维生素D的分析、结构和性质

1、维生素D的分析、结构和性质维生素D2（骨化醇、麦角骨化醇）维生素D3（胆骨化醇）1. 溶解性 脂溶性2. 不稳定性 含多个双健易被氧化， 对酸不稳定3. 旋光性 性状项下比旋度一、结构与性质4. 显色反应5. 紫外吸收特征 性状项下吸收系数二、鉴别试验（一）显色反应1. 与醋酐-浓硫酸反应 （2005）维生素D2（2005）【鉴别】（1）取本品约，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐与硫酸，振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后成绿色。维生素D3（2005）【鉴别】（1）取本品约，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐与硫酸振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色、蓝绿色，最后变为绿色。2. 与三氯化锑

2、反应 BP3. 其他显色反应维生素D + 三氯化锑 橙红色粉红色（二）（2005）维生素D2（2005）【鉴别】（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集452图）一致。（三）维生素D2、D3的区别反应 维生素D 与乙醇+硫酸反应维生素D2显红色，max在570nm维生素D3显黄色，max在495nm三、杂质检查维生素D2中麦角甾醇的检查灵敏度法维生素D2（2005）【检查】麦角甾醇 取本品10mg，加90%乙醇2ml溶解后，加洋地黄皂苷溶液（取洋地黄皂苷20mg，加90%乙醇2ml，加热溶解制成）2ml，混合，放置18小时，不得发生浑浊或沉淀。四、含量测定HPLC 药典附录维生素D测定

3、法 共有三法第一法 适用于无维生素A醇及其它杂质干扰时 正相色谱、内标法1. 色谱条件 色谱柱 硅胶 流动相 正己烷 正戊醇（997:3） 内 标 邻苯二甲酸二甲酯 2. 系统适应性试验维生素D3对照品维生素D3前维生素D3反式维生素D3速甾醇D3光照目的 获得待测成分及各种干扰成分色谱峰， 检查分离度是否符合规定3. 计算校正因子（对照品为维生素D3）（1）维生素D校正因子（f1）（2）前维生素D折算成维生素D的校正因子（f2）4. 计算含量维生素D及前维生素D折算成维生素D的总量（mi）单位 = 0.025 g 第二法 适用于有维生素A醇及其它杂 质干扰时按第一法第三法 适用于按第二法处理

4、后前维 生素D仍被干扰的样品第二法净化后样品维生素D外标法计算维生素D含量维生素D2（2005）【含量测定】 精密称取本品25mg，置100ml棕色量瓶中，加三甲基戊烷80ml，避免加热，用超声处理1分钟使溶解，加三甲基戊烷至刻度，摇匀；精密量取上述溶液与内标溶液各5ml，置50ml棕色量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀，作为供试品溶液。照维生素D测定法（附录 K 第一法）测定，即得。苯并二氢吡喃醇第五节 维生素E 名 称R1R2相对活性-生育酚-生育酚-生育酚-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1*生物效价 右旋体 ： 消旋体 = 1.4 ：10（天然品）（合成品）dl生

5、育酚醋酸酯结构与性质一、苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链1、易溶于有机溶剂，不溶于水2、UV3、酯键 易水解7515（一）硝酸反应橙红色鉴别二、（橙红色）生育红生育酚HNO3强氧化剂 取本品约30mg，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在75加热15分钟，溶液应显橙红色。三氯化铁联吡啶反应O（二）生育酚对-生育醌O弱氧化剂红色 = 41.045.5max = 284nmmin = 254nm0.01%无水乙醇中UV法（三）维生素EUV图薄层板 硅胶G展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1）显色剂 硫酸（105 5） VitE Rf TLC法（四）三、特殊杂质1. 酸度 检查制备过程中引

6、入的游离羧酸，酸碱滴定法2. 游离生育酚的检查 硫酸铈滴定液（）二苯胺（亮黄灰紫） 利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈原理（一）试剂（二）（M生育酚）例 取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（mol/L）不得过 1.0ml。限量（三）药典规定消耗硫酸铈液（）设：应消耗硫酸铈液 V ml0.011.0 实际浓度 V若硫酸铈液浓度不是，应重新计算硫酸铈的消耗量例 Ce(SO4)2 四、含量测定GC法（一）GC特点1、选择性好灵敏度高速度快分离效能好挥发性低、不稳定、极性强衍生化易受样品蒸气压限制载气N2固定液硅酮（OV-

7、17）担体硅藻土或高分子多孔小球柱温265检测器氢火焰离子化检测器(FID)内标正三十二烷 n 500 R2VitE测定的色谱条件2、内标法加校正因子内标法供试液（样品+内标）内标物对照液（对照+内标）是样品中不存在的物质与被测组分峰靠近能与各组分完全分离与被测组分的量接近校正因子：实际工作中的计算方法例内标液 取正三十二烷加正己烷溶解 并稀释成溶液对照液 精密称取VitE对照品0.2011g 置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内 标液10ml，密塞，振摇使溶解，取 13ul注入GC仪，测定，计算供试液 精密称取供试品置棕 色具塞锥形瓶中，精密加入内标液 10ml，密塞，振摇使溶解，取13ul 注入

