱性铁氰化钾溶液（试样），于相同条件下震摇，各加10mL正丁醇萃取。同样步骤做标准硫胺素应用液的氧化和提取，分离出萃取液后供测荧光强度。第四十五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月Maizcl-Gerson反应瓶 第四十六张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（2）定量方法标准曲线法： 配制一系列标准浓度试样测定荧光强度，绘制标准曲线，再在相同条件下测量未知试样的荧光强度，在标准曲线上求出浓度第四十七张，PPT共六十九

25、页，创作于2022年6月二、维生素B2的测定P204（1）VB2的特性（Properties of VB2）对热稳定，对酸和中性pH也稳定,在120 加热6h仅少量破坏。在碱性条件下迅速分解。在光照下转变为光黄素和光色素,并产生自由基,破坏其它营养成分产生异味,如牛奶的日光臭味即由此产生。（2）测定方法有荧光法和高效液相色谱法。第四十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月第四十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月三、维生素C的测定 P206 维生素C是一种已糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以被人们称做抗坏血酸，主要为还原型及脱氢型两种，广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是

26、枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量较多。它是氧化还原酶之一，本身易被氧化，但在有些条件下又是一种抗氧化剂。 第五十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 维生素C（还原型）纯品为白色无臭结晶，熔点190192，溶于水或乙醇中，不溶于油剂。在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件中较稳定，维生素C开始氧化为脱氢型抗坏血酸（有生理作用）。如果进一步水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。第五十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 根据它具有的还原性质可以测定维生素C的含量。常用的测定方法有（1）2，6-二氯靛酚法 （还原型VC）（2）2，4-二硝基苯肼法

27、（总VC）（3）碘酸法（4）碘量法（5）荧光法第五十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月1. 2，6-二氯靛酚滴定法P2091、原理：还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色（在中性和碱性条件下呈蓝色），被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。 在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。第五十三张，PPT共六十九页，创作于2022年6月（一）二氯靛酚法（测定还原型抗坏血酸）原理图示还原型抗坏血酸还原型2，6-二氯靛酚法（无色）H+2，6-二氯靛酚法（粉红色）+脱氢型抗坏血

28、酸+第五十四张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2、试剂 1%草酸溶液：称取10g草酸，加水至1000ml； 2%草酸溶液：称20g草酸，加水至1000ml； 维生素C标准液：准确称20mgVC溶于1%草酸中，并稀释至100ml，吸5ml于50ml容量瓶中，加入1%草酸至刻度，此溶液每毫升含有0.02mgVC；第五十五张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 0.02%2，6-二氯靛酚溶液：称取2，6-二氯靛酚50mg，溶于200ml含有52mg碳酸氢钠的热水中，冷却后，稀释至250ml，过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内，应用过程中每星期标定一次。第五十六张，PPT共六十九页，创作于202

29、2年6月标定一：吸标液（VC）5ml于三角瓶加6%KI溶液0.5ml加1%淀粉3滴用0.001N KIO3标液滴定到淡兰色。计算： 抗坏血酸浓度（mg/mL）= （V1 0.088）/ V2V1 - 滴定时消耗0.001N KIO3标液的体积（mL）V2 -维生素C溶液的体积（mL）0.088 -1ml0.001N KIO3标液维生素C的量（mg/mL） 第五十七张，PPT共六十九页，创作于2022年6月标定二：吸5ml已知浓度V C标液 加5ml1%草酸 用染料2，6-二氯靛酚滴定至溶液呈粉红色，在15秒不褪色为终点计算：每毫升2，6-二氯靛酚相当于维生素C的毫克数等于滴定度（T） T= （

30、C V1）/ V2C - 维生素C的浓度（mg/ml）V1 -维生素C的体积（ml）V2 -消耗2，6-二氯靛酚的体积（ml） 第五十八张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 0.001N KIO3标液：吸0.1N KIO3溶液5ml于500ml容量瓶内加水至刻度，每毫升相当于VC0.008mg； 0.5%淀粉溶液； 6%KI溶液。第五十九张，PPT共六十九页，创作于2022年6月3、操作方法 提取：称样50g加2%草酸100ml到入捣碎机中处理过滤颜色若深可加白陶土，将上述溶液过滤，滤液备用。 滴定：吸5ml样液于三角瓶用染料滴定至粉红色15秒内不褪色计算：VC（mg/100g）=（V

31、T）/ W 100 V -消耗染料体积（ml）T -1ml染料所能氧化维生素C的毫克数W- 滴定时所有滤液中含有样品的克数 第六十张，PPT共六十九页，创作于2022年6月注意事项 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水； 滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考； 样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失维生素C； 整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化； 在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；第六十一张，PPT共六十九页，创作于2022年6月 贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低价铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生； 测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。第六十二张，PPT共六十九页，创作于2022年6月2、2，4-二硝基苯肼法P208 可测总抗坏血酸，总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸型。此法是将样品的还原型抗坏血酸氧化为脱