液相芯片技术的原理与应用进展

1、液相芯片技术的原理与应用进展【摘要】液相芯片是20世纪90年代中期发展起来的被喻为后基因组时代的新型芯片技术，具有高通量、灵活、快速、准确、重复性好、操作简便等众多优点，可用作蛋白质和核酸等生物分子的高通量检测平台。本文简要介绍其原理、优点，并对该技术在基础研究、临床诊断等方面的应用进展作一综述。【关键词】液相芯片；Luminex；xMAP技术【Abstract】Suspensionarray,anovelandpowerfulpostgenomiceratool,wasfirstdevelopedin1997basedonLuminexthroughput,flexibility,rapid

2、nessandmultiplexingability,suspensionarrayprovidesanopenplatformforassaysofprotein,andreviewedapplicationsofthisnewarraytechnologyinbasicresearchandclinicaldiagnosis.【Keywords】suspensionarray;Luminex;xMAPtechnology液相芯片，也称为微球体悬浮芯片（suspensionarray，liquidchip），是基于xMAP（flexibleMultiAnalyteProfiling）技术的新

3、型生物芯片技术平台，它是在不同荧光编码的微球上进行抗原抗体、酶底物、配体受体的结合反应及核酸杂交反应，通过红、绿两束激光分别检测微球编码和报告荧光来达到定性和定量的目的，一个反应孔内可以完成多达100种不同的生物学反应，是继基因芯片、蛋白芯片之后的新一代高通量分子检测技术平台。迄今为止十年时间，全球已有数百套基于xMAP技术的检测平台用于免疫学、蛋白质、核酸检测、基因研究等领域，该技术已成为一种新的蛋白质组学和基因组学研究工具，也是最早通过美国食品与药物管理局（FDA）认证的可用于临床诊断的生物芯片技术。1液相芯片技术的原理液相芯片体系由许多大小均一的圆形微球（直径m）为主要基质构成，每种微球

4、上固定有不同的探针分子，将这些微球悬浮于一个液相体系中，就构成了一个液相芯片系统，利用这个系统可以对同一个样品中的多种不同分子同时进行检测，这种被称之为xMAP的检测技术是1997年由美国Luminex公司开发出来的。在液相系统中，为了区分不同的探针，每一种固定有探针的微球都有一个独特的色彩编号，或称荧光编码。在微球制造过程中掺入了红色和橙色两种荧光染料（这两种染料各有10种不同区分），从而把微球分为100种不同的颜色，形成一个具有独特光谱地址的含有100种不同微球的阵列。不同颜色微球在分类激光激发下产生的荧光互不相同，这种分类荧光是识别不同微球的唯一途径。利用这100种微球，可以分别标记上100种不同的探针分子。检测时先后加入样品和报告分子与标记微球反应，样品中的目的分子（待检测的抗原或抗体、生物素标记的靶核酸片段、酶等）能够与探针和报告分子特异性结合，使交联探针的微球携带上报告分子藻红蛋白，随后利用仪器（如Luminex100）对微球进行检测和结果分析。Luminex1