8、GC仪，测定，计算对照液供试液0.3730.368本品含C31H52O3应为96.0 102.0%BP GC 内标 正三十二烷 USP GC 内标 十六酸十六醇酯 JP HPLC 外标 dl生育酚利用生育酚的易氧化性还原型氧化型二苯胺（亮黄灰紫）原理1、铈量法（二）指示剂2、防止Ce(SO4)2的水解减慢生育酚被O2氧化速度C、酸性条件Ce(SO4)2易溶于水生育酚易溶于醇B、溶剂分子量较大，反应慢 易被O2氧化A、反应速度H2SO4讨论3、含量计算4、MVitE = 472样品 dl生育酚固定相十八烷基硅烷键合硅胶流动相甲醇-水（49 ：1）检测波长292nm RSD0.8%JP - RP

9、- HPLC法（外标法）（三）测定对象血清中VitA和VitE固定相十八烷基硅烷键合硅胶流动相甲醇-水（96 ：4）检测波长 8前330nm 8后292nmRP - HPLC法（外标法）（四）108在三氯醋酸或盐酸存在下，经 水解、脱羧、失水后，加入吡 咯即产生蓝色产物的药物应是 A. 氯氮卓 B. 维生素A C. 普鲁卡因 D. 盐酸吗啡 E. 维生素C99：88中国药典（2000年版）采用 以下何法测定维生素E含量 A. 酸碱滴定法 B. 氧化还原法 C. 紫外分光光度法 D. 气相色谱法 E. 非水滴定法98：79中国药典（2000年版）采用 气相色谱法测定维生素E含 量，内标物质为 A

10、. 正二十二烷 B. 正二十六烷 C. 正三十烷 D. 正三十二烷 E. 正三十六烷 99：77. 下列药物的碱性溶液，加入 铁氰化钾后，再加正丁醇， 显蓝色荧光的是 A. 维生素A B. 维生素B1 C. 维生素C D. 维生素D E. 维生素E97：77既具有酸性又具有还原性的 药物是 A. 维生素A B. 咖啡因 C. 苯巴比妥 D. 氯丙嗪 E. 维生素C99m：132.维生素C的鉴别反应，常采 用的试剂有 A. 碱性酒石酸铜 B. 硝酸银 C. 碘化铋钾 D. 乙酰丙酮 E. 三氯醋酸和吡咯99m：84. 测定维生素C注射液的含量 时，在操作过程中要加入 丙酮，这是为了 A. 保持维

11、生素C的稳定 B. 增加维生素C的溶解度 C. 使反应完全 D. 加快反应速度 E. 消除注射液中抗氧剂的干扰98：85. 能发生硫色素特征反应的药物 是 A. 维生素A B. 维生素B1 C. 维生素C D. 维生素E E. 烟酸97：81使用碘量法测定维生素C的 含量,已知维生素C的分子量 为，每1ml碘滴定液 (0.1mol/L) 相当于维生素C 的量为 A. 17.61mg B. 8.806mg C. 176.1mg D. 88.06mg 97：121125（99：121125） 可发生以下反应或现象的药物为 A.维生素B1 B.维生素C C.两者均能 D.两者均不能 121.与碘化汞

12、钾生成黄色沉淀 122.麦芽酚反应 123.在乙醚中不溶 124.与2,6-二氯靛酚反应使颜色消失 125.硫色素反应ADCBA115维生素A的鉴别试验为 A. 三氯化铁反应 B. 硫酸锑反应 C. 2,6-二氯靛酚反应 D. 三氯化锑反应 E. 间二硝基苯的碱性乙醇液反 应77中国药典（2000年版）规定维生 素A的测定采用紫外分光光度法 （三点校正法），此法又分为 A等波长差法 B等吸收度法 C6/7 A法 D差示分光法 E双波长法78维生素E的鉴别试验有 A硫色素反应 B硝酸氧化呈色反应 C硫酸-乙醇呈色反应 D碱性水解后加三氯化铁乙醇 液与2,2-联吡啶乙醇液呈色反 应 EMarqui

13、s反应80. 下面哪些描述适用于维生素A A. 分子具有长二烯醇侧链，易被氧化 B. 具有较长的全反式共轭多烯结构 C.含酯键，经水解后产生苯并二氢吡 喃衍生物，易被氧化 D.与三氯化锑的无醇氯仿液中呈不稳 定兰色，很快转变为紫红色 E.样品用无水乙醇溶解后，加硝酸加 热后，呈橙红色 维生素A与 反应即显蓝色，渐变成紫红色；反应需在 条件下进行。 （ ） 维生素A分子中由于具有共轭多烯侧链，因而其性质很稳定，不易被氧化变质。三氯化锑无水 维生素E在酸性或碱性溶液中加热可水解生成游离 ，当有氧或其他氧化剂存在时，则进一步被氧化成醌型化合物，尤其在碱性下更易发生。生育酚 维生素B1 的噻唑环在 介质中可开环，再与嘧啶环上氨基缩合环合，然后经 等氧化剂氧化生成具有荧光的 ，加 荧光消失，加 荧光又显出；此反应称为 反应。碱性铁氰化钾硫色素酸碱硫色素 维生素C是 元弱酸，具有强 性，易被氧化剂氧化，常用作其它制剂的 剂。 一还原抗氧 维生素E中游离生育酚的检查时规